【摘要】 目的 探討缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）結(jié)腸癌中的表達(dá)和臨床意義。方法 應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法，檢測(cè)60例結(jié)腸癌及近端腸管距癌灶5cm、10cm的腸管組織中HIF-1α。結(jié)果 結(jié)腸癌組中HIF-1α陽(yáng)性表達(dá)率為76.67%，距癌灶5cm、10cm的腸管組織中HIF-1α的表達(dá)率分別為21.67%、3.33%，前者與后二者相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），后二者相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。HIF-1α在結(jié)腸癌中不同臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 HIF-1α的表達(dá)參與了結(jié)腸癌癌細(xì)胞分化及發(fā)展，可作為評(píng)估結(jié)腸癌發(fā)展、治療及預(yù)后的重要參考指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】 結(jié)腸癌；HIF-1α；免疫組織化學(xué)

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.11.049 文章編號(hào)：1004-7484（2013）-11-6175-02

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2010年——2013年中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院病理科資料保存完整的外科切除的結(jié)腸癌石蠟標(biāo)本60例，全部病例均經(jīng)病理證實(shí)。要求所有病例均為首發(fā)，術(shù)前均未行放、化療及其他抗腫瘤治療，其中女28例，男32例；年齡32-68歲，平均（50.4±3.4）歲；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移30例。

1.2 主要試劑 兔抗人HIF-1α多克隆抗體購(gòu)自Abcom公司，SP試劑盒（即用型）及DAB顯色劑均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，HIF-1α稀釋度為1：100。

1.3 方法 采用免疫組化SP法，按說(shuō)明書(shū)操作，用PBS液代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.4 結(jié)果判斷 以細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性。結(jié)果分析參照以往文獻(xiàn)，在雙盲法下，按每張切片中細(xì)胞著色評(píng)分：無(wú)著色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；按每張切片中的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占全部腫瘤細(xì)胞百分比記分（隨機(jī)取20個(gè)高倍鏡視野的平均數(shù)）：<5%為0分；5%-20%為1分；21%-50%為2分；51%-70%為3分；大于71%為4分。根據(jù)兩項(xiàng)指標(biāo)積分?jǐn)?shù)高低分為：0、1分為陰性（-）；2-4分為弱陽(yáng)性（+）；5-8分為陽(yáng)性（++）；9-12分為強(qiáng)陽(yáng)性（+++）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所得結(jié)果采用X2檢驗(yàn)及Fisher精確概率法，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 HIF-1α在結(jié)腸癌、近端腸管距癌灶5cm、10cm中的表達(dá) 見(jiàn)表1。

2.2 HIF-1α的表達(dá)與結(jié)腸癌的臨床病理特征的關(guān)系 見(jiàn)表2。

HIF-1α在中低分化中陽(yáng)性率為87.0%，比高分化中陽(yáng)性率為50.0%高，對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；臨床分期Ⅲ-Ⅳ期中陽(yáng)性率為88.9%，比Ⅰ-Ⅱ期中陽(yáng)性率為53.3%高，對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中陽(yáng)性率為86.7%，比無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中陽(yáng)性率為50.0%高，對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與性別和年齡無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

3 討 論

腫瘤的無(wú)限性浸潤(rùn)生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移是腫瘤重要的生物學(xué)行為特征，也是腫瘤治療失敗導(dǎo)致生存期短的重要原因。腫瘤細(xì)胞在有氧環(huán)境下生長(zhǎng)緩慢，但在缺氧環(huán)境下生長(zhǎng)迅速，同時(shí)腫瘤組織中的低氧環(huán)境是腫瘤臨床治療效果不好，易產(chǎn)生耐藥的重要因素。HIF-1α是氧調(diào)節(jié)蛋白，能控制血管生成而控制氧的運(yùn)輸，并調(diào)控糖酵解來(lái)增強(qiáng)機(jī)體對(duì)缺氧的耐受。HIF-1α位于腫瘤細(xì)胞缺氧的核心位置，是啟動(dòng)腫瘤細(xì)胞為適應(yīng)低氧環(huán)境而在血管生成、細(xì)胞調(diào)亡、侵襲和轉(zhuǎn)移等方面發(fā)生一系列代謝及生物學(xué)行為改變的重要因子[1]。HIF-1α能促進(jìn)VEGF、內(nèi)皮素1等表達(dá)增加，而促進(jìn)血管生成，腫瘤增殖及轉(zhuǎn)移，同時(shí)受其他癌基因調(diào)控。多項(xiàng)研究表明，HIF-1α能誘導(dǎo)腫瘤新生血管的生成；參與腫瘤細(xì)胞能量代謝，促進(jìn)糖酵解；促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移；增加腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥的耐藥性，對(duì)放療的抵抗性。有研究發(fā)現(xiàn)，HIF-1α的表達(dá)與肺癌呈正相關(guān)，它的高表達(dá)促進(jìn)肺癌細(xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移[2]。在肺癌中，HIF-1α的高表達(dá)與多藥耐藥相關(guān)蛋白的表達(dá)有明顯的相關(guān)性[3]。有研究表明，HIF-1α在胃癌細(xì)胞中呈現(xiàn)高表達(dá)，與胃癌的演進(jìn)、惡性程度高低有一定的關(guān)系。

本研究中，HIF-1α在結(jié)腸癌中的表達(dá)明顯高于正常腸管上皮細(xì)胞，對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），并與結(jié)腸癌的分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)，可作為評(píng)估結(jié)腸癌發(fā)生、發(fā)展、治療及預(yù)后的重要參考指標(biāo)。因此，檢測(cè)HIF-1α的表達(dá)具有一定的臨床意義。

參考文獻(xiàn)

[1] 唐彬秩.低氧誘導(dǎo)因子-1α：調(diào)節(jié)腫瘤生物學(xué)行為的關(guān)鍵因子[J].生命的化學(xué)，2009，29（2）：184-188.

[2] 米東輝.HIF一1α表達(dá)與肺癌生物學(xué)行為關(guān)系的研究[J].中國(guó)老年學(xué)雜志，2007，27（9）：80-881.

[3] 夏曙.非小細(xì)胞肺癌中HIF-1α蛋白的表達(dá)與多藥耐藥蛋白相關(guān)性的研究[J].中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，2004，21（12）：1515.