【摘 要】采用激素及低溫層積處理北五味種子，研究其胚率及貯藏物質(zhì)含量變化。結(jié)果表明：激素及低溫層積處理可促進(jìn)胚形態(tài)、生理后熟及貯藏物質(zhì)代謝，其中6-BA：50 mg·L-1，GA3：200 mg·L-1處理中，胚率、可溶性蛋白，總核酸、裂口率和芽率顯著高于其他處理。

【關(guān)鍵詞】北五味子；激素；低溫層積處理；貯藏；影響

北五味子，又名山花椒，為木蘭科多年生落葉木質(zhì)藤本植物。北五味子溫平無毒，具有保肝、助眠、養(yǎng)顏等多種功效，藥膳兼用，是我國的傳統(tǒng)中藥，也是東北地區(qū)的道地藥材。但目前北五味子繁殖仍以種子繁殖為主，因此，本試驗(yàn)試通過對萌發(fā)前北五味種子采用激素及低溫處理，試研究層積過程中主要貯藏物質(zhì)含量的變化，并從生理角度揭示種子主要物質(zhì)變化動態(tài)，以期闡明激素與種子層積過程中物質(zhì)含量變化之間的關(guān)系。

1 試驗(yàn)材料及方法

1.1 試驗(yàn)材料

北五味種子于2006年8月收自吉林，收獲后清水揉搓，除去果肉，種子陰干備用。

1.2 供試種子的處理與測定

單一激素：GA3：100、400mg·L-1；6-BA：20、80 mg·L-1；混合激素：6-BA：50 mg·L-1，GA3：200、50mg·L-1，分別記為A，B，C，D，E和F，以清水為對照，記為CK。處理種子24h，清水洗凈，與濕沙混合，0～4℃儲藏60d。每12d取樣，重復(fù)3次。主要測定指標(biāo)有胚率、可溶性糖、可溶性蛋白和總核酸含量，層積結(jié)束后測定裂口率及芽率?？偤怂岷坎捎弥熘纹降确椒ǎ杂懈膭?。

2 結(jié)果與分析

2.1 北五味胚率、裂口率及芽率變化

2.1.1 北五味低溫層積過程中胚率變化

注：A，B表示，與對照相比，分別為1%水平差異顯著，采用LSD法。

從表1可以看出，隨著層積天數(shù)的增加，胚率也在增高。其中激素處理的胚率從處理12d起，都顯著高于對照，當(dāng)層積60d時(shí)，處理E的北五味胚率極顯著高于其他處理。說明處理E可以促進(jìn)北五味胚的發(fā)育。

2.1.2 北五味裂口率及芽率

從表2可見激素及低溫層積處理60d后，處理E的裂口率及芽率要顯著高于其他處理和對照，說明混合激素處理可促進(jìn)北五味種子裂口、發(fā)芽。

2.2 激素及低溫層積過程中北五味種子貯藏物質(zhì)變化

藥用植物種子在完成胚后熟過程中，一般發(fā)生了儲藏物質(zhì)降解、酶活性變化、萌發(fā)促進(jìn)物質(zhì)加強(qiáng)和發(fā)芽抑制物質(zhì)減弱等復(fù)雜的生理生化變化，這些變化與種子休眠的解除有著密切關(guān)系。

2.2.1 激素及低溫層積過程中北五味種子可溶性糖含量變化

由圖1可見種子在低溫層積處理過程中，其可溶性糖的含量總體呈下降，但有起伏現(xiàn)象。層積開始后，可溶性糖含量迅速下降，而后，其含量緩慢升高。這是由于部分糖被利用或被呼吸所消耗。糖既參與大分子化合物的結(jié)構(gòu)消耗了糖，同時(shí)又有脂肪、蛋白質(zhì)等物質(zhì)代謝分解產(chǎn)生了糖。60d層積結(jié)束時(shí)，CK可溶性糖含量最高1.90%，與其他處理間有顯著性差異。說明激素處理可加快其可溶性糖代謝，有利于促進(jìn)可溶性糖被利用，促進(jìn)種子呼吸作用。

2.2.2 激素及低溫層積過程中北五味種子可溶性蛋白含量變化

從圖2中可以看出，其可溶性蛋白質(zhì)含量變化的總趨勢是上升的，但表現(xiàn)有起伏。24d時(shí)開始可溶性蛋白含量降至最低，隨后開始大幅度上升，達(dá)到最高值。這可能是由于蛋白質(zhì)被分解以滿足細(xì)胞分裂的需要。24～36d可溶性蛋白含量迅速上升，這可能是大量糖轉(zhuǎn)化為蛋白。但在60d時(shí)所有可溶性蛋白含量都高于CK值及未處理以上，尤其處理E含量顯著高于其他處理。

2.2.3 激素及低溫層積過程中北五味種子總核酸含量變化

由圖3可以看出在低溫層積過程中總核酸含量變化總趨勢是上升的，在48d時(shí)變化幅度較大都有所降低，然后迅速升高，60d時(shí)混合激素處理的種子中總核酸含量高于對照和初始值，其中處理E含量顯著高于其他處理。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，剛收獲的北五味種子胚很小，只占整個(gè)種子13.83%，經(jīng)過激素及低溫層積處理，胚率顯著提高。這與張麗萍等〔4〕研究結(jié)果一致，原始未處理種子胚率為14.65%，種子胚在剛表現(xiàn)出裂口時(shí)胚率為17.12%，在裂口稍明顯時(shí)胚率為33.60%，到種子裂口大時(shí)，胚率達(dá)61.85%，說明北五味種子在收獲時(shí)還未完成形態(tài)生理后熟，胚仍然很小，需在適宜條件下，使其完成形態(tài)后熟和生理后熟。與此同時(shí)，張麗萍等〔4〕對北五味子研究表明低溫赤霉素處理均能提高種子的裂口率。本試驗(yàn)處理6-BA：50 mg·L-1，GA3：200 mg·L-1胚率顯著高于其他處理。說明激素使得種胚迅速增大，及早完成形態(tài)后熟。為提早轉(zhuǎn)入生理后熟創(chuàng)造條件，能夠縮短種胚后熟期，提前萌發(fā)。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，在北五味種子層積過程中，其貯藏物質(zhì)含量發(fā)生變化，可溶性蛋白和總核酸含量呈上升趨勢，可溶性糖含量總體呈下降趨勢。這與李先恩等研究結(jié)果相同。層積后，首先表現(xiàn)在貯藏物質(zhì)大量被利用，因而糖的含量一開始就逐漸下降，而后糖的含量逐漸上升，但最高峰值始終低于初始值，說明有部分糖被利用或被呼吸所消耗；層積初期，可溶性蛋白大量減少，為種子發(fā)育提供了營養(yǎng)，而后，其含量大量升高，說明種子內(nèi)代謝逐漸活躍，新細(xì)胞逐步形成；總核酸在開始時(shí)含量迅速降低，可能同胚乳細(xì)胞被分解利用有關(guān)，而后隨著胚細(xì)胞的分裂及胚的不斷發(fā)育及胚細(xì)胞數(shù)量的逐漸增多，含量才迅速上升。

此外本試驗(yàn)處理6-BA：50 mg·L-1，GA3：200 mg·L-1顯著高于其它處理。與未處理相比，可溶性蛋白增長了57.79%、總核酸含量上升了21.92%，而可溶性糖含量降低了21.31%。另外寧偉等在對遼東楤木進(jìn)行GA3處理后也發(fā)現(xiàn)，對種子解除休眠，胚完成胚后熟起著重要作用，這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。說明通過使用混合激素處理，可以加快貯藏物質(zhì)代謝，增強(qiáng)種子呼吸作用。

本試驗(yàn)僅對北五味種子在激素及低溫層積過程中主要貯藏物質(zhì)總含量變化及胚率、裂口率和芽率做了初步研究，并未涉及種子代謝相關(guān)酶活性的變化；同時(shí)，對種子進(jìn)行各種處理后其他貯藏物質(zhì)含量的變化，尚需做進(jìn)一步研究探討。