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(1 邯鄲市第一醫(yī)院心內(nèi)科，河北 邯鄲 056002； 2 河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)院)

無復(fù)流是指急性心肌梗死心外膜冠狀動(dòng)脈再通后，心肌組織水平的再灌注不完全，甚至無再灌注的現(xiàn)象[1]。無復(fù)流發(fā)生機(jī)制尚不完全清楚，但有研究結(jié)果表明，氧自由基可能參與無復(fù)流形成[2]。血清超氧化物歧化酶(SOD)是體內(nèi)最重要的自由基清除酶，丙二醛(MDA)是自由基引起的脂質(zhì)過氧化過程中生成的一種醛類物質(zhì)，檢測血清中SOD活性和MDA含量可反映心肌細(xì)胞氧自由基產(chǎn)生和損傷程度[3]。胺碘酮作為抗心律失常藥物臨床應(yīng)用廣泛，它同時(shí)具有擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、抗炎、抗脂質(zhì)過氧化及清除氧自由基等作用[4]。本實(shí)驗(yàn)旨在探討胺碘酮對兔實(shí)驗(yàn)性急性心肌缺血再灌注后SOD和MDA水平的影響及其意義。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

清潔級健康新西蘭大白兔30只，雌雄不限，年齡11～12周，體質(zhì)量(2.5±0.3)kg，由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。隨機(jī)分為假手術(shù)組、正常對照組及胺碘酮組，每組10只。

1.2 試劑及儀器設(shè)備

胺碘酮注射液購自杭州默沙東制藥有限公司。伊文思藍(lán)、硫磺素S購自美國Sigma公司。MDA、SOD試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.3 模型的建立及各組處理

[5-6]方法建立缺血再灌注無復(fù)流模型。正常對照組再灌注即刻給予等量的生理鹽水，胺碘酮組再灌注即刻給予胺碘酮3 mg/kg。假手術(shù)組僅開胸不結(jié)扎冠狀動(dòng)脈。各組于再灌注120 min后取血檢測SOD活性及MDA含量。術(shù)后取心臟進(jìn)行缺血、無復(fù)流面積的評估[5-6]。

1.4 SOD及MDA水平的檢測

于再灌注120 min后分別從耳緣靜脈采血2 mL，置于真空采血管中，于離心機(jī)中以3 500 r/min離心15 min，取出血清后置于-20 ℃冰箱中保存，統(tǒng)一采用黃嘌呤氧化酶法測定SOD活性，硫代巴比妥法測定MDA含量，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 缺血無復(fù)流范圍比較

正常對照組與胺碘酮組缺血范圍比較，差異無顯著性，而胺碘酮組無復(fù)流范圍明顯小于正常對照組(t=4.483,P<0.01)。見圖1、2，表1。

2.2 血清中SOD活性及MDA含量的比較

與假手術(shù)組相比，正常對照組、胺碘酮組再灌注后血清SOD活性明顯降低，MDA含量明顯增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=800.90、1 457.60,q=18.89～73.32,P<0.01)。與正常對照組相比，胺碘酮組再灌注后血清SOD活性明顯增高，MDA含量明顯降低，差異有顯著意義(q=36.76、18.18,P<0.01)。見表2。

2a為正常對照組硫磺素S染色；2b為胺碘酮組硫磺素S染色。

表1 兩組缺血、無復(fù)流范圍比較±s)

表2 各組血清SOD、MDA檢測結(jié)果比較

3 討 論

心肌細(xì)胞缺血再灌注損傷產(chǎn)生大量的氧自由基和過氧化物質(zhì)促進(jìn)無復(fù)流的發(fā)生，ZHAO等[7]研究認(rèn)為，冠狀動(dòng)脈無復(fù)流是由于再灌注期間黃嘌呤氧化酶代謝產(chǎn)生大量自由基所致，而氧自由基多來源于黃嘌呤氧化酶反應(yīng)及線粒體、多形核細(xì)胞等，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)SOD途徑在正常時(shí)負(fù)責(zé)清除氧自由基，這種功能可能在缺血發(fā)作后發(fā)生了改變，導(dǎo)致無復(fù)流的產(chǎn)生。本研究也得出相似的結(jié)論，正常對照組與假手術(shù)組相比，SOD活性明顯降低，表明發(fā)生無復(fù)流時(shí)，心肌細(xì)胞膜發(fā)生脂質(zhì)過氧化，會產(chǎn)生大量的自由基，使得SOD活性因消耗過多而降低。本研究同時(shí)顯示，胺碘酮組與正常對照組相比，SOD活性明顯增高，提示冠狀動(dòng)脈發(fā)生無復(fù)流后，胺碘酮可能通過抗脂質(zhì)過氧化作用，抑制過多自由基的產(chǎn)生與清除自由基，改善缺血再灌注損傷細(xì)胞的膜結(jié)構(gòu)及其功能，減少脂質(zhì)過氧化物的形成，從而減輕心肌缺血再灌注損傷，改善無復(fù)流狀況。

已有充分依據(jù)表明，再灌注損傷與氧自由基生成有關(guān)，冠狀動(dòng)脈再灌注期間會產(chǎn)生大量的氧自由基，體內(nèi)的抗氧化酶系統(tǒng)(如SOD等)可清除自由基，使得SOD活性降低，同時(shí)產(chǎn)生了大量的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，MDA是脂質(zhì)過氧化的終產(chǎn)物，是研究抗氧化能力的常用指標(biāo)之一。通過測定體內(nèi)MDA含量，可間接反映體內(nèi)冠狀動(dòng)脈無復(fù)流時(shí)自由基對機(jī)體的損傷程度[8]。本研究結(jié)果顯示，與對照組相比，胺碘酮組血清MDA含量明顯降低，提示胺碘酮可能通過增加SOD活性，明顯減輕缺血再灌注損傷，使脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物生成減少，進(jìn)而減少血清MDA的產(chǎn)生。有研究顯示，胺碘酮增加SOD活性及降低血清中MDA含量，可能與減少氧自由基的產(chǎn)生密切相關(guān)[9]，進(jìn)而改善冠狀動(dòng)脈無復(fù)流的嚴(yán)重程度。

總之，本文的研究結(jié)果顯示，急性心肌缺血時(shí)應(yīng)用胺碘酮可以通過增加SOD的活性及降低血清中MDA含量，減輕缺血再灌注損傷，改善無復(fù)流狀況，在預(yù)防無復(fù)流治療中有重要的參考價(jià)值。

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