陳旻實，呂水源，李小晶，曾樹金，鄭思遠

(1.福建出入境檢驗檢疫局技術中心，福建省檢驗檢疫技術研究重點實驗室，國家消費品安全檢測重點實驗室，福州 350001 ；2.泉州出入境檢驗檢疫局，泉州 362000)

三聚氰酸（Cyanuric Acid，CYA）是三聚氰胺的水解產(chǎn)物，毒性較小，但與三聚氰胺同時被人體攝入后，通過分子間的氫鍵結合形成網(wǎng)狀三聚氰胺氰尿酸鹽（Melamine cyanurate，MCA），該晶體難溶于水，易在腎臟中積聚形成結石，堵塞腎小管，最終導致腎衰竭［1］。原材料中三聚氰酸含量的多少，直接影響三聚氰酸在成型品中的遷移量。通過建立可靠的三聚氰酸殘留量檢測方法，篩選出合格原料，從源頭把關產(chǎn)品品質(zhì)，進而達到限制三聚氰酸在食物中的遷移量的目的。

目前，國內(nèi)外有關飼料和食品中三聚氰酸檢測的報道較多［2-5］，而有關食品接觸材料的報道則較少［6-8］，且主要是對成型品在水、4%乙酸、10%乙醇等食品模擬物中遷移量的測定，對原料和成型品中的單體殘留量的測定尚未見報道。筆者用乙醇溶液作為提取液，建立了以高效液相色譜檢測食品接觸材料（包括原料和成型品）中三聚氰酸殘留量的簡便、快速、準確、可靠的方法。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

高效液相色譜儀：1100型，配有二極管陣列檢測器（DAD），美國Agilent公司；

超聲波清洗器：KQ250E型，中國昆山儀器公司；

分析天平：AB204-L型，德國賽多利斯儀器公司；

研磨機：HY98-A型，中國南昌紅燕公司；

三聚氰酸標準品：純度大于99.0%，德國Dr. Ehrenstorfer公司；

三聚氰酸標準儲備液：準確稱取三聚氰酸標準品100 mg，置于100 mL容量瓶中，用水超聲溶解并定容，濃度為1 000 mg／L，置于冰箱中保存，使用時用水稀釋成需要濃度的三聚氰酸標準工作液；

乙腈：色譜純，德國Meker公司；

乙醇：分析純，上海試一化學試劑公司；

磷酸鹽（PBS）緩沖溶液：5 mmol／L，pH 6.5。

1.2 樣品制備

將原料樹脂或成型品樣品制成1 cm×1 cm大小，然后用研磨機破碎成粒徑小于0.2 mm大小顆粒。稱取0.5 g（精確到0.1 mg）均質(zhì)樣品顆粒于50 mL帶蓋離心管中，加入10 mL 10%乙醇溶液，渦旋混勻，超聲振蕩20 min，以轉(zhuǎn)速2 500 r／min離心5 min。取1 mL上清液，過0.45 μm濾膜，上機測定。

1.3 色譜條件

色譜柱：Phenomenex Luna 氨基柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），美 國Phenomenex公 司；檢 測器：DAD；檢測波長：214 nm；柱溫：30℃；進樣量：5 μL；流動相：乙腈-PBS緩沖溶液（體積比為75∶25）；洗脫方式：等度洗脫；流速：1.0 mL／min。

2 結果與討論

2.1 提取條件的優(yōu)化

2.1.1 提取液

三聚氰酸微溶于水(20℃下溶解度為5 g／L)，溶于熱水、熱醇、吡啶，也溶于氫氧化鈉和氫氧化鉀水溶液，屬于極性化合物，提取溶劑一般選用稀酸溶液、有機溶劑與水的混合溶液、極性較強的有機溶劑或緩沖溶液［4］。先選用常見有機溶劑甲醇、乙醇、乙腈為提取液，考察同一提取方式下，不同有機溶劑對三聚氰酸的提取，結果見表1。由表1可知，甲醇和乙醇的提取效率相近，且明顯優(yōu)于乙腈，因此選用乙醇作為提取液有機溶劑。

表1 不同有機溶劑提取三聚氰酸的質(zhì)量濃度

選用體積分數(shù)分別為10%，20%，50%的乙醇溶液和乙醇為提取液，考察不同提取液對三聚氰酸的提取效果，結果見表2。由表2可知，10%乙醇溶液的提取效率最高，因此選用10%乙醇溶液作為提取液。

表2 不同濃度乙醇溶液提取所得三聚氰酸的濃度

2.1.2 提取方式

分別考察了渦旋混合提取、振蕩提取、超聲提取、索氏回流提取等提取方式，結果表明索氏回流提取和超聲提取的效率較高，振蕩提取和渦旋混合提取效率低。由于索氏回流耗時長且操作較繁瑣，因此選用超聲提取方式。

2.1.3 提取時間

以超聲提取為提取方式，以10%乙醇溶液為提取液，對同一份均質(zhì)樣品，考察不同超聲時長的提取效果，結果見圖1。由圖1可知，超聲時間超過20 min，樣品中的三聚氰酸已基本提取完全。因此，超聲時間選擇20 min。

圖1 不同超聲時間三聚氰酸的提取濃度

2.2 色譜條件的選擇

色譜條件參照三聚氰胺及其衍生物遷移量的研究中所建立的方法［1］，具體參數(shù)見1.3。

2.3 線性范圍及檢出限

配制三聚氰酸系列濃度的標準工作溶液，按照選用的色譜條件進行測定。以質(zhì)量濃度為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，得三聚氰酸的檢出限為0.1 mg／L，線性方程為Y=56.12X +11.63，線性范圍為0.5～50 mg／L，相關系數(shù)為0.999 4。結果表明三聚氰酸的標準曲線線性范圍寬、檢出限低，可以滿足定量分析的要求。

2.4 精密度與回收率

將適量三聚氰酸標品與三聚氰胺樹脂混勻，使得混勻后的三聚氰酸含量為0.1%。將混勻后的樹脂原料壓制成密胺餐盤，作為陽性樣品備測。將密胺餐盤破碎成粒徑小于0.2 mm的顆粒與樹脂原料混合后按本方法進行提取和測定，同時對未添加樣品進行空白測試。重復試驗6次，扣除空白平均值，考察方法的精密度和回收率，結果列于表4。由表4可知，三聚氰酸含量測定結果的相對標準偏差（RSD）為1.36%～2.54%，回收率在80%～93%之間，表明該方法精密度和準確度良好。

表4 食品接觸材料中三聚氰酸單體殘留量回收率

2.5 殘留量與遷移量的關系

將不同量的三聚氰酸標準品與三聚氰胺樹脂混勻，使得混勻后三聚氰酸含量分別為0.1%和0.2%。將混勻后的樹脂原料分別壓制成10只密胺餐盤。將樹脂原料按本研究所建立的方法進行提取和殘留量測定，同時將壓制成型的密胺餐盤用于三聚氰酸遷移量測定（食品模擬物為10%乙醇溶液，浸泡溫度為70℃，浸泡時間為4 h），結果見圖2。

圖2 原料中三聚氰酸殘留量與其成型品中三聚氰酸遷移量的對應關系

由圖2可知，三聚氰酸遷移量隨著原料中殘留量的增大而增大，呈現(xiàn)正相關關系，因此可以認為質(zhì)控原料三聚氰酸殘留量是降低成型品三聚氰酸遷移量、提升產(chǎn)品品質(zhì)的有效途徑。

3 結語

建立了用液相色譜技術檢測食品接觸材料中三聚氰酸殘留量的方法，該方法靈敏度好，檢出限低，適用線性范圍廣，前處理簡單，揭示了原料三聚氰酸殘留量與成型品三聚氰酸遷移量的正相關關系，滿足我國對食品接觸材料中污染物殘留監(jiān)控和檢測的要求。

［1］陳旻實，井偉，呂水源，等.高效液相色譜法檢測食品接觸產(chǎn)品中三聚氰胺及其衍生物的遷移量［J］.分析化學，2011，39(10): 1 572-1 576.

［2］Ricardo C，Otis E，F(xiàn)red K，et a1.HPLC Method with UV Detection，pH Control，and Reductive Ascorbic Acid for Cyanuric Acid Analysis in Water［J］.Analytical Chemistry，2000，72(23): 5 820-5 828.

［3］王強，冼燕萍，羅海英，等.高效液相色譜法檢測雞蛋中三聚氰酸［J］.現(xiàn)代食品科技，2009，25(6): 711-713.

［4］李鋒格，姚偉琴，蘇敏，等.氣相色譜-質(zhì)譜法快速測定牛奶中的三聚氰胺和三聚氰酸［J］.色譜，2009，27(2): 233-236.

［5］祝偉霞，袁萍，楊冀州，等.親水色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對牛奶與奶粉中三聚氰胺及其衍生物含量的測定［J］.分析測試學報，2008，27(12): 1 288-1 292.

［6］井偉，陳旻實，李小晶，等.HPLC同時檢測食品接觸材料中三聚氰胺與三聚氰酸單體遷移量［J］.分析實驗室，2011，30(4): 34-38.

［7］井偉，李小晶，呂水源，等.HILIC-MSMS同時檢測食品接觸材料中三聚氰胺與三聚氰酸單體遷移量［J］.食品科學，2012，33(16): 159-162.

［8］Xiaojing Li，Wei Jing，Shuiyuan Lv, et al. Simultaneous determination of melamine，ammelide，ammeline，and cyanuric Acid in food contact material by HPLC-MS［C］.The 5th International Conference on Bioinformatics and Biomedical Engineering (iCBBE 2011)，Proceedings-Volume 5，May 10-12，2011. Wuhan: 4 797-4 799.