劉振強(qiáng)，包蕾，王銳，管慶霞，王艷宏

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040)

麻黃附子細(xì)辛湯出自《傷寒論》，由麻黃、附子、細(xì)辛三味藥組成，具有助陽(yáng)解表之功，主治少陰里虛兼太陽(yáng)表實(shí)證。現(xiàn)代臨床及實(shí)驗(yàn)研究表明，其對(duì)變應(yīng)性鼻炎療效顯著［1］。由于方中各藥味的有效成分為麻黃堿、烏頭堿和α－細(xì)辛醚等揮發(fā)油，口服給藥存在毒副作用較大、給藥不方便等問(wèn)題，故將其開(kāi)發(fā)成經(jīng)皮給藥制劑。本文考察麻黃附子細(xì)辛湯經(jīng)皮給藥的可行性及不同促透劑對(duì)其透皮行為的影響，以期為麻黃附子細(xì)辛湯經(jīng)皮給藥制劑的開(kāi)發(fā)提供參考。

1 材料與儀器

乙腈(色譜純，美國(guó)迪馬公司);高效液相色譜系統(tǒng)(美國(guó)Waters公司);磷酸(色譜純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司);甲醇(色譜純，美國(guó)迪馬公司);其他試劑均為分析純;水溶性氮酮(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);脂溶性氮酮(天津市博迪化工有限公司);丙二醇(天津市化學(xué)試劑六廠);冰片(廣州基元化工有限公司);薄荷油(鄭州中天實(shí)驗(yàn)儀器有限公司);麻黃附子細(xì)辛提取物(自制);鹽酸麻黃堿對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)200806);Wistar大白鼠(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)為P00102009)。

2 方法

2．1 麻黃堿HPLC分析方法

色譜條件:Kromasil C18色譜柱(150 mm×4.6mm，5μm);流動(dòng)相為乙腈:0.1%磷酸(2∶98);檢測(cè)波長(zhǎng)為190.5nm;流速為1.0mL/min;柱溫為30℃;進(jìn)樣量為10μL。

標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:用流動(dòng)相配制系列質(zhì)量濃度的麻黃堿對(duì)照品溶液，采用峰面積定量法測(cè)得標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y=130179X+726004(R2=0.9973)，線性范圍為57．5 ～920μg/mL。

2．2 樣品的制備 處方量麻黃、附子、細(xì)辛，經(jīng)醇提、樹脂純化，回收溶劑適當(dāng)濃縮后獲得麻黃附子細(xì)辛湯提取物。分別加入5%薄荷油、3%氮酮+15%丙二醇、3%水溶性氮酮、3%冰片、1%丙二醇、7%脂溶性氮酮，用水稀釋至2mL，超聲混合后做為供給液。

2．3 體外經(jīng)皮滲透實(shí)驗(yàn)［2－3］將體質(zhì)量(200±20)gWistar大白鼠處死后，剪毛，剝離背部皮膚，除去皮下脂肪，用生理鹽水洗凈后，剪成適當(dāng)大小，固定在擴(kuò)散池的供應(yīng)室和接受室之間，角質(zhì)層面向供應(yīng)室，上下夾緊后在接受室中加入接受液，供應(yīng)室中加入供給液。水浴溫度為(37.0±0.5)℃，攪拌速度為300rpm。在實(shí)驗(yàn) 2、4、6、8、10、12h 從接受室取 1mL 樣品液，置離心管中，并補(bǔ)充相同體積的新鮮接受液。將樣品液在恒溫60℃水浴上揮干，加入0.5mL甲醇，超聲溶解，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過(guò)濾，用HPLC測(cè)定接受液中麻黃堿的含量，按下式計(jì)算累積滲透量Qn(μg/cm2)。

其中:Cn為第n個(gè)取樣點(diǎn)測(cè)得的藥物濃度(μg/mL);Ci為第i個(gè)取樣點(diǎn)測(cè)得的藥物濃度(μg/mL);A為滲透面積(cm2);V為擴(kuò)散池接受室的體積(mL);Vi為取樣體積(mL)。以滲透曲線直線部分的累積滲透量∑Q(μg/cm2)對(duì)滲透時(shí)間t進(jìn)行線性回歸的Q－t方程，其斜率即為透皮速率常數(shù)J(μg/cm2/h)。

3 結(jié)果

常用促透劑單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用對(duì)麻黃附子細(xì)辛湯中麻黃堿體外經(jīng)皮滲透的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，麻黃附子細(xì)辛湯中麻黃堿的透皮速率為128.20μg/cm2/h，含5%薄荷油、3%水溶性氮酮+15%丙二醇、3%水溶性氮酮、3%冰片、1%丙二醇、7%脂溶性氮酮的麻黃附子細(xì)辛湯中麻黃堿的透皮速率分別為 416.35、389.21、350.65、339.89、261.87、245.75μg/cm2/h，分別使麻黃堿的透皮速率為3.2、3.0、2.7、2.6、2.0、1.9 倍。

表1 不同促透劑對(duì)麻黃堿透皮的影響(n=3)Tab．1 The transdermal effect of ephedrine from different concentrations

4 討論

常用于體外經(jīng)皮滲透的實(shí)驗(yàn)裝置有Franz擴(kuò)散池、Valia－Chien雙室擴(kuò)散池［4］等。本實(shí)驗(yàn)采用的透皮吸收實(shí)驗(yàn)儀屬于Franz擴(kuò)散池，為垂直單室結(jié)構(gòu)，清洗方便，便于安裝，可同時(shí)進(jìn)行6組實(shí)驗(yàn)，溫度、轉(zhuǎn)速可準(zhǔn)確調(diào)控，易于觀察和采樣。

使用透皮促進(jìn)劑是一種有效改善藥物經(jīng)皮吸收的手段［5－6］。本實(shí)驗(yàn)考察了水溶性氮酮、脂溶性氮酮、丙二醇、冰片、薄荷油單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用的促透效果。不同促透劑對(duì)麻黃附子細(xì)辛湯中麻黃堿均具有一定促透作用，其中尤以5%薄荷油促透效果為佳。有研究表明，天然促透劑可不同程度改變皮膚的生理結(jié)構(gòu)和藥物在皮膚和介質(zhì)間的分配，從而對(duì)許多藥物具有較強(qiáng)的促透作用。薄荷油是常用天然促透劑之一，毒性、刺激性小，使用安全性好。本文發(fā)現(xiàn)其對(duì)麻黃附子細(xì)辛湯中麻黃堿有優(yōu)良的促透效果，可作為首選促進(jìn)劑［7］。

［1］ 王艷宏，包蕾，劉振強(qiáng)．麻黃附子細(xì)辛湯藥理作用研究進(jìn)展［J］．時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2010，21(1):216．

［2］ 李西林，徐蓮英，蔡貞貞．麻黃體外透皮吸收特性研究［J］．中成藥，2004，26(5):356．

［3］ 尤佳，徐穎宇，王艷宏，等．麻黃附子細(xì)辛湯經(jīng)皮給藥的皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)研究［J］．中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2011，39(4):40－41．

［4］ 侯巍，于海．兩種擴(kuò)散池在透皮實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用［J］．黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2002，25(5):66．

［5］ 潘林梅，沈靜，郭立瑋．不同透皮促進(jìn)劑對(duì)復(fù)方麻黃貼劑中麻黃堿透皮吸收的影響［J］．中藥新藥與臨床藥理，2006，17(4):286．

［6］ 趙巴根那，董清平，董華．傳統(tǒng)中藥和納米中藥抗痛風(fēng)貼劑體外透皮效率的比較［J］．中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2010，38(5):74－75．

［7］ 齊紅藝，李莉，吳純潔．薄荷醇促滲透作用的研究進(jìn)展［J］．時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2007，17(9):1776．