朱振紅

(內(nèi)蒙古興安盟食品藥品檢驗(yàn)所，內(nèi)蒙古 烏蘭浩特 137400)

蒙藥沖－11丸由訶子、側(cè)柏葉、人工牛黃、黑云香等11味藥組成，具有清瘟，解熱咳等功能，用于感冒、流感、咽喉腫痛、肺炎。其中訶子為方中主要藥味，訶子化學(xué)成分主要為沒(méi)食子酸。本品屬于醫(yī)院制劑，無(wú)含量測(cè)定指標(biāo)，本文采用高效液相色譜法以處方中的主要藥味訶子中的沒(méi)食子酸作為檢測(cè)指標(biāo)，經(jīng)過(guò)方法學(xué)考察及陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)，表明該方法操作簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性好，專(zhuān)屬性強(qiáng)，方中其它組分對(duì)沒(méi)食子酸的測(cè)定無(wú)干擾。

1 儀器與試藥

1.1 儀器:島津LC～2010AHT高效液相色譜儀，Solution色譜工作站;島津UV～1700型紫外分光光度儀;賽多利斯BP211D型電子天平。

1.2 試劑與試藥:沒(méi)食子酸對(duì)照品(批號(hào):110831－201102):中國(guó)藥品生物制品檢定所;沖 ～11丸(批號(hào):20110418、20110604、20110704)由興安盟扎賚特旗醫(yī)院制劑室提供;模擬樣品為自制;甲醇為色譜純，水為高純水，其它試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件:C18(250mm ×4.6mm，5μm)柱;參照文獻(xiàn)〔1〕以甲醇～0.1%磷酸溶液(1:99)為流動(dòng)相進(jìn)行測(cè)定;柱溫:30℃;測(cè)定波長(zhǎng)〔2〕為 271nm;流速為 1.0ml·min ～1。

2.2 試驗(yàn)溶液的制備:對(duì)照品溶液的制備:精密稱(chēng)取沒(méi)食子酸對(duì)照品適量，加50%甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備:取本品適量，研細(xì)，取約0.4g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，稱(chēng)定重量，超聲處理(功率300W，頻率50kHz)30min，放冷，再稱(chēng)定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

陰性對(duì)照溶液的制備:精密稱(chēng)取按處方及制備工藝制備的不含訶子藥材的樣品0.4g，按供試品溶液制備方法制備，作為陰性對(duì)照溶液。陰性對(duì)照溶液、沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液、供試品溶液色譜圖見(jiàn)圖1(A)(B)和(C)。

圖1 (A)陰性對(duì)照溶液HPLC色譜圖

圖1 (B)沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液HPLC色譜圖

圖1 (C)供試品溶液HPLC色譜圖

2.3 線性考察:取沒(méi)食子酸對(duì)照品約2.5mg，精密稱(chēng)定，置25mL量瓶中，加50%甲醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻(相當(dāng)于含沒(méi)食子酸0.09965mgμg ～1)，過(guò)濾，各取1、2、4、6、8、10μL進(jìn)樣，按上述色譜條件測(cè)定，以峰面積對(duì)進(jìn)樣量進(jìn)行回歸分析，結(jié)果沒(méi)食子酸在0.0996μg～ 0.9965μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系?；貧w方程為

2.4 精密度試驗(yàn):取同一批號(hào)(批號(hào)20110704)供試品6份，各約0.4g，精密稱(chēng)定，分別按含量測(cè)定項(xiàng)下方法操作，測(cè)定每份供試品含量，結(jié)果平均值為6.7826 mgμg～1，RSD為 0.57%。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一份供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、12、24(h)進(jìn)樣測(cè)定峰面積，RSD為1.03%。表明該供試品24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6 加樣回收試驗(yàn):取供試品(批號(hào)20110704，含量6.7826mg·g－1)9 份，各約 0.2g，精密稱(chēng)定。每 3 份一組，第一組各精密加入用50%甲醇配置的沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液(沒(méi)食子酸濃度為0.6784mgμg～1)1ml，第二組各精密加入用50%甲醇配置的沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液(沒(méi)食子酸濃度為0.6784mgμg～1)2mL，第三組各精密加入用50%甲醇配置的沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液(沒(méi)食子酸濃度為0.6784mgμg～1)3mL，分別精密加50%甲醇至50mL，按含量測(cè)定項(xiàng)下方法操作，測(cè)定每份供試品含量，計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 回收試驗(yàn)結(jié)果

2.7 樣品含量測(cè)定:取3批樣品，按上述方法制備供試品溶液.分別精密吸取供試品溶液與對(duì)照品溶液各10μL，依法測(cè)定，計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 樣品中沒(méi)食子酸含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 經(jīng)方法專(zhuān)屬性試驗(yàn)結(jié)果表明:沒(méi)食子酸的檢測(cè)保留時(shí)間為16.3 min;而陰性對(duì)照溶液在此處未出現(xiàn)檢測(cè)峰。說(shuō)明樣品中的其它藥材不干擾沒(méi)食子酸的測(cè)定。

3.2 提取溶劑、提取效率的考察:參考文獻(xiàn)［3］，50%甲醇提取液較為澄清;實(shí)驗(yàn)中比較了超聲10、20、30和45(min)，30 min后沒(méi)食子酸含量基本穩(wěn)定不變，故將超聲時(shí)間定為30 min。

3.3 本品用高效液相色譜法測(cè)定，方法簡(jiǎn)便，靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確，可作為該蒙藥的質(zhì)量控制分析方法之一。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).國(guó)家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編.內(nèi)科、肝膽分冊(cè)〔S〕.2002，198

［2］國(guó)家藥典委員會(huì).國(guó)家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編.口腔腫瘤兒科分冊(cè)〔S〕.2002，202

［3］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典〔S〕.一部北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2010，999