周雙男 張 寧 李 筠△ 王立福 楊慧銀

1.中國人民解放軍第三〇二醫(yī)院移植內(nèi)科 (北京，100039) 2.中國人民解放軍第三〇二醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合肝病科

HBV-CLF是指在CHB或乙型肝炎肝硬化基礎(chǔ)上發(fā)生肝細胞大塊或亞大塊壞死，常合并有多重并發(fā)癥，往往病情危重，預(yù)后兇險［1］。其發(fā)病機制十分復(fù)雜，是多種因素作用的結(jié)果，主要有兩個方面:一是原發(fā)性損傷，包括免疫病理反應(yīng)和HBV本身的作用，而HBV本身對于肝細胞并沒有嚴重的損傷作用;二是繼發(fā)性損傷，即細胞因子等炎癥介質(zhì)對肝臟的致傷效應(yīng)。原發(fā)性損傷和繼發(fā)性損傷疊加，則導(dǎo)致大量肝細胞壞死和肝功能衰竭，對于慢性HBV感染誘發(fā)的肝功能衰竭，繼發(fā)性損傷所起的作用可能更大［2］。因此，本研究對在HBVCLF發(fā)病過程中起重要作用的IL-17及IL-6進行檢測分析，探討其表達及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇解放軍第三〇二醫(yī)院2009年5月至2010年10月收治的HBV-CLF患者共34例 (HBV-CLF組)，其中男26例，女8例，年齡 (43.06±11.44)歲;同時選取慢性乙型肝炎患者26例 (CHB組)作為對照，其中男21例，女5例，年齡 (36.76±12.03)歲。診斷分別符合2006年《肝衰竭診療指南》［1］及2000年《病毒性肝炎防治方案》［3］。HBV-CLF組患者隨訪其24周預(yù)后情況。

1.2 方法 所有病例于入院后采集空腹靜脈血標本，經(jīng)高速離心后取上清液于-60℃超低溫冰箱內(nèi)保存待檢。細胞因子IL-17及IL-6檢測采用流式液相多重蛋白定量技術(shù) (BD CBA技術(shù))，試劑盒購于美國BD公司，按說明書進行操作，應(yīng)用流式細胞儀檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計處理。計量資料以均數(shù)±標準差()表示。不同組間比較采用成組t檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組間IL-17及IL-6水平比較 經(jīng)比較，HBV-CLF組患者IL-17及IL-6水平明顯高于CHB組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組患者IL-17、IL-6水平比較 ()

表1 兩組患者IL-17、IL-6水平比較 ()

2.2 HBV-CLF患者不同預(yù)后組間IL-17及IL-6水平比較 隨訪HBV-CLF組患者24周預(yù)后情況，其中死亡12例，存活22例。經(jīng)組間比較，死亡組患者IL-17水平高于存活組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05);兩組間IL-6水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表2。

表2 HBV-CLF患者不同預(yù)后組間IL-17、IL-6水平比較()

表2 HBV-CLF患者不同預(yù)后組間IL-17、IL-6水平比較()

3 討論

HBV-CLF的發(fā)病機制十分復(fù)雜，其中有許多細胞因子參與，這些細胞因子產(chǎn)生或其受體表達異常，無論是亢進還是缺乏，都會導(dǎo)致病理性改變，因此探討疾病過程中這些細胞因子的作用具有重要的意義。

輔助T淋巴細胞 (Th)在機體免疫反應(yīng)中起著重要輔助作用，根據(jù)其分泌的細胞因子譜Th細胞可以分為Th1和Th2兩個主要亞型。Th1分泌 IL-2、TNF-α、IFN-γ等細胞因子，介導(dǎo)細胞免疫;Th2細胞主要分泌IL-4、IL-6、IL-10等細胞因子，介導(dǎo)體液免疫。IL-6是細胞因子的核心組成成員，主要由單核-巨噬細胞、T淋巴細胞和纖維母細胞合成。肝病患者存在內(nèi)毒素血癥激發(fā)了單核細胞產(chǎn)生大量IL-6，從而導(dǎo)致肝細胞在感染的基礎(chǔ)上發(fā)生大量壞死，導(dǎo)致重型肝炎的發(fā)生［4］。此外，一類在分化、生物學(xué)作用等方面都不同于Th1和Th2的Th細胞于近年來被發(fā)現(xiàn)，它以分泌IL-17為主要特征，被命名為Th17。IL-17能夠調(diào)控粒細胞的生成，阻斷細胞外病原體的入侵，同時和自身免疫性疾病關(guān)系密切。IL-17在局部組織炎癥中的作用，主要是通過誘導(dǎo)細胞釋放前炎癥因子及動員中性粒細胞的細胞因子而發(fā)揮作用。IL-17還能刺激細胞因子IL-6、TNF-α、IL-1β的表達，因此IL-17在HBV感染過程中能夠促進肝臟炎癥反應(yīng)。其導(dǎo)致的過強免疫進程可能導(dǎo)致肝功能衰竭［5，6］。本研究結(jié)果顯示:HBV-CLF患者IL-17和IL-6水平明顯高于CHB患者，可推斷IL-17及IL-6在肝衰竭發(fā)病過程中可能起著重要作用，與目前的相關(guān)研究結(jié)論相符合［7～10］。

通過HBV-CLF患者不同預(yù)后組間比較，死亡組患者初始IL-17水平明顯高于存活組，提示IL-17水平可作為判斷預(yù)后的指標，對判斷患者病情有所幫助;而初始IL-6水平兩組間未見明顯差異，說明IL-6水平作為判斷預(yù)后指標尚不合適。但如果能在今后的研究中進一步擴大樣本量，并加入動態(tài)觀察相關(guān)指標可能會得出有意義的結(jié)論。

綜上所述，HBV-CLF患者存在免疫紊亂，其發(fā)病過程中有包括IL-17和IL-6在內(nèi)的多種細胞因子參與。IL-17和IL-6水平能夠反映肝臟炎癥程度，可能共同參與肝衰竭的發(fā)病，其中IL-17水平與患者預(yù)后有一定相關(guān)性，對預(yù)測患者預(yù)后有較好的臨床意義。

［1］中華醫(yī)學(xué)會感染病學(xué)分會肝衰竭與人工肝學(xué)組，中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會重型肝病與人工肝學(xué)組.肝衰竭診療指南［J］.中華肝臟病雜志，2006，14(9):643-646.

［2］郭曉東，熊璐，李小溪，等.干擾素γ和白介素10在慢性乙型重型肝炎中的變化 ［J］.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展，2011，11(9):1697-1699.

［3］中華醫(yī)學(xué)會傳染病與寄生蟲病學(xué)分會肝病學(xué)分會.病毒性肝炎防治方案 ［J］.中華傳染病雜志，2001，19(1):56-62.

［4］翁秀妹，陳剛，馬小紅，等.慢性乙型肝炎患者血清IL-17、IL-6水平研究［J］.中華實驗和臨床病毒學(xué)雜志，2010，24(1):42-44.

［5］SA SM，VALDEZ PA，WU J，et al.The effects of IL-20 subfamily cytokines on reconstituted human epidermis suggest potential roles in cutaneous innate defense and pathogenic adaptive immunity in psoriasis［J］.J Immunol，2007，178(4):2229-2240.

［6］宋春輝，楊斌，陳黎明，等.恩替卡韋治療慢性乙型肝炎患者過程中血清白細胞介素17及白細胞介素22變化的研究［J］.胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2010，19(11):1047-1049.

［7］李晨，王慧芬，萬謨彬.HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭患者體內(nèi)細胞因子表達及動態(tài)變化的研究［J］.傳染病信息，2011，24(3):151-155.

［8］甄沛林，鄧洪.血清中IL-6和IL-10變化與慢性乙肝急性發(fā)作導(dǎo)致肝衰竭的關(guān)系 ［J］.熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2010，10(7):842-844.

［9］徐燕，杜文軍，秦來英，等.白細胞介素17在乙肝肝纖維化中的表達及意義 ［J］.細胞與分子免疫學(xué)雜志，2009，25(2):133-135.

［10］陳川英，程全紅，涂相林，等.乙型重型肝炎患者細胞因子水平及其與預(yù)后的關(guān)系［J］.實用肝臟病雜志，2009，12(4):279-280.