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        基底細(xì)胞樣型乳腺癌中葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(GLUT-1)的表達(dá)及臨床意義

        2013-11-24 02:20:18衛(wèi)廣輝
        關(guān)鍵詞:樣型基底葡萄糖

        章 革,衛(wèi)廣輝

        (1.營(yíng)口市婦產(chǎn)兒童醫(yī)院 病理科,遼寧 營(yíng)口115000;2.營(yíng)口市中心醫(yī)院 病理科)

        我們針對(duì)乳腺癌中惡性程度高、年輕化、易轉(zhuǎn)移、易復(fù)發(fā)的基底細(xì)胞樣型乳腺癌(basal-like breast carcinomas,BLBCS)為研究對(duì)象,深入探討葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1[1]在基底細(xì)胞樣型乳腺癌中的表達(dá)及與該腫瘤生物學(xué)行為特征的相關(guān)性。

        1 材料與方法

        1.1 臨床資料 收集2005年5月-2011年6月?tīng)I(yíng)口市婦產(chǎn)兒童醫(yī)院及相關(guān)單位手術(shù)切除的乳腺癌患者石蠟標(biāo)本,經(jīng)免疫組化證實(shí)ER、PR、HER-2陰性,CK5/6陽(yáng)性的標(biāo)本145例,non-BLBCS36例。乳腺癌患者均為女性,年齡28-72歲(BLBCS組平均年齡46.9歲、non-BLBCS組平均年齡49歲),所有切片均由兩名資深病理醫(yī)師復(fù)檢,并按照2003年WHO乳腺腫瘤病理學(xué)分類(lèi)形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)[2]診斷。所有患者術(shù)前均未放行、化療。18例正常乳腺組織為癌旁乳腺組織(距癌組織邊緣≥4cm),經(jīng)病理醫(yī)師確認(rèn)為正常乳腺組織。

        1.2 方法 兔抗人GLUT-1抗體購(gòu)自福州邁新公司,工作濃度1∶100。SP法抗小鼠試劑盒購(gòu)自福州邁新公司,參照試劑盒說(shuō)明操作,關(guān)鍵步驟如下:切片常規(guī)脫蠟至水,高壓修復(fù)抗原,3%H2O2孵育箱孵育10min,DAB顯色,蘇木精對(duì)比染色,透明封固,以PBS代替一抗做陰性對(duì)照,胎盤(pán)組織做陽(yáng)性對(duì)照。

        1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn) 參照 Cooper等[3]報(bào)道,GLUT-1的表達(dá)主要定位于乳腺癌細(xì)胞胞膜和(或)細(xì)胞質(zhì),陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)為染成棕黃色,無(wú)色或者淡黃色為陰性,棕黃色或褐色為陽(yáng)性。1%-10%癌細(xì)胞著色為(+)、10%-50%癌細(xì)胞著色為(++)、>50%癌細(xì)胞著色為(+++)。

        1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,采用χ2檢驗(yàn)及Fishers確切概率檢驗(yàn)。

        2 結(jié)果

        2.1 GLUT-1在 BLBCS、non-blbcs乳腺組織中的表達(dá) 見(jiàn)表1。

        表1 GLUT-1在BLBCS、non-blbcs及正常乳腺組織中的表達(dá)

        2.2 GLUT-1的表達(dá)與BLBCS各臨床病理特征之間的關(guān)系 GLUT-1的表達(dá)水平與腫瘤直徑、病理學(xué)分期呈正相關(guān)(P<0.05),與患者年齡等指標(biāo)無(wú)相關(guān)性(P<0.05),淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性組 GLUT-1的表達(dá)明顯高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,表2)。

        表2 臨床病理特征與GLUT-1表達(dá)的相關(guān)性

        3 討論

        基底細(xì)胞樣乳腺癌,是按乳腺癌基因表達(dá)系譜分類(lèi)出的一種乳腺癌亞型?;准?xì)胞樣型乳腺癌的基因表達(dá)特點(diǎn)是:ER、PR和HER-2陰性表達(dá),同時(shí)至少表達(dá)一種基底細(xì)胞角蛋白(CK5/6、CK14或CK17等)和(或)EGFR[4]?;准?xì)胞樣型乳腺癌細(xì)胞核異型性明顯,核分裂像多見(jiàn),細(xì)胞增殖活性高,組織學(xué)分級(jí)絕大多數(shù)為Ⅱ—Ⅲ級(jí)。組織形態(tài)學(xué)多呈實(shí)性片狀分布,常見(jiàn)伴有惡性腫瘤凝固性壞死,易通過(guò)血道轉(zhuǎn)移至肺、腦。BLBCS因其獨(dú)特的腫瘤生物學(xué)行為和分子生物學(xué)表型特點(diǎn),而成為近年來(lái),臨床診療與學(xué)術(shù)領(lǐng)域研究、關(guān)注的熱點(diǎn)。

        葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(GLUT-1),是哺乳動(dòng)物細(xì)胞糖跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的主要載體,主要功能是運(yùn)載葡萄糖進(jìn)入上皮細(xì)胞并參與及促進(jìn)細(xì)胞生物代謝。它在正常組織中的表達(dá)僅限于紅細(xì)胞及組織屏障間,如血腦屏障等。

        有研究表明,GLUT-1表達(dá)與直腸腺癌、頭頸部鱗狀細(xì)胞癌、腎癌、食管癌、非小細(xì)胞肺癌、膽囊癌、膀胱癌、胃腸上皮化生癌、胰腺癌等密切相關(guān),其表達(dá)水平與腫瘤轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)[51011]。而有關(guān)GLUT-1表達(dá)與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展及腫瘤預(yù)后評(píng)估等方面的研究報(bào)道少見(jiàn)。

        有學(xué)者報(bào)道,在惡性腫瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)中,葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1呈高表達(dá),提示GLUT-1在去分化、胚胎化的腫瘤細(xì)胞短周期分裂過(guò)程中,對(duì)瘤細(xì)胞能量和生物合成物質(zhì)的需求提供了細(xì)胞生物學(xué)介導(dǎo)、蓄積及轉(zhuǎn)運(yùn),同時(shí),加快糖酵解及形成腫瘤新生血管系統(tǒng),作為對(duì)微循環(huán)缺血、缺氧的代償[6],并通過(guò)該項(xiàng)途徑攝取大量葡萄糖,來(lái)補(bǔ)充細(xì)胞異常增殖的需求。我們?cè)趯?shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn):在基底細(xì)胞樣型乳腺癌的免疫組化標(biāo)記中,特別在腫瘤凝固性壞死灶與正常組織相接壤區(qū)域,可見(jiàn)GLUT-1的高表達(dá)。另有學(xué)者提出:隨著腫瘤體積的增加,臨床分期的進(jìn)展,腫瘤缺氧更加嚴(yán)重。需氧增加,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞表達(dá)GLUT-1,通過(guò)局部誘導(dǎo)獲得營(yíng)養(yǎng)。刺激內(nèi)皮細(xì)胞增生、分化、遷移、生成新血管。同時(shí),加重的缺氧也誘導(dǎo)缺氧誘導(dǎo)因子表達(dá)進(jìn)一步刺激血管生成[7]。作為對(duì)微環(huán)境缺血、缺氧的代償,借以維持腫瘤內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,從而達(dá)到腫瘤細(xì)胞逃脫缺血、缺氧的損害。符合樊健等的觀(guān)點(diǎn)。同時(shí),在大樣本的比對(duì)中:GLUT-1的高表達(dá),多集中在組織學(xué)分級(jí)Ⅱ-Ⅲ級(jí),且隨著組織學(xué)分級(jí)的加深,陽(yáng)性表達(dá)呈明顯上調(diào)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況是決定其預(yù)后的重要因素[8]。本研究組腋下淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與GLUT-1高表達(dá)呈正相關(guān)。提示:GLUT-1的高表達(dá)參與基底細(xì)胞樣型乳腺癌的惡性轉(zhuǎn)化、增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移、以及腫瘤分子學(xué)介導(dǎo)密切相關(guān),與郝朗松等[9]的觀(guān)點(diǎn)一致。

        本實(shí)驗(yàn)研究采用免疫組織化學(xué)方法,對(duì)乳腺癌、癌旁組織和正常乳腺組織中GLUT-1的表達(dá)和分布情況進(jìn)行檢測(cè)分析,結(jié)果顯示,GLUT-1在基底細(xì)胞樣乳腺癌、非基底細(xì)胞樣乳腺癌、癌旁組織和乳正常腺組織中,均有不同程度的表達(dá)。GLUT-1的陽(yáng)性表達(dá)在乳腺正常組織、癌旁組織、其他浸潤(rùn)性癌組織和基底細(xì)胞樣癌組織中,依次順序增高,且在各實(shí)驗(yàn)組之間的差異均有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;GLUT-1的表達(dá)與BLBCS的組織學(xué)分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,及TNM分期呈正相關(guān);同時(shí),該研究結(jié)果提示:在BLBCS的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中,GLUT-1過(guò)表達(dá),提供了BLBCS癌細(xì)胞的過(guò)度增殖、異常分化及凋亡異常的生物學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ),促進(jìn)乳腺組織發(fā)生癌變。因此,我們認(rèn)為:葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT-1)的高表達(dá),標(biāo)志著乳腺上皮細(xì)胞的異常增殖,提示GLUT-1在乳腺癌的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程中,具有重要的生物學(xué)促進(jìn)作用,可作為乳腺癌預(yù)后良否判斷的重要指標(biāo)之一。

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