于水，倫語，倫立民，高振亮

（青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院，山東 青島 266101 1 附屬醫(yī)院東區(qū)檢驗(yàn)科； 2 2009級臨床醫(yī)學(xué)系）

易栓癥有血栓形成傾向，在惡性腫瘤、腎病綜合征（NS）、妊娠子癇前期、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、肺栓塞（PE）和下肢深靜脈血栓（DVT）病人體內(nèi)均存在凝血、抗凝、纖溶系統(tǒng)的變化［1］。本文為研究易栓癥病人體內(nèi)凝血、抗凝、纖溶系統(tǒng)的變化規(guī)律，選取纖維蛋白原（FIB）、抗凝血酶Ⅲ（AT－Ⅲ）、D－二聚體、抗心磷脂抗體（ACA）作為指標(biāo)進(jìn)行分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 對象及分組

六類易栓癥病人均為2011年8月—2012年8月我院臨床確診的住院病人。其中惡性腫瘤組25例，男13例，女12例，年齡25～76歲，平均57.8歲；良性腫瘤組32例，男16例，女16例，年齡25～76歲，平均60.2歲。兩組均經(jīng)病理檢查證實(shí)。PE和DVT組30例，男16例，女14例，年齡25～78歲，平均45.6歲。NS組28例，男10例，女18例，年齡15～69歲，平均48.3歲。SLE組32例，男10例，女22例，年齡24～56歲，平均53.8歲。子癇前期組27例，年齡23～40歲，血壓＞19／12 k Pa，尿蛋白（＋），孕期為23～39周；正常妊娠組31例，年齡22～41歲，血壓＜19／12 k Pa，尿蛋白（－），孕期為32～40周。正常對照組48例，男23例，女25例，年齡28～70歲，平均年齡50.0歲，均為來我院健康體檢者。各易栓癥組與其對照組間性別、年齡差異均無顯著性 （P＞0.05）。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集 分別于抗凝治療前和治療1周后采集靜脈血2 mL，枸櫞酸鈉抗凝，3 000 r／min離心15 min，分離血清置－20℃冰箱待測。

1.2.2 檢測方法 使用ACL－TOP全自動血凝儀檢測，D－二聚體、FIB采用免疫比濁法測定，AT－Ⅲ采用發(fā)色底物法測定。試劑和質(zhì)控品均為ACLTOP原裝試劑，嚴(yán)格按照儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測ACA，其中Ig A、Ig M、Ig G有一項(xiàng)陽性即為陽性。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)量數(shù)據(jù)以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)、配對t檢驗(yàn)和方差分析；陽性率比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 惡性腫瘤組各指標(biāo)測定

與正常對照組相比，惡性腫瘤組的FIB、D－二聚體水平均明顯升高，AT－Ⅲ水平明顯降低；良性腫瘤組D－二聚體水平顯著升高（F＝32.02～134.28，q＝6.25～30.36，P＜0.05）。見表1。

表1 惡性腫瘤病人及其對照組各指標(biāo)測定結(jié)果（±s）

表1 惡性腫瘤病人及其對照組各指標(biāo)測定結(jié)果（±s）

與正常對照組比較，F(xiàn)＝32.02～134.28，＊q＝6.25～30.36，P＜0.05。

組 別 n FIB（ρ／g·L－1）AT－Ⅲ（χ／%）D－二聚體（ρ／μg·L－1）ACA陽性率（χ／%）正常對照組48 2.61±0.54 99.42±11.46 113.39±72.76 2.08良性腫瘤組32 2.76±0.53 97.81±11.54 210.03±78.16＊ 3.12惡性腫瘤組25 3.95±1.21＊84.92±17.41＊708.44±730.42＊ 4.00

2.2 PE和DVT組治療前后各指標(biāo)測定

PE和DVT組病人治療后FIB、D－二聚體水平較治療前均明顯下降，而AT－Ⅲ水平明顯升高（t＝5.08～8.54，P＜0.05）；與正常對照組相比較，治療前PE和DVT病人FIB、D－二聚體水平均顯著升高，而AT－Ⅲ水平顯著下降，治療后D－二聚體水平仍然升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F＝42.32～78.12，q＝4.82～36.92，P＜0.05）。見表2。

表2 PE和DVT病人治療前后各指標(biāo)測定結(jié)果（±s）

表2 PE和DVT病人治療前后各指標(biāo)測定結(jié)果（±s）

與正常對照組比較，F(xiàn)＝42.32～78.12，＊q＝4.82～36.92，P＜0.05。

組 別 n FIB（ρ／g·L－1）AT－Ⅲ（χ／%）D－二聚體（ρ／μg·L－1）ACA陽性率（χ／%）正常對照組 482.61±0.54 99.42±11.46 113.39±72.76 2.08 PE和DVT組治療前 303.72±1.23＊68.50± 9.76＊951.50±121.20＊ 3.33治療后 302.94±0.85 80.50±12.12 432.45±87.32＊3.33

2.3 子癇前期組各指標(biāo)測定

與正常妊娠組相比，子癇前期組AT－Ⅲ水平顯著降低，F(xiàn)IB、D－二聚體水平顯著則升高（t＝6.61～8.54，P＜0.05），ACA陽性率顯著升高（χ2＝12.42，P＜0.05）。見表3。

表3 子癇前期病人及其對照組各指標(biāo)測定結(jié)果（±s）

表3 子癇前期病人及其對照組各指標(biāo)測定結(jié)果（±s）

與正常妊娠組比較，＊t＝6.61～8.54，P＜0.05；＃χ2＝12.42，P＜0.05。

組 別 n FIB（ρ／g·L－1）AT－Ⅲ（χ／%）D－二聚體（ρ／μg·L－1）ACA陽性率（χ／%）正常妊娠組31 3.72±0.63 86.45±10.55 345.45±56.32 3.22子癇前期組27 5.43±0.56＊70.43± 9.32＊543.50±154.21＊ 29.60＃

2.4 SLE與NS組各指標(biāo)測定

與正常對照組相比，SLE組、NS組AT－Ⅲ水平顯著降低，F(xiàn)IB、D－二聚體水平顯著升高（t＝3.23～8.55，P＜0.05），ACA 陽性率顯著升高（χ2＝24.08、16.12，P＜0.05）。見表4。

表4 SLE、NS病人及其對照組各指標(biāo)測定結(jié)果（±s）

表4 SLE、NS病人及其對照組各指標(biāo)測定結(jié)果（±s）

與正常對照組比較，＊t＝3.23～8.55，P＜0.05；＃χ2＝24.08、16.12，P＜0.05。

組別n FIB（ρ／g·L－1）AT－Ⅲ（χ／%）D－二聚體（ρ／μg·L－1）ACA陽性率（χ／%）對照組 48 2.61±0.54 99.42±11.46 113.39± 72.76 2.08 SLE組 32 3.87±1.57＊73.00± 2.83＊ 924.50± 866.20＊ 46.88＃NS 組 28 5.63±1.38＊59.88±32.37＊1 521.15±1 548.36＊ 35.70＃

3 討 論

FIB是參與血液凝固過程中的重要凝血因子，AT－Ⅲ是人體內(nèi)最主要的抗凝蛋白，D－二聚體是高凝狀態(tài)和纖溶亢進(jìn)的分子標(biāo)志物［2－3］。這3種標(biāo)志物分別代表了人體的凝血、抗凝和纖溶功能。ACA是一種容易引起高凝狀態(tài)的自身抗體，它與血栓形成密切相關(guān)。

血栓栓塞是惡性腫瘤的主要并發(fā)癥，惡性腫瘤病人形成血栓的危險(xiǎn)性明顯高于非腫瘤病人［4－5］。本文結(jié)果顯示，惡性腫瘤病人FIB水平明顯升高，AT－Ⅲ水平明顯下降，而良性腫瘤病人FIB和AT－Ⅲ水平未見增高。可能的機(jī)制是腫瘤細(xì)胞進(jìn)入血液循環(huán)后與內(nèi)皮細(xì)胞、血小板等相互作用，釋放一些生物活性物質(zhì)，從而引起FIB升高和凝血因子的激活，同時(shí)由于惡性腫瘤損害血管內(nèi)皮，AT－Ⅲ釋放減少，再加上AT－Ⅲ的大量消耗，導(dǎo)致抗凝功能受損。惡性腫瘤浸潤性強(qiáng)，容易轉(zhuǎn)移，對內(nèi)皮細(xì)胞損傷嚴(yán)重，使得FIB升高、AT－Ⅲ減少明顯。這與劉秀巧等［6］的報(bào)道相一致。腫瘤病人的D－二聚體水平明顯升高，是腫瘤發(fā)生過程中大量凝血因子被激活，繼發(fā)性纖溶系統(tǒng)亢進(jìn)的結(jié)果。由此可見，腫瘤病人的FIB、AT－Ⅲ、D－二聚體檢測能反映疾病的嚴(yán)重程度。

PE和DVT統(tǒng)稱為靜脈血栓栓塞癥［7］，目前的主要治療方法為溶栓和（或）抗凝，溶栓藥物主要作用是降解FIB和纖維蛋白，抗凝藥物則是作用于某些凝血因子，抑制血栓形成［8－9］。本文結(jié)果顯示，血栓栓塞病人FIB水平顯著升高，治療后有所下降，說明發(fā)病時(shí)增多的FIB經(jīng)藥物作用后降解使其明顯下降，這對反映治療效果有很大的意義。D－二聚體是FIB降解產(chǎn)物中的最小片段，在血栓栓塞病人體內(nèi)含量增高，治療后隨著血栓的溶解，出現(xiàn)D－二聚體水平迅速升高后很快下降的現(xiàn)象。血栓栓塞病人的AT－Ⅲ水平明顯降低，治療后雖升高但仍低于正常對照組。栓塞時(shí)血管內(nèi)皮損傷，局部AT－Ⅲ釋放減少，內(nèi)皮細(xì)胞抗血栓功能明顯減弱。

妊娠生理性高凝狀態(tài)對于防止分娩時(shí)大出血起著重要的作用，但這種高凝狀態(tài)容易誘發(fā)血栓性疾病。子癇前期處于一種比正常妊娠更容易導(dǎo)致血栓形成的血液學(xué)狀態(tài)［10］。本研究顯示，子癇前期病人FIB、D－二聚體水平比正常妊娠組顯著升高，表明體內(nèi)有血栓形成的傾向。子癇前期病人的AT－Ⅲ水平降低顯著，推測其機(jī)制為子癇前期時(shí)孕婦全身小動脈痙攣，血管內(nèi)皮損傷，局部釋放AT－Ⅲ減少，同時(shí)由于凝血因子的大量激活，消耗AT，導(dǎo)致其水平顯著降低。妊娠子癇前期ACA陽性率顯著高于正常妊娠組，表明ACA與子癇前期的發(fā)病有一定的相關(guān)性。

NS病人體內(nèi)存在血液高凝狀態(tài)，容易引起各組織器官的血栓形成［11］。本文結(jié)果顯示，NS病人的FIB水平明顯升高，AT－Ⅲ水平下降，D－二聚體水平反應(yīng)性升高，ACA陽性率較高。其機(jī)制為：由于腎臟的損害，大量的蛋白尿排泄，低蛋白血癥刺激肝臟合成，血液中凝血因子明顯增加，F(xiàn)IB水平增高；AT－Ⅲ滅活凝血因子而消耗增多，再加上AT－Ⅲ從尿中大量流失而導(dǎo)致血液中AT－Ⅲ減少；體內(nèi)纖溶系統(tǒng)繼發(fā)性亢進(jìn)導(dǎo)致D－二聚體水平升高，從而導(dǎo)致體內(nèi)高凝狀態(tài)的形成。ACA與血管內(nèi)皮細(xì)胞的膜磷脂結(jié)合后，細(xì)胞功能發(fā)生改變，促進(jìn)血小板聚集及血管收縮，有利于血栓形成。

SLE是一種彌漫性自身免疫性疾病，其血管內(nèi)免疫復(fù)合物的沉積可直接或間接引起血管內(nèi)皮損傷，導(dǎo)致凝血纖溶系統(tǒng)異常伴血栓形成［12－13］。本文SLE病人ACA陽性率為46.88%，較正常對照組顯著升高。提示ACA在SLE血栓形成過程中起著重要的作用，可能的機(jī)制是ACA與相應(yīng)抗原結(jié)合促使血小板激活，抑制內(nèi)源性AT－Ⅲ，使血液呈高凝狀態(tài)，引發(fā)血栓。本研究還顯示，SLE病人的FIB、D－二聚體水平較正常對照組升高，AT－Ⅲ水平下降，說明SLE病人體內(nèi)凝血途徑被激活，凝血酶大量生成，凝血功能顯著增強(qiáng)，同時(shí)抗凝系統(tǒng)減弱以及繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)，使SLE病人處于血栓形成狀態(tài)。因此認(rèn)為，AT、FIB、D－二聚體、ACA的檢測對于臨床上SLE的診斷以及判斷是否并發(fā)血管病變有重要作用。ACA在SLE中陽性率最高，在NS和子癇前期也有一定程度的升高，提示ACA可能是這些疾病血栓形成的原因［14－16］。

綜上所述，惡性腫瘤、PE、DVT、子癇前期、SLE、NS這些易栓癥病人體內(nèi)均存在不同程度的血液高凝狀態(tài)，測定AT、FIB、D－二聚體、ACA對于臨床上易栓癥的診斷、治療監(jiān)測、探討疾病的發(fā)生發(fā)展以及血栓形成機(jī)制等具有十分重要的意義。

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