劉森琴 葛 林

(福建省武夷山市立醫(yī)院藥劑科，福建 武夷山 354300)

近年來(lái)由于飲食結(jié)構(gòu)的改變，酒精的濫用和依賴，使酒精性脂肪肝患者發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，其預(yù)防與治療已成為中、西醫(yī)臨床研究的重要內(nèi)容。葛根散出自《儒門事親》，主治飲酒過(guò)度，酒毒內(nèi)蘊(yùn)者。本研究擬通過(guò)觀察葛根湯對(duì)酒精性脂肪肝模型大鼠丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、總膽紅素(TBiL)以及肝組織病理改變的影響，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wistar種雄性大鼠100只，體質(zhì)量180～220 g，購(gòu)自福建醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，動(dòng)物合格證號(hào)：SCX(閩)20042002。

1.1.2 藥物 葛根散(由甘草、干葛根花、葛根、砂仁、貫眾各等份組成)組方藥材均購(gòu)自福建省武夷山市立醫(yī)院中藥房，按原方比例常規(guī)制備水煎劑，調(diào)整生藥濃度為2.5 g/mL備用；聯(lián)苯雙酯滴丸(德州德藥制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20033403)。

1.1.3 儀器與試劑 Beckman-CX5型全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司)；AB135-S型電子天平[梅特勒托利多儀器(上海)有限公司]；TG16-WS臺(tái)式高速離心機(jī)(湘儀離心機(jī)儀器有限公司)。ALT測(cè)定試劑盒、AST測(cè)定試劑盒、TBiL測(cè)定試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 動(dòng)物分組 將100只Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為6組，正常對(duì)照組20只，模型對(duì)照組、聯(lián)苯雙酯滴丸組及葛根散高、中、低劑量組，各16只。

1.2.2 建立模型 正常對(duì)照組正常飼養(yǎng)，自由飲水。其余80只給予79.5%玉米粉、20%豬油、0.5%膽固醇制成的混合飼料[1]，另外予30%乙醇做飲料[2]。飼養(yǎng)1個(gè)月后，正常對(duì)照組與模型對(duì)照組各隨機(jī)取10只大鼠，測(cè)定大鼠血清總膽固醇、甘油三酯含量，并取肝組織做病理檢查，確定已形成酒精性脂肪肝模型。

1.2.3 給藥方法 以成人常規(guī)用量折算，葛根散高、中、低劑量組分別以24.84、12.42、6.21 g/kg灌胃給藥，聯(lián)苯雙酯滴丸組以3.6 mg/kg灌胃給藥，正常對(duì)照組與模型對(duì)照組以0.9%氯化鈉注射液10 mL/kg灌胃給藥。均每日1次，連續(xù)灌胃30 d。

1.2.4 觀察指標(biāo)及方法 全部大鼠末次給藥后均禁食12 h，眶靜脈取血，以2 500 r/min離心15 min，取血清，測(cè)定血清ALT、AST及TBiL水平變化，并觀察各組大鼠肝組織的病理變化，包括脂肪變性、顆粒變性及纖維組織增生。ALT、AST及TBiL的測(cè)定均嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作說(shuō)明執(zhí)行。肝組織病理等級(jí)評(píng)分如下：切片中無(wú)明顯相應(yīng)病理改變，為“-”；切片中偶見(jiàn)相應(yīng)病理變化，病變散在分布或單個(gè)發(fā)生，病變范圍占全視野的1/4以下，為“+”；相應(yīng)病理改變明顯，呈片狀或集群分布，病變范圍占全視野的1/4～1/2，為“++”；相應(yīng)病變程度嚴(yán)重，病變呈大片狀分布，占據(jù)全小葉或全視野的1/2以上，為“+++”。

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠血清ALT、AST及TBiL的水平比較 見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠血清ALT、AST及TBiL的水平比較

組 別nALT(U/L)AST(U/L)TBiL(μmol/L)正常對(duì)照組10136.55±18.89167.27±51.850.649 8±0.159 4模型對(duì)照組6181.20±23.80*254.11±77.42*1.352 6±0.489 7*葛根散高劑量組16145.62±11.81△167.15±52.97△0.806 1±0.178 7△葛根散中劑量組16158.15±14.02△#182.03±63.10△#0.992 4±0.354 4△#葛根散低劑量組16169.52±32.44△#190.54±14.22△#1.129 8±0.409 2△#聯(lián)苯雙酯滴丸組16143.44±17.67△160.22±55.45△0.721 3±0.167 4△

與正常對(duì)照組比較，*P<0.05；與模型對(duì)照組比較，△P<0.05；與葛根散高劑量組比較，#P<0.05

由表1可見(jiàn)，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠血清ALT、AST及TBiL水平均顯著升高(P<0.05)；與模型對(duì)照組比較，葛根散高、中、低劑量組及聯(lián)苯雙酯滴丸組血清ALT、AST及TBiL水平均有明顯降低(P<0.05)，且葛根散高劑量組降低水平與聯(lián)苯雙酯滴丸組相當(dāng)(P>0.05)，并優(yōu)于葛根散中、低劑量組(P<0.05)。

2.2 各組大鼠治療后的肝組織病理檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表2。

表2 各組大鼠治療后的肝組織病理檢測(cè)結(jié)果 例

由表2可見(jiàn)，酒精性脂肪肝模型大鼠主要肝組織病理變化為脂肪變性與顆粒變性，纖維組織增生不明顯。病理報(bào)告顯示，正常對(duì)照組肝組織較多散在的點(diǎn)狀壞死性炎癥，部分肝細(xì)胞輕度濁腫；模型對(duì)照組肝組織較多大小不等散在炎性灶(以慢性炎細(xì)胞為主)，大部分肝細(xì)胞重度水樣變性，部分肝細(xì)胞輕重度脂肪變性，肝細(xì)胞壞死。經(jīng)葛根散高、中、低劑量及聯(lián)苯雙脂滴丸治療后與模型對(duì)照組比較，病理改變均有所改善，且葛根散作用強(qiáng)度高劑量組>中劑量組>低劑量組，隨用藥劑量的增加炎性灶、壞死灶、變性的肝細(xì)胞明顯減少。

3 討 論

酒精性脂肪肝是指因攝入酒精所引起的肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積超過(guò)肝濕質(zhì)量5%的肝損害性疾病，是臨床最常見(jiàn)、最早期的酒精性肝病之一，其治療上目前尚缺乏特效藥?，F(xiàn)代研究表明，酒精性脂肪肝的肝損傷機(jī)制主要為乙醇代謝產(chǎn)物乙醛對(duì)肝臟的直接毒性作用，可以造成肝細(xì)胞變性壞死，以及乙醇對(duì)肝臟線粒體的毒性作用與乙醇誘導(dǎo)肝臟損傷的自由基作用機(jī)制[3]。

酒精性脂肪肝屬中醫(yī)學(xué)酒傷、脅痛、脅脹、積聚等范疇。中醫(yī)學(xué)對(duì)其病因病機(jī)早有論述，認(rèn)為酒為一種特殊的濕熱毒邪，可直傷肝胃，大量飲酒，濕熱蘊(yùn)蒸，致肝木失疏，肝氣郁滯，肝胃不和，日久血脈瘀阻，痰濁內(nèi)生，停于脅下，而成本病。病機(jī)屬實(shí)熱，以酒毒傷肝、熱蘊(yùn)肝郁、血瘀痰滯為主，或誤治失治，繼續(xù)飲酒，病情由淺入深，由實(shí)轉(zhuǎn)虛，虛實(shí)夾雜，形成氣陰兩虛，瘀血積累[4]。葛根散方中葛根清涼下火，開胃消食，利尿解酒有特效，《千金要方》記載以鮮葛根搗汁給治醉不醒者，宋代《本草衍義》以葛根取粉治酒醉者，曰“病酒及渴者，得之甚良”；干葛根花解酒醒脾；飲酒過(guò)度者易傷脾胃，出現(xiàn)納差、嘔吐等癥，故配入甘草補(bǔ)脾益氣，清熱解毒；砂仁芳香化濕，行氣健脾；貫眾可解一切諸熱毒或中食毒、酒毒、藥毒等(《普濟(jì)方》)。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，葛根散可顯著降低酒精性脂肪肝模型大鼠血清ALT、AST及TBiL水平，其藥物療效作用強(qiáng)度具有一定的劑量依賴關(guān)系，且對(duì)大鼠肝組織病理改變有一定改善作用。綜上所述，葛根散對(duì)酒精性脂肪肝模型大鼠肝損傷有保護(hù)作用。

[1] 李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1991：468.

[2] 徐叔云.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1982：868.

[3] 鄧源，班春林，武曉瓊.乙醇誘導(dǎo)肝損傷作用機(jī)制的研究進(jìn)展[J].華北國(guó)防醫(yī)藥，2005，17(4)：242-244.