李晉奇，童榮生，肖開春，彭 成，劉中飛，李翅翔

(1.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院藥劑科，四川 成都 610072;2.西南交通大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院，四川 成都 610031;3.成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，四川 成都 610075;4.瀘州醫(yī)學(xué)院，四川 瀘州 646000)

半夏瀉心湯始見于《傷寒論》，主要用于治療心下痞滿而不痛的痞證，現(xiàn)代多用于治療消化系統(tǒng)疾病，且療效確切。方由半夏、黃芩、干姜、人參、炙甘草、黃連、大棗7味中藥組成。方中辛開(半夏、干姜)、苦降(黃芩、黃連)、甘補(bǔ)(人參、炙甘草、大棗)三組藥物配伍應(yīng)用，其配伍特點(diǎn)為辛開苦降、寒溫并用、陰陽并調(diào)。本研究2011年2～5月在四川省人民動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室完成。通過觀察半夏瀉心湯拆方及其醇提、醇沉部位對正常大鼠和硫酸阿托品致胃腸動(dòng)力障礙大鼠胃排空、小腸推進(jìn)的影響，篩選其調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)的有效部位。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD大鼠，雌雄各半，體重220～240 g，由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心生產(chǎn)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào):04－11，檢疫后備用。

1.2 實(shí)驗(yàn)用藥 法半夏、干姜、黃芩、黃連、黨參、炙甘草、大棗均為《中華人民共和國藥典》品種，均購于四川新荷花中藥飲片有限公司，實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行鑒定。硫酸阿托品注射液，造模藥物，天津金耀氨基酸有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào):國藥準(zhǔn)字號(hào)H12020384，生產(chǎn)批號(hào):0903311，規(guī)格:5 mg(1 ml)/支×10 支/盒。多潘立酮片，陽性藥物，西安楊森制藥有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào):國藥準(zhǔn)字 H10910003，生產(chǎn)批號(hào):101130212，規(guī)格:10 mg/片×30片/盒。①藥液的制備:半夏瀉心湯處方為法半夏12 g、干姜9 g、黃芩9 g、黃連3 g、黨參9 g、炙甘草9 g、大棗4 枚;苦降藥組處方為黃芩9 g、黃連3 g;辛開藥組處方為法半夏12 g、干姜9 g;甘補(bǔ)藥組處方為黨參9 g、炙甘草9 g、大棗4枚。以20倍量水浸泡60 min，煮沸后煎煮40 min，過濾，再加20倍量水，煎煮40 min，過濾，合并兩次濾液，濃縮至相當(dāng)于每毫升含0.2 g半夏或0.15 g黃芩或0.15 g黨參的藥液。多潘立酮片實(shí)驗(yàn)時(shí)用蒸餾水配制成0.1%的藥液備用。②半夏瀉心湯醇提部位、醇沉部位，苦降藥組醇提部位、醇沉部位的制備:以半夏瀉心湯、苦降藥組藥液，加95%食用乙醇，使含醇量達(dá)到70%，靜置24 h，過濾。濾液回收乙醇，然后分別濃縮至相當(dāng)于每毫升含0.2 g半夏或0.15 g黃芩，即為醇提部位。沉淀減壓干燥，溶于蒸餾水，配制成每毫升含0.2 g半夏或0.15 g黃芩，即為醇沉部位。③半固體營養(yǎng)糊的配制:按文獻(xiàn)［1～3］取羧甲基纖維素 5 g，溶于 125 ml蒸餾水中，然后依次加入奶粉8 g、白糖4 g、淀粉4 g，且每加一次攪拌一次，攪拌均勻后，再加入活性炭1.5 g，攪拌均勻，最后配制成約150 ml含150 g的營養(yǎng)糊和活性炭的混合物。置4℃冰箱冷藏，用前2 h取出，恢復(fù)至室溫。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 半夏瀉心湯促進(jìn)正常大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的有效藥組篩選 取大鼠48只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對照組、多潘立酮組、半夏瀉心湯組、苦降藥組、辛開藥組、甘補(bǔ)藥組，每組8只。除空白組外分別灌胃多潘立酮藥液、半夏瀉心湯藥液、苦降藥組藥液、辛開藥組藥液、甘補(bǔ)藥組藥液，10 ml/kg。連續(xù)灌胃4天。實(shí)驗(yàn)第4天禁食不禁水16 h，末次給藥15 min后，每只大鼠灌胃半固體營養(yǎng)糊2 g，末次給藥30 min后，脫頸椎處死，測定胃排空功能:打開腹腔，結(jié)扎胃賁門和幽門，取胃，用濾紙拭干后稱胃全重，然后沿胃大彎剪開胃體，洗去胃內(nèi)容物后濾紙拭干，稱凈重。計(jì)算胃殘留率(%)=［(胃全重－胃凈重)/半固體營養(yǎng)糊重］×100%。小腸推進(jìn)功能的測定:處死動(dòng)物后，打開腹腔，自盲腸處取大鼠的小腸，不加牽引鋪平于白紙上，量取自幽門括約肌至炭糊到達(dá)處為活性炭推進(jìn)距離，量取自幽門括約肌至盲腸的距離為小腸全長。計(jì)算小腸推進(jìn)率(%)=(活性炭推進(jìn)距離/小腸全長)×100%。

1.3.2 半夏瀉心湯促進(jìn)正常大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的有效部位篩選 取大鼠48只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對照組、多潘立酮組、半夏瀉心湯醇提組、半夏瀉心湯醇沉組、苦降醇提組、苦降醇沉組，每組8只。除空白組外分別灌胃多潘立酮藥液、半夏瀉心湯醇提藥液、半夏瀉心湯醇沉藥液、苦降醇提藥液、苦降醇沉藥液，10 ml/kg。連續(xù)灌胃4天。實(shí)驗(yàn)第4天禁食不禁水16 h，末次給藥15 min后，每只大鼠灌胃半固體營養(yǎng)糊2 g，末次給藥30 min后，脫頸椎處死，測定胃排空功能(方法同上)。

1.3.3 半夏瀉心湯促進(jìn)胃腸動(dòng)力障礙大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的有效藥組篩選 取大鼠56只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對照組、模型對照組、多潘立酮組、半夏瀉心湯組、苦降藥組組、辛開藥組組、甘補(bǔ)藥組組，每組8只。除空白組外分別灌胃蒸餾水、多潘立酮藥液、半夏瀉心湯藥液、苦降藥組藥液、辛開藥組藥液、甘補(bǔ)藥組藥液，10 ml/kg。連續(xù)灌胃4天。實(shí)驗(yàn)第4天禁食不禁水16 h，末次給藥15 min后，每只大鼠灌胃半固體營養(yǎng)糊2 g，末次給藥30 min后，脫頸椎處死，測定胃排空功能和小腸推進(jìn)功能(方法同上)。動(dòng)物處死前35 min，除空白組外，各組動(dòng)物均皮下注射硫酸阿托品注射液2 mg/kg。

1.3.4 半夏瀉心湯促進(jìn)胃腸動(dòng)力障礙大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的有效部位篩選 取大鼠56只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對照組、模型對照組、多潘立酮組、半夏瀉心湯醇提組、半夏瀉心湯醇沉組、苦降醇提組、苦降醇沉組，每組8只。除空白組外分別灌胃蒸餾水、多潘立酮藥液、半夏瀉心湯醇提藥液、半夏瀉心湯醇沉藥液、苦降醇提藥液、苦降醇沉藥液，10 ml/kg。連續(xù)灌胃4天。實(shí)驗(yàn)第4天禁食不禁水16 h，末次給藥15 min后，每只大鼠灌胃半固體營養(yǎng)糊2 g，末次給藥30 min后，脫頸椎處死，測定胃排空功能(方法同上)。。動(dòng)物處死前35 min，除空白組外，各組動(dòng)物均皮下注射硫酸阿托品注射液2 mg/kg。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)資料用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件包采用One－way ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 半夏瀉心湯促進(jìn)正常大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的有效藥組及有效部位 正常大鼠灌胃多潘立酮藥液后，胃殘留率顯著降低，小腸推進(jìn)率顯著升高，與空白對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);灌胃苦降藥組藥液后，胃殘留率顯著降低，與空白對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1;灌胃半夏瀉心湯醇提液、苦降藥組醇提液后，胃殘留率顯著降低，與空白對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，見表2。

表1 半夏瀉心湯促進(jìn)正常大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的有效藥組篩選研究

表2 半夏瀉心湯促進(jìn)正常大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的有效部位篩選研究

2.2 半夏瀉心湯促進(jìn)胃腸動(dòng)力障礙大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的有效藥組及有效部位 與空白對照組比較，模型對照組大鼠胃殘留率顯著升高，小腸推進(jìn)率顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);灌胃多潘立酮液后，胃殘留率顯著下降，小腸推進(jìn)率顯著升高，與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);灌胃半夏瀉心湯藥液、苦降藥組藥液后，胃殘留率顯著下降，與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表3。灌胃半夏瀉心湯醇提液、苦降藥組醇提液后，胃殘留率顯著下降，與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01或P＜0.05)，見表4。

表3 半夏瀉心湯促進(jìn)胃腸動(dòng)力障礙模型大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的有效藥組篩選研究

表4 半夏瀉心湯促進(jìn)胃腸動(dòng)力障礙模型大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)的有效部位篩選研究

3 討論

本研究首先利用拆方研究的方法，再通過有效藥組的醇提、醇沉提取部位，分別觀察其對正常大鼠和硫酸阿托品致胃腸動(dòng)力障礙大鼠的胃排空和小腸推進(jìn)的影響，分析比較以確定半夏瀉心湯促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)的有效藥組及有效部位。結(jié)果表明，苦降藥組有促進(jìn)正常大鼠胃排空的作用，半夏瀉心湯、苦降藥組有促進(jìn)硫酸阿托品致胃腸動(dòng)力障礙大鼠胃排空的作用;半夏瀉心湯醇提部位、苦降藥組醇提部位均有促進(jìn)正常大鼠和硫酸阿托品致胃腸動(dòng)力障礙大鼠胃排空的作用;但對小腸推進(jìn)均未見明顯藥效作用?？梢姲胂臑a心湯調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)的有效藥組主要為苦降藥組，其有效部位為醇提部位。

［1］彭成，鄧青秀，彭延娟，等.大鼠肝郁證胃腸運(yùn)動(dòng)功能障礙動(dòng)物模型的建立［J］.四川動(dòng)物，2008，27(2):287－291.

［2］Francis J，Critchley D，Dourish CT，et al.Comparisons between the effects of 5－HT and dl－fenfluramine on food intake and gastric emptying in the rat［J］.Pharmacol Biochem Behav，1995，50:581－585.

［3］段長農(nóng)，程宜福.小鼠半固體糊法加活性炭測定胃排空［J］.皖南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2002，21(3):184－185.