朱岷

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)以其具有快速、簡便及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn),目前廣泛應(yīng)用于臨床免疫實(shí)驗(yàn)室樣本的檢測(cè),為保證檢測(cè)的質(zhì)量,通常在檢測(cè)過程中需同時(shí)進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控以確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性。實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制是確保實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量安全的重要保證,目前通常應(yīng)用質(zhì)控血清與檢測(cè)標(biāo)本平行檢測(cè),以分析實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的精密度并鑒定其質(zhì)量狀況。近年來,作者通過對(duì)河南省周口市中心血站實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制情況進(jìn)行回顧分析和總結(jié),為建立科學(xué)合理的質(zhì)控模式提供依據(jù),現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器 RSP150-BEPⅢ全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng),HBsAg、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA法),試劑盒由上海科華、珠海麗珠及法國伯樂試劑公司提供。質(zhì)控品由衛(wèi)生部臨檢中心提供并在有效期內(nèi)使用。

1.2 質(zhì)控品使用前的確認(rèn) 新批號(hào)質(zhì)控品購入后,使用前由質(zhì)控科進(jìn)行確認(rèn),以確保其質(zhì)量有效性,其中陽性質(zhì)控品各孔S/CO應(yīng)＞1.0,S/CO均值一般應(yīng)在2.0～5.0,各孔質(zhì)控品檢測(cè)的S/CO值CV值≤15%。

1.3 質(zhì)控圖的制作方法 采用Levey-Jennings質(zhì)控圖法[1],每次進(jìn)行樣本檢測(cè)前,從冰箱中取出質(zhì)控血清并平衡至室溫,將質(zhì)控血清與正常檢測(cè)標(biāo)本同時(shí)檢測(cè),實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將所得質(zhì)控品檢測(cè)數(shù)據(jù)輸入計(jì)算機(jī),在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)狀態(tài)下連續(xù)進(jìn)行20次測(cè)定質(zhì)控血清,計(jì)算出其標(biāo)準(zhǔn)差和均值,建立坐標(biāo)軸,其中Y軸為質(zhì)控血清測(cè)定值,刻度設(shè)定為(X±3S)范圍,X軸為測(cè)定次數(shù)。將20次質(zhì)控血清測(cè)定值輸入計(jì)算機(jī),經(jīng)計(jì)算后得到室內(nèi)質(zhì)控框架圖,然后將本批每次試驗(yàn)得到的質(zhì)控品檢測(cè)數(shù)據(jù)輸入計(jì)算機(jī)。

1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn) 試劑盒內(nèi)陰、陽性對(duì)照檢測(cè)結(jié)果符合試劑盒要求,室內(nèi)質(zhì)控血清S/CO值≥1,同批號(hào)試劑室內(nèi)質(zhì)控品S/CO值在(X±3S)范圍表明試驗(yàn)有效。如不符合以上標(biāo)準(zhǔn),且檢測(cè)結(jié)果1次≥3S或2次≥2S均表示為失控。

2 結(jié)果

試劑因素是引起室內(nèi)質(zhì)控失控的主要原因,約占全部失控次數(shù)的48.46%,其主要原因?yàn)樵噭┦艿轿廴?試劑的儲(chǔ)存、運(yùn)輸過程不當(dāng)致其失效。儀器引起的失控原因包括：①加樣器加樣不準(zhǔn)。②加樣器吸入或排出過快致加入試劑量不準(zhǔn)確。③洗板機(jī)注液速度過快,或洗板機(jī)洗板吸液位置過高,使液體殘留量較多。④酶標(biāo)儀故障、比色結(jié)果不準(zhǔn)確等。質(zhì)控品因素引起的失控原因有：①質(zhì)控品開啟時(shí)間過長或反復(fù)凍融使效價(jià)降低。②質(zhì)控品保存不當(dāng)造成污染。③質(zhì)控品密封不好,水分揮發(fā)。④質(zhì)控品批號(hào)不符或過期。⑤質(zhì)控品使用不當(dāng),如使用前未充分混勻等。見表1。

表1 室內(nèi)失控原因分析(n,%)

3 討論

室內(nèi)質(zhì)控是實(shí)驗(yàn)室為保證臨床檢測(cè)質(zhì)量而進(jìn)行的檢測(cè)活動(dòng),ELISA法以具有快速、簡便及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn),目前廣泛應(yīng)用于臨床免疫實(shí)驗(yàn)室各類樣本的檢測(cè)。室內(nèi)失控涉及檢測(cè)過程的各種環(huán)節(jié),其室內(nèi)質(zhì)控的目的是為確保每份檢測(cè)標(biāo)本的穩(wěn)定性,并最大限度的防止假陽性或假陰性結(jié)果的出現(xiàn)。

在實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)過程中試劑、儀器、質(zhì)控品及人為因素等是引起室內(nèi)失控的主要原因。作者通過多年的實(shí)踐認(rèn)為可采取諸多的方法來減少室內(nèi)失控的發(fā)生,試劑處理方法：①添加或更換試劑時(shí),應(yīng)檢查其有效期,并注意試劑的批號(hào)與上一次檢測(cè)的試劑批號(hào)是否一致,如批號(hào)改變應(yīng)進(jìn)行校準(zhǔn),避免不同批號(hào)試劑混用。②試劑應(yīng)嚴(yán)格按照要求保存,防止試劑有效期內(nèi)發(fā)生變質(zhì),配制試劑時(shí)應(yīng)使用符合質(zhì)量要求的蒸餾水和容量器具,試劑槽內(nèi)的試劑不宜過滿,防止試劑在轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)濺出而致相互污染,同時(shí)實(shí)驗(yàn)前應(yīng)清洗或更換試劑槽,防止試劑被污染。儀器因素引起的失控原因及處理方法[2]：①嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)規(guī)程操作及日常維護(hù)。②對(duì)于經(jīng)維修或維護(hù)后的大型、關(guān)鍵設(shè)備,于使用前由質(zhì)控給予確認(rèn),以保證其性能達(dá)到預(yù)期要求,計(jì)量的儀器經(jīng)維護(hù)后,使用前應(yīng)校準(zhǔn)后方能用于實(shí)驗(yàn)。③電壓不穩(wěn)、光源燈老化、濾光片不潔均可引起測(cè)定結(jié)果的誤差。④加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室人員工作責(zé)任心及提高其業(yè)務(wù)素質(zhì)。質(zhì)控品處理方法：①在每次實(shí)驗(yàn)前應(yīng)逐一檢查各種質(zhì)控品的規(guī)格、種類、批號(hào)、外觀和效期等,防止不符合要求的質(zhì)控品使用。②質(zhì)控品不能反復(fù)凍融,質(zhì)控品融解后應(yīng)置于2～8℃環(huán)境保存,溶解后應(yīng)于一周內(nèi)使用完畢,防止反復(fù)打開瓶蓋致質(zhì)控品的污染。③干粉類質(zhì)控品應(yīng)輕開瓶蓋,避免質(zhì)控粉粒的噴出,在加入蒸餾水后配制后應(yīng)放置0.5 h,使質(zhì)控品完全溶解[3]。

綜上所述,在臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)過程中,每個(gè)環(huán)節(jié)均可影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量,只有實(shí)驗(yàn)室每個(gè)員工都能做到認(rèn)真對(duì)待,并細(xì)致耐心的做好方方面面的工作,嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,對(duì)每天的檢測(cè)結(jié)果認(rèn)真進(jìn)行分析,對(duì)失控的實(shí)驗(yàn)應(yīng)組織全科室人員集體參與討論、分析和查找原因,杜絕類似問題的再次發(fā)生。

[1] 王治國.臨床檢驗(yàn)質(zhì)量控制技術(shù).第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社,2008:69-70.

[2] 丁海明,潘婉儀.ELISA法定性實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控方法探討.現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,26(3):159-161.

[3] 余妙嫦.HBsAg檢測(cè)室內(nèi)失控失控原因及處理.中國醫(yī)學(xué)文摘.檢驗(yàn)與臨床,2008,22(1):2-3.