陳方方， 師彥平

(1.中國科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所，中國科學(xué)院西北特色植物資源化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/甘肅省天然藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅蘭州 730000;2.中國科學(xué)院大學(xué)，北京 100049）

分子印跡，又稱為分子烙印，是源于高分子化學(xué)、材料化學(xué)、生物化學(xué)等學(xué)科的一門交叉學(xué)科技術(shù)。目前，包括瑞典、日本、德國、美國、澳大利亞、法國和中國在內(nèi)的幾十個(gè)國家、上百個(gè)學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)和企事業(yè)團(tuán)體在從事分子印跡聚合物(molecularly imprinting polymers，MIPs）的研究和開發(fā)。MIPs材料具有良好的親和性和專一的選擇性，耐受高溫、高壓、酸堿和有機(jī)溶劑，制備簡便易于保存，因此在固相萃取、色譜分離分析、膜分離、模擬酶、仿生傳感器等方面得到了廣泛的應(yīng)用［1－5］。自從 Sellergren研究小組［1］于1994年首次報(bào)道將MIPs材料作為SPE吸附劑以來，分子印跡固相萃取(molecularly imprinted solid phase extraction，MISPE）方法在國內(nèi)外逐漸得到廣泛的研究和應(yīng)用。近年來，MISPE技術(shù)在天然藥物資源活性成分分離方面的應(yīng)用受到越來越多的關(guān)注。本文主要概述了MIPs制備的選擇因素以及MISPE技術(shù)在天然產(chǎn)物有效成分的萃取與分離分析中的應(yīng)用進(jìn)展。

1 分子印跡聚合物制備的選擇因素

MIPs的制備一般包括3個(gè)過程［6］:首先，將模板分子與功能單體在適當(dāng)?shù)娜軇┲型ㄟ^一定的作用相互結(jié)合形成單體-模板分子復(fù)合物;然后加入交聯(lián)劑在(熱或光）引發(fā)劑引發(fā)下，功能單體與交聯(lián)劑共聚，將復(fù)合物包裹在聚合物的立體結(jié)構(gòu)中;最后將聚合物中的模板分子洗脫除去，便可得到具有與模板分子形狀和功能基團(tuán)排列相匹配的空穴。因此MIPs對(duì)模板分子有“記憶”功能，對(duì)其有高度的選擇性。MIPs的選擇性很大程度上與功能單體、交聯(lián)劑以及溶劑的正確選擇有關(guān)。

1.1 功能單體的選擇

功能單體的選擇對(duì)得到高親和力的MIPs非常重要，它決定了MIPs與目標(biāo)分析物相互作用的穩(wěn)定性和選擇性識(shí)別能力。在共價(jià)鍵MIPs中功能單體應(yīng)該具有能與模板分子發(fā)生共價(jià)結(jié)合的基團(tuán)。同時(shí)，模板分子與功能單體之間的共價(jià)鍵應(yīng)該容易通過適當(dāng)?shù)姆椒〝嗔选７枪矁r(jià)鍵印跡中，以丙烯酸、甲基丙烯酸酯以及酰胺等為最常用的單體(見表1）。

表1 常用功能單體Table 1 Common functional monomers

在這些已經(jīng)商用的功能單體中，甲基丙烯酸(MAA）應(yīng)用較為廣泛。其結(jié)構(gòu)中除了一個(gè)C=C雙鍵外，還有一個(gè)－COOH基團(tuán)，既可以作為氫鍵的供體，也可以作為氫鍵的受體使用［7］。因此，當(dāng)模板分子中含有氨基、脂肪醇、脂肪胺等基團(tuán)時(shí)，甲基丙烯酸是非常適用的功能單體。具有雙鍵結(jié)構(gòu)的酰胺類和吡啶類單體也是性能優(yōu)異的選擇對(duì)象，當(dāng)模板分子含有羧酸或含有氨基、酰胺基時(shí)，利用丙烯酰胺(AM）作為功能單體可以提高 MIPs的選擇性［8－12］。此外AM在極性溶劑中也具有較強(qiáng)的氫鍵作用，這是許多功能單體所不具備的特點(diǎn)。根據(jù)模板分子的結(jié)構(gòu)，選擇與模板分子具有多作用位點(diǎn)的功能單體，可使MIPs的選擇性大大提高。此外，也有報(bào)道采用兩種或兩種以上混合功能單體，可以得到識(shí)別性能更強(qiáng)的 MIPs。Mosbach等［13］分別采用2-乙烯基吡啶-甲基丙烯酸和2-乙烯基吡啶-甲基丙烯酰胺作為混合功能單體合成氨基酸衍生物MIPs，證明兩種不同性質(zhì)功能單體的組合可以增加與模板分子相互作用的位點(diǎn)，比用二者中的單一功能單體獲得更好的MIPs選擇性。

1.2 交聯(lián)劑的選擇

由于要兼顧交聯(lián)劑和功能單體在溶劑中的溶解性，可應(yīng)用的交聯(lián)劑種類不多。在有機(jī)溶劑中進(jìn)行分子印跡實(shí)驗(yàn)，乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA）以及二乙烯基苯(DVB）是常用的交聯(lián)劑［14－16］。通過EGDMA合成的聚合物孔穴容易讓目標(biāo)分子接近，迅速達(dá)到吸附平衡，同時(shí)還能使MIPs保持一定的剛性，在洗去模板分子后，可以保持孔穴的大小和形狀以便再結(jié)合。二乙烯基苯能夠提供較大的交聯(lián)度從而使制備的MIPs剛性很大，因此也使用得較多。而在水相中常用的典型交聯(lián)劑則是N，N'-亞甲基雙丙烯酰胺。

1.3 溶劑的選擇

所選擇的溶劑首先應(yīng)能溶解聚合反應(yīng)中所需的各種試劑。它的主要作用一是為印跡聚合物提供多孔結(jié)構(gòu)，進(jìn)而促進(jìn)目標(biāo)分子的鍵合速度;多孔結(jié)構(gòu)的形成對(duì)于目標(biāo)分子的釋出也很重要。二是能分散在聚合反應(yīng)中所釋放的熱量，否則局部反應(yīng)溫度過高會(huì)導(dǎo)致某些副反應(yīng)的產(chǎn)生。溶劑的選擇主要依賴于印跡的種類，在共價(jià)鍵印跡法中，可以溶解體系中所有組分的溶劑都可以使用。而在非共價(jià)鍵印跡中，為促進(jìn)模板分子和功能單體復(fù)合物形成的穩(wěn)定性，常優(yōu)先選用弱極性有機(jī)溶劑，同時(shí)也要考慮溶解性能。常用的溶劑有甲苯、氯仿、二氯甲烷、乙腈、四氫呋喃、二甲基亞砜等。不過近年來，在極性溶劑中的印跡也取得了進(jìn)展。Mosbach等［17］在甲醇與水混合體系中，以4-乙烯基吡啶(4-VP）為功能單體，成功印跡了除草劑2，4-二氯苯氧基乙酸MIPs。楊宏等［18］在甲醇與甲苯混合溶劑中，以MAA為功能單體，印跡了氯磺隆MIPs，并成功應(yīng)用于水、土壤等實(shí)際樣品的檢測(cè)分析。Makoto 等［19］、Haginaka 等［20］、Yoshida等［21］以及羅旭彪等［22］以水為溶劑進(jìn)行分子印跡，并取得了良好的結(jié)果。這些研究為分子印跡技術(shù)接近天然分子識(shí)別系統(tǒng)水平奠定了一定基礎(chǔ)。

2 MISPE在天然產(chǎn)物萃取中的應(yīng)用

中藥作為重要的天然藥物資源之一，化學(xué)成分復(fù)雜，結(jié)構(gòu)類型多樣，尤其是一些活性成分含量較低，難以富集。而且其體系復(fù)雜，大分子和小分子共存，生命和非生命物質(zhì)共存，特別是存在結(jié)構(gòu)相似的化合物，這些都導(dǎo)致中藥活性成分的分離純化困難。目前，用于中藥活性成分的分離材料主要有硅膠、氧化鋁、大孔吸附樹脂和凝膠等。這些傳統(tǒng)吸附劑選擇性較差，經(jīng)常需要多次溶劑萃取和柱層析來得到純度高的活性成分，分離效率和收率較低，而且會(huì)造成環(huán)境的污染。MISPE技術(shù)中以MIPs作為吸附劑，可以選擇性識(shí)別模板分子及其結(jié)構(gòu)類似物，操作簡單，溶劑消耗量小。MISPE對(duì)天然產(chǎn)物活性成分的研究主要集中在黃酮類、多元酚類、有機(jī)酸、生物堿、苯丙素和萜類等幾類化合物。

2.1 黃酮類活性成分的分離純化

黃酮類化合物是廣泛存在于自然界的一大類化合物，多具有顏色。在植物體內(nèi)大部分與糖結(jié)合成苷，少部分以游離形式存在。黃酮類化合物不僅分布廣泛，而且生物活性多樣，如抑制特異性關(guān)鍵酶、調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)的釋放等，具有降血脂、降膽固醇、保肝抗炎以及雌激素樣作用［23］。目前已經(jīng)以7種黃酮類化合物(槲皮素、蘆丁、木犀草素、光甘草定、葛根素、山柰酚和非瑟酮）作為模板分子合成MIPs，進(jìn)行了 MISPE 技術(shù)應(yīng)用研究。Mizaikoff等［24］、Liu等［25］、Song 等［26］、Turner 等［27］、Xu 等［28］分別以槲皮素為模板分子合成MIPs，并建立了MISPE方法用于萃取葡萄酒、側(cè)柏葉等復(fù)雜基質(zhì)以及血漿中的槲皮素，取得了良好的富集純化效果?；贛IPs也可以同時(shí)吸附結(jié)構(gòu)類似物的特點(diǎn)，Mizaikoff等［29］采用熱聚合的方法，以4-VP為功能單體，EGDMA為交聯(lián)劑，槲皮素為模板分子制備了MIPs。以此為吸附劑所建立的固相萃取方法成功用于富集分離槲皮素以及結(jié)構(gòu)類似的黃酮類化合物。Lopez等［30］采用與Mizaikoff相同的合成方法，以槲皮素為模板分子在丙酮、乙腈混合溶劑體系中制備了MIPs。以此為吸附劑所建立的固相萃取方法不僅對(duì)槲皮素模板分子有特異吸附性能，對(duì)類似物兒茶酚和沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG）也具有優(yōu)異的吸附性能，已成功用于富集分離天然產(chǎn)物中的兒茶酚。Xu等［31］以槲皮素為模板分子，AM為功能單體，在四氫呋喃溶劑中合成MIPs，對(duì)槲皮素及其結(jié)構(gòu)類似物都有特異吸附性能。應(yīng)用于固相萃取中，成功地從銀杏葉提取物中分離富集到了槲皮素和山柰酚生物活性成分。Pakade等［32］以槲皮素為模板分子合成 MIPs，并建立了MISPE方法用于富集分離辣木葉和花中的槲皮素和山柰酚等黃酮類成分，回收率(75%～86%）結(jié)果良好。此外，Wang等［33］以蘆丁為模板分子，AM為功能單體，通過微波加熱本體聚合制備了MIPs，并用于中藥蔞蒿、杜仲、青蒿和三白草中蘆丁活性成分的萃取分離，回收率為85%～91%。Theodoridis等［34］以蘆丁和槲皮素作為混合模板分子合成MIPs，建立了MISPE方法用于葡萄酒、果汁和茶中黃酮類成分的萃取分離，取得了良好的結(jié)果。還有報(bào)道分別以非瑟酮［35］、葛根素［36－38］、光甘草定［39］、山柰酚［40］和木犀草素［41］為模板分子，并建立了 MISPE技術(shù)用于富集分離中藥黃櫨、葛根、甘草、高良姜和馬齒莧以及花生殼中相應(yīng)模板分子生物活性成分。

2.2 多元酚類活性成分的分離純化

目前已有MISPE應(yīng)用于白藜蘆醇、茶多酚、虎杖苷和α-生育酚酚類化合物的研究。白藜蘆醇是一種廣泛存在于葡萄、花生和虎杖等70多種植物中的天然二苯乙烯類多酚物質(zhì)，是一種天然的抗氧化劑，可降低血液黏稠度，抑制血小板凝結(jié)和血管舒張，保持血液暢通，可預(yù)防癌癥的發(fā)生和發(fā)展。Zhang等［42］以白藜蘆醇為模板分子，AM為功能單體，EGDMA為交聯(lián)劑，對(duì)硅球進(jìn)行氨丙基三甲氧基硅烷試劑硅烷化處理后通過表面印跡技術(shù)在二氧化硅微球表面進(jìn)行分子印跡過程。合成的MIPs分子印跡層的厚度為150 nm，作為固相萃取吸附劑用于萃取中藥虎杖中的白藜蘆醇取得了良好的結(jié)果。Zhang等［43］用同樣的制備過程，對(duì)硅球進(jìn)行乙烯基三甲基硅烷試劑的硅烷化處理后，通過表面印跡方法制備白藜蘆醇MIPs，分子印跡層厚度為200 nm。并通過靜態(tài)平衡結(jié)合法以及Scatchard分析法研究了該聚合物的結(jié)合能力和選擇性能。結(jié)果表明，該印跡聚合物中形成了兩類不同的結(jié)合位點(diǎn)，最大吸附量分別為9.087和13.80 mg/g。將該MIPs作為固相萃取吸附劑用于分離中藥虎杖提取液中的白藜蘆醇，得到良好的效果。Hearn等［44］以白藜蘆醇為模板分子，4-VP為功能單體合成MIPs建立MISPE方法，成功地從花生廢渣中分離富集出活性成分白藜蘆醇，回收率大于60%。Crescenzi等［45］以白藜蘆醇為模板分子合成MIPs并建立固相萃取方法，用于分析檢測(cè)天然產(chǎn)物以及葡萄酒中的多酚類成分。所合成的材料對(duì)白藜蘆醇以及槲皮素等結(jié)構(gòu)類似物都有良好的吸附性能，對(duì)白藜蘆醇和槲皮素在實(shí)際樣品的檢出限低至1.5和7.0 μg/L。Zhong等［46］以EGCG為模板分子，MAA為功能單體，EGDMA為交聯(lián)劑，在光冷引發(fā)條件下合成了EGCG的MIPs，以此為固相萃取吸附劑用于提取茶葉中的茶多酚，回收率達(dá)到了69.3%。且制備的MIPs固相萃取柱具有較好的穩(wěn)定性和耐用性能，使用20次后其選擇性識(shí)別能力仍未降低，而非印跡柱卻沒有這樣的選擇性識(shí)別能力。Lehotay等［47，48］以兒茶酚為模板分子合成MIPs并建立MISPE方法成功用于綠茶提取物中茶多酚類化合物的富集分離。Yao等［49］以表兒茶素為模板分子制備了MIPs，粒子大小在15～38 μm范圍內(nèi)，分布范圍較窄。對(duì)表兒茶素的吸附量達(dá)到38 μg/g，可用于固相萃取綠茶提取物中的表兒茶素活性成分。此外，Xiang等［50］以白藜蘆醇苷為模板分子，分別以AM、4-VP、甲基丙烯酸羥乙酯(HEMA）、MAA為功能單體，EGDMA為交聯(lián)劑，采用本體聚合法制備了白藜蘆醇苷MIPs。采用靜態(tài)平衡結(jié)合實(shí)驗(yàn)研究了印跡聚合物對(duì)模板分子及不同底物的識(shí)別性能。結(jié)果表明，以AM為功能單體的MIP1對(duì)模板分子的識(shí)別性能最好，以4-VP為功能單體的聚合物其次，以HEMA及以MAA為功能單體的聚合物的分子識(shí)別性能較差。表明功能單體與模板分子之間相互作用的強(qiáng)弱對(duì)MIP的識(shí)別能力有較大的影響。靜態(tài)平衡結(jié)合法以及Scatchard分析法表明，MIP1對(duì)模板分子呈現(xiàn)較好的結(jié)合能力和選擇性，該印跡聚合物中形成了兩類不同的結(jié)合位點(diǎn)，解離常數(shù)分別為7.43×10－5、3.70×10－3mol/L。將MIP1用于虎杖提取物中白藜蘆醇苷的固相萃取分離，效果良好。Puoci等［51］以 α-生育酚為模板分子，MAA為功能單體合成MIPs用于固相萃取天然植物中的α-生育酚活性成分，取得良好的結(jié)果，檢出限和檢測(cè)量值分別為3.49×10－7和1.16 ×10－6mol/L。

2.3 生物堿類活性成分的分離純化

一些生物堿因具有抗腫瘤、抗癌、低毒、低成本的特點(diǎn)，最近已成為人們研究的焦點(diǎn)。科學(xué)、高效地從植物中提取和分離純化生物堿成分是擴(kuò)大其實(shí)際應(yīng)用的核心問題。目前應(yīng)用MISPE對(duì)12種生物堿如長春堿、麻黃堿、黃連素等進(jìn)行了研究。Lopez等［52］分別以長春堿和文朵靈為模板分子，MAA或亞甲基丁二酸為功能單體，EGDMA為交聯(lián)劑，在乙腈或丙酮溶劑中通過熱聚合的方式合成MIPs用于萃取分離長春花中的吲哚類生物堿活性成分。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明以長春堿為模板分子制備的MIPs對(duì)兩種化合物都有較好的特異性吸附能力，對(duì)長春堿的回收率達(dá)到101%。長春堿 MIPs的最大吸附量為2.43 μmol/g。Dong 等［53］以麻黃堿為模板分子，MAA為功能單體制備麻黃堿MIPs，成功地從麻黃植物提取液中固相萃取分離出麻黃堿活性成分。Chen等［54］以黃連素為模板分子，通過非共價(jià)鍵方法合成黃連素MIPs用于固相萃取，對(duì)黃連素具有良好的特異性吸附能力，可以有效地將非洲防己堿與之分離。靜態(tài)平衡結(jié)合法以及Scatchard分析法表明，MIPs對(duì)模板分子呈現(xiàn)較好的結(jié)合能力和選擇性，解離常數(shù)為65.8 μmol/L。所建立的方法可成功用于天然產(chǎn)物中黃連素的分離分析。此外，有報(bào)道對(duì)其他類的生物堿也進(jìn)行了MISPE研究，如表2所示。

表2 分子印跡固相萃取技術(shù)在生物堿類活性成分純化分離中的應(yīng)用Table 2 Applications of MISPE in the extraction and separation of the alkaloid active constituents

2.4 有機(jī)酸類活性成分的分離純化

目前已經(jīng)有一些對(duì)綠原酸、原兒茶酸、咖啡酸等化合物進(jìn)行的MISPE應(yīng)用研究。綠原酸是酚類抗氧化劑，它不僅能快速地消除羥基自由基，而且能有效地通過電子轉(zhuǎn)移修復(fù)脫氧鳥苷酸氧化性羥基加成自由基。除了抗氧化力強(qiáng)外，綠原酸還具有抑制和殺滅多種致病菌和病毒、抗腫瘤、抑制突變、抗致畸、抗過敏、升高白細(xì)胞、保肝利膽、降血壓等功能［67］。姚守拙等［68］以綠原酸為模板，MAA為功能單體，EGDMA為交聯(lián)劑，采用沉淀聚合技術(shù)在碳納米管表面成功制備綠原酸印跡材料。吸附動(dòng)力學(xué)及吸附容量實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，此MIPs對(duì)綠原酸的結(jié)合存在兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，最大吸附容量分別為21.5和32.7 μmol/g。此印跡材料作為固相萃取吸附劑，成功應(yīng)用于金銀花提取液中綠原酸的富集分離研究，富集因子達(dá) 25。Lehotay 等［69］、Shi等［70］以原兒茶酸為模板分子，分別通過本體聚合和沉淀聚合的方法合成原兒茶酸MIPs并建立固相萃取方法，分別應(yīng)用于香蜂花和中藥千年健中選擇性萃取分離原兒茶酸及結(jié)構(gòu)類似酚酸類成分，回收率結(jié)果良好。Li等［71］以咖啡酸苯乙基酯為模板分子，4-VP為功能單體制備出MIPs，并以此為固相萃取吸附劑選擇性分離富集25種蘑菇中的咖啡酸苯乙基酯和咖啡酸生物活性成分，回收率分別為85%和52.3%。Row等［72］以咖啡酸為模板分子，AM為功能單體制備MIPs，并成功用于固相萃取海蓬子植物中的原兒茶酸、咖啡酸和阿魏酸生物活性成分，回收率為71.08%～81.02%。此外，袁小紅等［73］采用柯里拉京為模板分子制備MIPs并用于固相萃取中藥葉下珠中的柯里拉京及其結(jié)構(gòu)類似物，能特異性地將柯里拉京及老鸛草素從葉下珠提取液中萃取出來，可用于富集、萃取中藥中的柯里拉京及其結(jié)構(gòu)類似物。

2.5 苯丙素類生物活性成分的分離純化

鬼臼毒素來源于天然產(chǎn)物，因其抗腫瘤活性而引起人們的關(guān)注。Yuan等［74］等以鬼臼毒素為模板分子，AM為功能單體，EGDMA和DVB為雙交聯(lián)劑制備出鬼臼毒素MIPs用于固相萃取八角蓮、桃兒七和窩兒七中的鬼臼毒素生物活性成分，取得了良好的結(jié)果，回收率為89.5%～91.1%。Ding等［75］也以鬼臼毒素為模板分子，采用類似方法合成MIPs。吸附動(dòng)力學(xué)及吸附容量實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，此MIPs對(duì)鬼臼毒素的結(jié)合存在兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，解離常數(shù)分別為0.337和5.76 mmol/L。將其應(yīng)用于固相萃取藏藥桃兒七中的鬼臼毒素成分，回收率良好，可以成功地使其與4'-去甲鬼臼毒素分離開來。He等［76］和Ding等［77］分別以秦皮乙素和秦皮甲素為模板分子制備了MIPs，分別用于固相萃取中藥秦皮中的秦皮乙素和秦皮甲素，回收率結(jié)果良好，對(duì)秦皮甲素的回收率可以達(dá)到74.7%。

2.6 萜類生物活性成分的分離純化

奇壬醇是二萜類化合物，近年來研究發(fā)現(xiàn)奇壬醇在抗炎、抗風(fēng)濕以及免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)方面具有良好的活性，是臨床研究治療抗風(fēng)濕藥物的主要藥物之一［78］。目前，奇壬醇的分離純化主要采用硅膠等傳統(tǒng)的吸附劑，分離和純化工藝復(fù)雜，溶劑用量大，環(huán)境污染嚴(yán)重;同時(shí)由于傳統(tǒng)的吸附劑親和性和選擇性差，奇壬醇的分離效率低。Shi等［79］通過非共價(jià)鍵印跡方法首次合成了以奇壬醇為模板分子的MIPs材料。將MIPs填充于固相萃取柱中應(yīng)用于中藥豨薟草提取物中奇壬醇的萃取，所制得的MIP對(duì)目標(biāo)分析物具有良好的選擇性和吸附性能，回收率可達(dá)80.9%。Cao等［80］以青蒿素為模板分子，MAA為功能單體，EGDMA為交聯(lián)劑，通過表面印跡在硅膠微球表面形成印跡層，對(duì)青蒿素的吸附量為37.13 mg/g，用于固相萃取青蒿中的青蒿素活性成分，取得了良好的結(jié)果。Chen等［81］以非共價(jià)方法合成了青蒿素MIPs，對(duì)青蒿素的吸附量為8.46 mg/g，其吸附量雖然低于表面印跡方法，但也可成功地從青蒿提取液中萃取分離出青蒿素。此外，對(duì)其他萜類活性成分也進(jìn)行了MISPE研究(見表3）。

表3 分子印跡固相萃取技術(shù)在萜類活性成分純化分離中的應(yīng)用Table 3 Applications of MISPE in the extraction and separation of the terpenoid active constituents

2.7 其他生物活性成分的分離純化

除上文所述之外，有報(bào)道對(duì)大黃酸、丹參酮、17β-雌二醇、川芎嗪、藏紅花素等化合物也進(jìn)行了MISPE應(yīng)用研究。在此，對(duì)部分報(bào)道中模板分子的選擇、目標(biāo)分子的檢測(cè)、應(yīng)用的基質(zhì)以及回收率進(jìn)行了總結(jié)(見表4）。

表4 分子印跡固相萃取技術(shù)在其他類活性成分純化分離中的應(yīng)用Table 4 Applications of MISPE in the extraction and separation of other active constituents

3 結(jié)論

天然藥物體系中的有效成分復(fù)雜且含量差異大，對(duì)其進(jìn)行分離純化是一項(xiàng)非常艱巨的工作。傳統(tǒng)分離材料選擇性差，分離效率低，容易丟失微量有效成分。如何從復(fù)雜的天然藥物體系中分離純化活性成分成為中藥開發(fā)的關(guān)鍵問題之一。MIPs材料對(duì)特定化合物及其類似物具有專一吸附能力，具有其他分離材料所不具備的高選擇性，將其應(yīng)用于固相萃取天然藥物中的活性成分，可以提高萃取效率，簡化天然藥物樣品前處理過程，在天然藥物活性成分的分離和分析中具有很好的應(yīng)用前景。但是此項(xiàng)技術(shù)在實(shí)際應(yīng)用中還存在一些問題，比如吸附容量不夠大，富集倍數(shù)不夠高，識(shí)別能力容易受上樣溶劑的影響，在水溶液中的選擇性比較差等，還有待于大量研究工作的開展。

［1］Sellergren B.Anal Chem，1994，66(9）:1578

［2］Zheng C，Huang Y P，Liu Z S.Anal Bioanal Chem，2013，405(7）:2147

［3］Sergeyeva T A，Slinchenko O A，Gorbach L A，et al.Anal Chim Acta，2010，659(1/2）:274

［4］Fang G Z，Lu J P，Pan M F，et al.Food Anal Meth，2011，4(4）:590

［5］Dickert F L，Thierer S.Adv Mater，1996，8(12）:987

［6］Haupt K.Anal Chem，2003，75(17）:376

［7］Ansell R J，Mosbach K.J Chromatogr A，1997，787(1/2）:55

［8］Cheli W，F(xiàn)en M A，Haiyan Z，et al.Fine Chem，2007，24(8）:729

［9］Zhang Y F，Qi C，Mei F，et al.Chinese Journal of Applied Chemistry(張艷芳，祁超，梅芳，等.應(yīng)用化學(xué)），2009，26(7）:786

［10］Khodadadian M，Ahmadi F.Talanta，2010，81(4/5）:1446

［11］Zhu L L，Xu X J.J Chromatogr A，2003，991(2）:151

［12］Zhou J，He X W，Li Y J.Anal Commun，1999，36(6）:243

［13］Ramstrom O，Andersson L I，Mosbach K.J Org Chem，1993，58(26）:7562

［14］Yu C，Mosbach K.J Chromatogr A，2000，888(1/2）:63

［15］Jiang T H，Zhao L X，Chu B L，et al.Talanta，2009，78(2）:442

［16］Muhammad T，Nur Z，Piletska E V，et al.Analyst，2012，137(11）:2623

［17］Haupt K，Dzgoev A，Mosbach K.Anal Chem，1998，70(3）:628

［18］Fu X W，Wu Y J，Qu J R，et al.Environ Monit Assess，2012，184(7）:4161

［19］Asanuma H，Akiyama T，Kajiya K，et al.Anal Chim Acta，2001，435(1）:25

［20］Haginaka J，Takehira H，Hosoya K，et al.J Chromatogr A，1998，816(2）:113

［21］Yoshida M，Uezu K，Goto M，et al.J Appl Poly Sci，1999，73(7）:1223

［22］Luo X，Deng F，Luo S，et al.J Appl Poly Sci，2011，121(4）:1930

［23］Zhou X，Li H J.Chinese Journal of New Drugs(周新，李宏杰.中國新藥雜志），2007，16(5）:350

［24］Molinelli A，Weiss R，Mizaikoff B.J Agric Food Chem，2002，50(7）:1804

［25］Yan L S，Jing J，Huang Z M，et al.Chinese Journal of Analysis Laboratory(顏流水，井晶，黃智敏，等.分析試驗(yàn)室），2006，25(5）:97

［26］Song X，Li J，Wang J，et al.Talanta，2009，80(2）:694

［27］Pakade V，Lindahl S，Chimuka L，et al.J Chromatogr A，2012，1230:15

［28］Xie J C，Chen L R，Li C X，et al.J Chromatogr B，2003，788(2）:233

［29］Weiss R，Molinelli A，Jakusch M，et al.Bioseparation，2001，10(6）:379

［30］López M del M C，Pérez M C C，García M S D，et al.Anal Chim Acta，2012，721:68

［31］Xie J C，Zhu L L，Luo H P，et al.J Chromatogr A，2001，934(1/2）:1

［32］Pakade V，Cukrowska E，Lindahl S，et al.J Sep Sci，2013，36(3）:548

［33］Peng L，Wang Y，Zeng H，et al.Analyst，2011，136(4）:756

［34］Theodoridis G，Lasakova M，Skerikova V，et al.J Sep Sci，2006，29(15）:2310

［35］Li L，Hu S G，He X W，et al.Chemical Journal of Chinese Universities-Chinese(李禮，胡樹國，何錫文，等.高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報(bào)），2006，27(4）:608

［36］Chen L N，Du S H，Ma K F，et al.Chemistry and Industry of Forest Products(陳立娜，都述虎，馬坤芳，等.林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)），2008，28(3）:18

［37］Chen L，Jia X，Lu Q，et al.Sep Purif Technol，2010，71(3）:324

［38］Luo J，Zhang L，Chen D，et al.Analyst，2012，137(12）:2891

［39］Yan H，Tian M，Row K H.Sep Sci Technol，2009，44(2）:359

［40］Zhu H，Wang Y，Yuan Y，et al.Anal Meth，2011，3(2）:348

［41］Xiao S J，Li H X，Yu S W.Chemical Industry and Engineering Progress(肖淑娟，李紅霞，于守武.化工進(jìn)展），2010，29(2）:293

［42］Zhang Z，Liu L，Li H，et al.Appl Surf Sci，2009，255(23）:9327

［43］Zhang M L，Zhang Z H，Liu L，et al.Chinese Journal of Analytical Chemistry(張明磊，張朝暉，劉麗，等.分析化學(xué)），2010，38(1）:129

［44］Schwarz L J，Danylec B，Yang Y，et al.J Agric Food Chem，2011，59(8）:3539

［45］Euterpio M A，Pagano I，Piccinelli A L，et al.J Agric Food Chem，2013，61(8）:1640

［46］Zhong S A，He G W，Lei Q F，et al.Chinese Journal of Analysis Laboratory(鐘世安，賀國文，雷啟福，等.分析試驗(yàn)室），2007，26(10）:1

［47］Blahova E，Lehotay J，Skacani I.J Liq Chromatogr R T，2004，27(17）:2715

［48］Blahova E，Lehotay J.Chem Anal，2006，51(5）:795

［49］Ding L，Li H，Tang F，et al.Anal Lett，2006，39(12）:2373

［50］Xiang H，F(xiàn)an Y，Li M，et al.J Instru Anal，2013，32(1）:45

［51］Puoci F，Cirillo G，Curcio M，et al.Anal Chim Acta，2007，593(2）:164

［52］Lopez C，Claude B，Morin P，et al.Anal Chim Acta，2011，683(2）:198

［53］Dong X C，Wei W A，Ma S J，et al.J Chromatogr A，2005，1070(1/2）:125

［54］Chen C Y，Wang C H，Chen A H.Talanta，2011，84(4）:1038

［55］Zhu Q，Huang D，Li L，et al.Sci China-Chem，2010，53(12）:2587

［56］Theodoridis G，Manesiotis P.J Chromatogr A，2002，948(1/2）:163

［57］Farrington K，Magner E，Regan F.Anal Chim Acta，2006，566(1）:60

［58］Jin Y Z，Row K H.J Ind Engi Chem，2006，12(3）:494

［59］Wei S L，Guo X J，Wang H W，et al.Chinese Journal of Analytical Chemistry(韋壽蓮，郭小君，汪洪武，等.分析化學(xué)），2012，40(7）:1071

［60］Lai J P，He X W，Jiang Y，et al.Anal Bioanal Chem，2003，375(2）:264

［61］Guo Z，Zhang L，Song C，et al.Analyst，2011，136(14）:3016

［62］Mullett W M，Lai E P C，Sellergren B.Anal Commun，1999，36(6）:217

［63］Theodoridis G，Kantifes A，Manesiotis P，et al.J Chromatogr A，2003，987(1/2）:103

［64］Nakamura M，Ono M，Nakajima T，et al.J Pharm Biomed A-nal，2005，37(2）:231

［65］Lin L Q，Zhang J，F(xiàn)u Q，et al.Anal Chim Acta，2006，561(1/2）:178

［66］Wang G，Cao Q，Zhu X，et al.J Appl Poly Sci，2009，113(5）:3049

［67］Xie B X，Sun Z D.Modern Food Science and Technology(謝碧秀，孫智達(dá).現(xiàn)代食品科技），2007，23(9）:93

［68］Zhang H B，Zhang Z H，Nie Y，et al.Chinese Journal of Analytical Chemistry(張華斌，張朝暉，聶燕，等.分析化學(xué)），2009，37(7）:955

［69］Karasova G，Lehotay J，Sadecka J，et al.J Sep Sci，2005，28(18）:2468

［70］Chen F F，Wang G Y，Shi Y P.J Sep Sci，2011，34(19）:2602

［71］Li N，Ng T B，Wong J H，et al.Food Chem，2013，139(1/4）:1161

［72］Zhu T，Li S，Row K H.J Appl Poly Sci，2011，121(3）:1691

［73］Yuan X，Xu X，Zhu W，et al.Chinese Pharmaceutical Journal(袁小紅，徐筱杰，朱偉，等.中國藥學(xué)雜志），2010，45(8）:574

［74］Yuan Y，Wang Y Z，Huang M D，et al.Anal Chim Acta，2011，695(1/2）:63

［75］Zhu X F，Cao Q，Hou N B，et al.Anal Chim Acta，2006，561(1/2）:171

［76］Hu S G，Li L，He X W.J Chromatogr A，2005，1062(1）:31

［77］Wang G S，Cao Q E，Ding Z T，et al.Helv Chim Acta，2007，90(6）:1179

［78］Bi J，liu M，Lin W H，et al.Chinese Traditional and Herbal Drugs(畢娟，劉淼，林文翰，等.中草藥），2005，36(6）:866

［79］Chen F F，Wang R，Shi Y P.Talanta，2012，89:505

［80］Gong X Y，Cao X J.J Biotechnol，2011，153(1/2）:8

［81］Xie J，Cai C，Yang H，et al.Anal Lett，2013，46(1）:107

［82］Jiang Y F，Li J J，Zhong Y Q，et al.Chinese Pharmaceutical Journal(江一帆，李進(jìn)進(jìn)，衷友泉，等.中國藥學(xué)雜志），2012，47(13）:1077

［83］Claude B，Morin P，Lafosse M，et al.Talanta，2008，75(2）:344

［84］Liu H，Liu C，Yang X，et al.J Sep Sci，2008，31(20）:3573

［85］Cirillo G，Curcio M，Parisi O I，et al.Food Chem，2011，125(3）:1058

［86］Hrobonova K，Spevak A，Spisska L U，et al.Chem Pap，2013，67(5）:477

［87］Yin X，Liu Q，Jiang Y，et al.Spectrochim Acta A，2011，79(1）:191

［88］Chen X，Zhang Z，Yang X，et al.Talanta，2012，99:959

［89］Chen X，Zhang Z，Yang X，et al.J Sep Sci，2012，35(18）:2414

［90］Yan H，Tian M，Row K H.Chin J Chem，2009，27(11）:2212

［91］Tian M，Bi W，Row K H.Anal Bioanal Chem，2011，399(7）:2495

［92］Jia X，Li H，Luo J，et al.Anal Bioanal Chem，2012，403(9）:2691

［93］Guo Z F，Guo T T，Guo M.Anal Chim Acta，2008，612(2）:136

［94］Mohajeri S A，Hosseinzadeh H，Keyhanfar F，et al.J Sep Sci，2010，33(15）:2302

［95］Zhu Q，Wang L，Wu S，et al.Food Chem，2009，113(2）:608

［96］Zhu T，Yoon C，Row K.Chin J Chem，2011，29(6）:1246

［97］Piletska E V，Burns R，Terry L A，et al.J Agric Food Chem，2012，60(1）:95

［98］Lachova M，Lehotay J，Karasova G，et al.J Liq Chromatogr R T，2007，30(13/14/15/16）:2045