鞏長(zhǎng)芹

·實(shí)驗(yàn)研究·

RP-HPLC測(cè)定保嬰鎮(zhèn)驚丸中甘草苷的含量

鞏長(zhǎng)芹

目的建立保嬰鎮(zhèn)驚丸中甘草苷的含量測(cè)定方法。方法采用C18柱，流動(dòng)相為乙腈-0.2%磷酸溶液(14∶86)，檢測(cè)波長(zhǎng)為276nm，柱溫為40℃，流速：1.0 ml/min。結(jié)果甘草苷進(jìn)樣量在0.0973μg～0.9730μg之間與峰面積呈良好的線性關(guān)系(r=0.9996)；平均回收率98.0%，RSD(相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差)=1.08%(n=6)。結(jié)論該方法操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確性好，可作為保嬰鎮(zhèn)驚丸中甘草苷的質(zhì)量控制。

保嬰鎮(zhèn)驚丸；甘草苷；高效液相色譜法；含量測(cè)定

保嬰鎮(zhèn)驚丸收載于部頒標(biāo)準(zhǔn)第八冊(cè)，由大黃、甘草、朱砂組成，原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中只有性狀和檢查項(xiàng)目而無含量測(cè)定，為了能更好的控制其質(zhì)量，本文測(cè)定了甘草中甘草苷的含量，建立了準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、可靠分析方法，能有效控制其質(zhì)量，也有利于提高藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理水平。

1 材料與試藥

Agilent 1260高效液相色譜儀；Agilent-C18色譜柱；XS205DU電子天平(梅特勒-托利多生產(chǎn))；電熱恒溫水浴鍋(北京市永光明醫(yī)療儀器廠)；甘草苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，供含量測(cè)定用，批號(hào)：111610-201106，含量以93.7%計(jì))；保嬰鎮(zhèn)驚丸(市售，批號(hào)：1012001、1012002、1012003)；乙腈為色譜純，水為純化水，其余試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性 以C18為填充劑；以乙腈-0.2%磷酸溶液(14∶86)為流動(dòng)相；流速為1.0 ml/min；柱溫為40℃；檢測(cè)波長(zhǎng)為276nm。理論板數(shù)按甘草苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

2.2對(duì)照品溶液 精密稱取甘草苷對(duì)照品20.76 mg，置于200 ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2.3供試品溶液 參考快胃片的含量測(cè)定方法[1]。取本品，剪碎，取約0.7 g，精密稱定，精密加入50%甲醇25 ml，稱定重量，回流1 h，放冷，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4專屬性 按保嬰鎮(zhèn)驚丸中處方比例精密稱取全方中除甘草外的其他藥材，按“供試品溶液”條件制備成陰性溶液。照樣品測(cè)定方法測(cè)定，結(jié)果在主成分出峰處無干擾。

圖1 HPLC圖A.對(duì)照品 B.供試品

2.5線性關(guān)系 分別精密吸取對(duì)照品溶液1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0μl，注入液相色譜儀，記錄峰面積。以對(duì)照品進(jìn)樣量(X)為橫坐標(biāo)，峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，作標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y=1609.09X+4.8507，r=0.9996，結(jié)果甘草苷進(jìn)樣量在0.0973～0.9730μg之間與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.6精密度 取甘草苷對(duì)照品溶液5μl，分別進(jìn)樣6次，以2.1項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，以峰面積計(jì)算，結(jié)果RSD為0.24%，表明儀器的精密度良好。

2.7重復(fù)性 取同一樣品(1012002)6份，按2.3項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，以2.1項(xiàng)下的色譜條件分別進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算含量，結(jié)果甘草苷含量的RSD為1.26%，表明重復(fù)性良好。

2.8穩(wěn)定性 取同一份供試品溶液(1012002)，分別于0、1、2、4、8、12、24 h進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果甘草苷的RSD為1.37%，表明樣品在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.9加樣回收試驗(yàn) 取6份已知含量的樣品(1012002)，甘草苷的含量為3.12 mg/g，精密稱定，取6份，每份中精密加入甘草苷對(duì)照品溶液15 ml，按2.3項(xiàng)下的方法制備成供試品溶液，依法，測(cè)得量分別為2.5260，2.5319，2.5440，2.5039，2.4968，2.5251 mg，計(jì)算得回收率分別為98.01%、98.12%、99.83%、96.78%、97.13%、98.19%，平均值為98.0%，RSD為1.08%。

2.10樣品含量測(cè)定 取3批樣品，按供試品溶液的制備方法制備溶液，依法測(cè)定按外標(biāo)法計(jì)算含量。結(jié)果批號(hào)為1012001、1012002、1012003的樣品中甘草苷的含量分別為3.13，3.12，3.21 mg/g。

3 討論

3.1對(duì)甘草苷進(jìn)行紫外吸收光譜掃描在276nm處有最大吸收，選擇276nm波長(zhǎng)作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

3.2流動(dòng)相參考快胃片的流動(dòng)相[1]，通過調(diào)整比例，結(jié)果以乙腈-0.2%磷酸溶液(14 ∶ 86)為流動(dòng)相，所得色譜峰峰形較好，陰性無干擾，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確。

3.3通過試驗(yàn)，證明本方法快速、準(zhǔn)確可靠，能有效控制本制劑的質(zhì)量，可作為本品甘草的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部).北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:769-770.

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