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        角叉菜膠誘導的血栓形成模型的動物差異性比較

        2013-10-19 12:51:36王寅
        中國實用醫(yī)藥 2013年13期
        關鍵詞:角叉菜膠尾部造模

        王寅

        角叉菜膠誘導的血栓形成模型的動物差異性比較

        王寅

        目的比較不同品系小鼠采用角叉菜膠制備血栓形成模型的差異。方法分別選用昆明(KM) 和ICR兩種小鼠進行比較。其中模型組小鼠皮下注射0.2%角叉菜膠40 mg/kg,記錄小鼠注射角叉菜膠24 h、48 h和72 h后小鼠黑尾發(fā)生率。對照組給予同體積生理鹽水。結果造模在2種小鼠均可誘導血栓形成模型,在部分動物的尾部均可見清晰的血栓,但ICR小鼠成模率顯著高于KM種小鼠。結論皮下注射角叉菜膠在 2 種動物上均可成功地制備出血栓形成模型,但不同種屬的動物成模率可能有所不同,其及機制有待進一步研究。

        血栓形成; 動物模型; 動物差異

        目前不同品系的大鼠如Wistar和SD 及不同品系的小鼠如KM和ICR用于制備角叉菜膠誘導的尾部血栓模型均有報道,其中用小鼠制備血栓模型,方法更為簡便、成本更低廉。搞清不同種屬小鼠對角叉菜膠制備血栓模型不同反應性的差異,對于血栓模型研究中實驗動物的選擇具有重要意義。本研究選取了國內(nèi)實驗采用的昆明種KM小鼠和ICR小鼠進行比較研究。由于血栓的主要客觀指標如血液流變學和凝血功能的檢測需要大量的血液,而小鼠的血液量較少,難以檢測這些指標,故本研究將不比較反映血栓指標的血液流變學和凝血指標,重點研究血栓形成率是否有一定的差異。

        1 資料與方法

        1.1實驗動物 昆明小鼠和ICR小鼠各40只,雄性,體重18-22 g。動物和動物實驗設施均由軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心提供,動物合格證號:SCXK-(軍)-2007-004。

        1.2藥品與試劑 κ-型角叉菜膠(上海北連食品科技有限公司惠贈,批號201045:純度95.00%)

        1.3儀器與器材1 ml注射器

        2 方法

        2.1造模方法 動物購回給以基礎飼料適應7 d,根據(jù)體重隨機分組,每組20只,分為對照組和模型組。造模前一天晚上適當禁食。各組小鼠皮下注射0.2%角叉菜膠40 mg/kg,對照組小鼠灌皮下予等體積的注射用生理鹽水。記錄小鼠注射角叉菜膠24 h、48 h和72 h后小鼠黑尾發(fā)生率[1~6]。

        3 結果

        3.1一般情況觀察 KM和ICR小鼠造模后狀態(tài)良好,無行為異常。

        3.2不同動物的血栓形成情況 于試驗的24 h、48 h、72 h時間點測量造模動物尾部的血栓長度。2 種動物均可形成明顯的尾部血栓。ICR小鼠形成的血栓均較長,KM小鼠形成的血栓相對較短,ICR小鼠成膜數(shù)量均多于KM小鼠。各種動物模型組與正常組比較差異有統(tǒng)計學意義。結果表明2 種動物均能成功地形成血栓模型。結果見表1。

        表1 不同動物血栓形成情況(%)

        注:***P<0.001 VS control group,**P<0.01 VS control group,*P<0.05 VS control group

        4 討論

        角叉菜膠是從海藻中提取的硫酸多糖,可用于制備多種組織炎癥模型,是一種簡便易行的血栓造模試劑。其機制為炎癥損傷血管內(nèi)皮細胞,在IL-1β作用下,導致炎細胞趨化、浸潤,激活外源性凝血系統(tǒng),造成血栓形成,并在血栓形成后抑制纖溶系統(tǒng)[7]。

        角叉菜膠制備尾部血栓形成模型作為一種非手術方法制備的體內(nèi)血栓模型,可排除手術暴漏血管形成血栓可能造成的人為干擾[8],其方法簡便易學、操作簡單、重復性好,無需大型儀器和復雜檢測手段,目前已經(jīng)成為抗血栓藥物篩選的常用方法。此外,角叉菜膠誘導尾部血栓模型的優(yōu)點是其形成的血栓不需剖殺動物通過肉眼觀察和定量測定,故該模型適用于各類實驗室開展抗血栓藥物研究。

        本研究中所選用KM小鼠、ICR 小鼠小鼠品種。結果顯示KM 小鼠和ICR小鼠均能成功地造成血栓形成模型,比較而言ICR小鼠成模率顯著高于KM小鼠。梁愛華等[9]的研究也顯示在角叉菜膠誘導的尾部血栓模型中,ICR小鼠的成模率高于KM小鼠。限于試驗條件,本研究沒有對實驗動物造模后的血液流變學和凝血指標等進行考察, 推測2種動物造模成功率的差異可能是動物品種差異引起的。其具體機制有待后續(xù)進一步研究和觀察。

        [1] 徐叔云, 卞如濂, 陳修. 藥理實驗方法學. 北京:人民衛(wèi)生出版社,2001:1261.

        [2] 車薇, 李霞, 梁艷. 大鼠實驗性血栓模型的建立及其應用. 中國醫(yī)院藥學雜志,2008, 28(12):1045.

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        [7] 魏陵博, 戎冬梅, 吉中強. 角叉菜膠致大鼠尾部血栓形成的機制. 中西醫(yī)結合心腦血管病雜志, 2008, 6(5):542-543.

        [8] 繆紅, 程建軍, 蘇丙凡, 等. 黃芩莖葉總黃酮對角叉菜膠誘發(fā)小鼠尾部血栓形成的抑制作用. 承德醫(yī)學院學報, 2006,17(12):2420.

        [9] 梁愛華, 于長安, 李春英, 等. 內(nèi)毒素與角叉菜膠聯(lián)合誘導的血栓形成模型的動物差異性比較. 中國中藥雜志,2006,31(1):57-61.

        ComparativestudyofCarrageenaninducedthrombosisanimalmodelinmice

        WANGYin.

        DepartmentofPharmacy,TheFifthAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China

        ObjectiveTo compare the difference between KunMing mice and ICR miced on carrageenan induced tail thrombosis model.MethodsKunMing mice and ICR mice were choosed to compare.Subcutaneous injection of 0.2% carrageenan 40 mg/kg, record black tail incidence of the mouse after injection24 h,48 h and 72 h. The control group was given the same volume of normal saline.ResultsThrombosis model could be induced in the 2 kinds mice, in part, in ICR mice clearly visible thrombus were seen. In addition, in ICR mice model incidence of tail thrombosis was significantly higher than that in KM mice.ConclusionThrombosis model can be successfully induced, by subcutaneous injection of carrageenan in 2 kinds of animal. To discover the mechanism of differ, further research are needed.

        Thrombosis; Animal model; Animal differences

        450052 鄭州大學第五附屬醫(yī)院藥劑科

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