龐亞, 鄧赟, 毛艷蘋, 宋川霞, 戴宇, 陳晨

尾葉紫金牛（Ardisia caudata Hemsl.）系紫金牛科紫金牛屬植物，主要分布于我國四川、貴州、云南、廣西、廣東（海南島未發(fā)現(xiàn)）。其根被作為民間和民族藥物，稱為尾葉紫金牛、峨眉紫金牛、紅豆子、點抵改房、兩遜（廣西金秀瑤族語譯音），味苦、辛；性寒。入肝、胃、脾、腎四經(jīng)。具有祛風濕，解熱毒，止痛的功效；主治風濕痹痛，咽喉腫痛，牙痛，胃痛，跌打骨折，淋巴結(jié)腫大[1]。迄今有關(guān)其化學成分研究尚未見報道。為闡述其活性化學成分，首次對該植物的化學成分進行了系統(tǒng)研究。從尾葉紫金牛石油醚萃取部位分離得到5個化合物，經(jīng)理化性質(zhì)及波譜學鑒定依次為棕櫚酸⑴，谷甾醇⑵，菠甾醇⑶，紫金牛素E⑷，3-[(Z)-13-十七碳烯基]-2-羥基-5-甲氧基-對苯醌⑸。化合物1-5均為首次從該植物中分離得到。化合物4為帶長脂肪鏈的苯酚類化合物，化合物5為帶長脂肪鏈的苯醌類化合物。該兩類化合物均為紫金牛屬植物中具有特征性的化合物。

1 儀器與材料

Bruker Avance 600 spectrometer 核磁共振儀；X-4顯微測定熔點儀；UPT超純水器（成都超純科技有限公司）；TG16-W微量高速臺式離心機（長沙湘儀離心機儀器有限公司）；BP211D型電子分析天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；Sephadex LH-20（美國Pharmacia公司）；柱層析硅膠、薄層層析硅膠（青島海洋化工集團有限公司）；試劑均為分析純(成都科龍化工試劑廠)。

尾葉紫金牛藥材于2011年6月采自四川峨眉山，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學峨眉學院祝世杰教授鑒定為紫金?？浦参镂踩~紫金牛(Ardisia caudate Hemsl.)全株。

2 提取與分離

自然陰干藥材全株 (2.50 kg)，粉碎過二號篩，80%乙醇滲濾提取，減壓回收溶劑后用水分散，依次用石油醚（沸程60-90 ℃）、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取，減壓回收溶劑后得石油醚萃取物50 g，乙酸乙酯萃取物20 g，正丁醇萃取物65 g，水層200 g。石油醚萃取物經(jīng)硅膠柱色譜石油醚-乙酸乙酯(100:0-90:10)梯度洗脫后合并為6個部分。Fr5經(jīng)硅膠柱層析，石油醚-丙酮(15:1-12:1-10:1)洗脫，合并得到3個部分；Fr5-1經(jīng)CH2Cl2重結(jié)晶得化合物1(7 mg)；Fr5-2經(jīng)薄層硅膠柱層析（CH2Cl2為洗脫劑）得到化合物2(100 mg)、化合物3(20 mg)；Fr5-3經(jīng)Sephadex LH-20(CHCl3∶MeOH=1∶1)純化得化合物4(780 mg)；Fr6放置后析出黃色結(jié)晶，用石油醚多次洗滌后經(jīng)石油醚-丙酮重結(jié)晶，得到黃色片狀結(jié)晶化合物5(900 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 白色簇晶(MeOH)，mp59～60℃。溴甲酚綠試劑反應(yīng)呈陽性，提示為有機酸類物質(zhì)。ESI-MS: m/z 255[M-H]-。1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ2.34 (2H, t, J = 7.5 Hz, H-2)，1.63 (2H, m, H-3)，1.26 (brs, 24H, 4～15-H)，0.88 (3H, t, J = 7.0 Hz,H-16)。13C-NMR (151 MHz, CDCl3) δ179.68(C-1)，33.98(C-2)，31.92(C-3)，29.68，29.66，29.58，29.42，29.35，29.23，29.06，24.68(C-14)，22.68(C-15)，14.09(C-16)。數(shù)據(jù)與文獻[2]報道一致，故鑒定為棕櫚酸。

化合物2 白色結(jié)晶(CH2Cl2)，mp l36～137 ℃。5%香草醛濃硫酸顯紫紅色，放置變綠。該化合物與谷甾醇對照品共薄層檢測，其薄層行為與顯色反應(yīng)均與對照品完全一致，且混合熔點不下降，故確定為谷甾醇。

化合物3 無色針晶(CH2Cl2)，mp170～171℃。5%香草醛濃硫酸顯紫紅色，放置呈淺粉色。1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ5.16(2H, dd, J=14.6, 8.9Hz,22, 23-H)，5.03 (IH, dd, J=14.9, 8.6Hz, 7-H)，3.59(1H,m, 3-OH)，1.03(3H, d, J=6.6 Hz, 21-Me)，0.85(3H,d, J = 6.1 Hz, 27-Me)，0.81(9H, 3×Me)，0.55(3H, s,18-Me)。13C-NMR(151 MHz, CDCl3) δ139.56(C-8)，138.16(C-22)，129.44(C-23)，117.46(C-7)，71.07(C-3)，55.91(C-17)，55.14(C-14)，51.24(C-24)，49.46(C-9)，43.30(C-13)，40.81(C-20)，40.27(C-5)，39.47(C-12)，38.00(C-4)，37.14(C-1)，34.23(C-10)，31.87(C-25)，31.48(C-2)，29.62(C-6)，28.49(C-16)，25.39(C-28)，23.01(C-15)，21.56(C-11)，21.37(C-21)，21.08(C-27)，19.00(C-26)，13.04(C-19)，12.23(C-29)，12.05（C-18）。數(shù)據(jù)與文獻[3]比較，基本一致，故鑒定為α-菠甾醇。

化合物4 白色蠟狀固體(CH2Cl2)，mp38～39℃。FeCl3乙醇溶液呈紫色，5%香草醛-濃硫酸呈深紅色，久置呈藍綠色。ESI-MS: m/z 395[M-H]-。結(jié)合碳譜數(shù)據(jù)推斷分子式可能為C24H40O2。從1H-NMR和13C- NMR可知分子中含有兩個化學環(huán)境相同的芳香質(zhì)子[δ6.23(s, 2H)，107.78(4, 6-C)]，兩個酚羥基[δ4.83(brs, 2H)，154.55(1, 3-C)]，一個甲基[δ2.10(s,3H)，7.72(2-Me)]及一條帶有不飽和雙鍵[5.34(m, 2H)]的長鏈烯基。由ESI-MS: m/z 395 [M-H]-，可知該長鏈為十七碳烯不飽和脂肪鏈。該長鏈烯基的一端為端基甲基[δ0.88(t, 3H, J=6.8Hz)，14.10(17′-Me)]，另一端是連接苯環(huán)的亞甲基δ2.44(t, 2H, J=7.8Hz)，數(shù)據(jù)與文獻[4]比較，基本一致，故鑒定為Ardisin E。

化合物核磁數(shù)據(jù)如下：1H-NMR(600 MHz, CDCl3)δ6.23(2H, s, 4-H and 6-H)，5.34(2H, m, CH=CH)，4.83(2H, brs, 1-OH and 3-OH)，2.44(2H, t, J=7.8Hz,1′-H)，2.10(3H, s, 2-Me)，2.01(4H, dd, J=6.4, 12.5Hz,7′ and 10′-H)，1.55 (2H, m, 2′-H)，1.32-1.25(20H, m,3′～6′, 11′～14′,15′ and 16′-H），0.88(3H, t, J=6.8Hz,17′- Me)；13C-NMR (151 MHz, CDCl3) δ154.55(1,3-C)，141.98(5-C)，129.98(8′-C)，129.84(9′-C)，107.78(4, 6-C)，107.38(2-C)，35.51(1′-C)，31.91(15′-C)，31.17(2′-C)，27.20-29.77(3′～6′-C and 11′～14′-C)，27.20(7′-C,10′-C)，22.68(16′-C)，14.10(17′- C)，7.72(2-Me)。

化合物5 黃色片狀結(jié)晶(石油醚-丙酮)，黃色條狀結(jié)晶(CH3OH)，mp76～78 ℃。5%香草醛-濃硫酸呈紫色。ESI-MS: m/z 389 [M-H]-。結(jié)合1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)分析可知，該化合物為一個三取代的苯醌類化合物。δC181.66，182.81分別對應(yīng)兩個羰基碳信號。δ7.24(s, 1H)為芳香質(zhì)子，δ5.83( s, 1H)為芳環(huán)上取代的羥基質(zhì)子，[δ3.86(s, 3H)，δ56.72(6-MeO)]為芳環(huán)上的甲氧基取代，由一組數(shù)據(jù)δ5.34(m, 2H,CH=CH)，2.44(t, 2H, J=7.5 Hz)，2.01(q, 4H)，1.45(m,2H)，1.31-1.25(brs, 20H)，0.88(m, 3H)可知此為連接苯環(huán)的一條含不飽和雙鍵的長鏈脂肪烴，并由質(zhì)譜推斷該脂肪長鏈為十七碳烯。數(shù)據(jù)與文獻[5]比較，可初步判斷母核為3-十七碳烯基-2-羥基-5-甲氧基-1,4-苯醌。由ESI-MS: m/z 389 [M-H]-，361 [M-H-C2H2]-片段可知，具不飽和雙鍵的長鏈脂肪烴發(fā)生了一次β裂解，由此推斷雙鍵位置位于C13, 14位，故鑒定為3-[(Z)-13-heptadecenyl]-2-hydroxy-5-methoxy-p-benzoquinone。

化合物核磁數(shù)據(jù)如下：1H-NMR(600MHz, CDCl3)δ7.24(1H, s, 2-OH)，5.83(1H, s, 6-H)，5.34(2H, m,CH=CH)，3.86(3H, s, 5-MeO)，2.44(2H, t, J=7.5Hz，1′-H)，2.01(4H, q, 12′-H and 15′-H)，1.45(2H, m, 2′-H)，1.31-1.25(20H, brs, 3′～11′-H and 16′-H)，0.88(3H, m,17′-Me)。13C-NMR (151 MHz, CDCl3) δ182.81(C-1)，181.66(C-4)，161.16(C-6)，151.52(C-3)，129.90(C-14′)，129.84(C-13′)，119.26(C-2)，102.17(C-5)，56.72(6-MeO)，31.96-26.90(C2′～12′and C-15′)，22.62(C-16′)，22.33(C-1′)，13.96(C-17′)。

4 討論

紫金牛屬植物含有皂苷、苯酚、苯醌、香豆素等多種活性成分，其中苯酚及苯醌類化合物一般具有長脂肪鏈等取代?，F(xiàn)在研究表明，紫金牛屬植物中所含有的帶有長脂肪鏈的苯酚及苯醌類的某些化合物具有抗腫瘤的活性。本實驗中分離得到的化合物4為帶長脂肪鏈的苯酚類化合物，化合物5為帶長脂肪鏈的苯醌類化合物，有可能具有抗腫瘤活性，有待于進一步研究。

[1] 國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會. 《中華本草》[M]. 上海: 上?？茖W技術(shù)出版社,1999.

[2] 黃新安, 蔡佳仲, 胡英杰, 等. 星宿菜化學成分的研究[J]. 中國中藥雜志, 2007, 32(7): 596.

[3] 段潔,李巍, 胡旭佳,等.九子參化學成分研究[J]. 中草藥,2009, 40(4): 528.

[4] Zheng Y, Wu F-E. Resorcinol derivatives from Ardisia maculosa[J]. Journal of asian natural products research, 2007,9(6):545.

[5] Katsura Seki, Kazuo Haga, Ryohei Kaneko. Phenols and a dioxotetrahydrodibenzofuran from seeds of Iris pallasii [J].Phytochemistry, 1995, 38(4): 965.