周細(xì)根，梁生林，胡存華，顏峰光 ，李慶耀，羅 婷，肖小梅

（井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)院a.藥理學(xué)教研室；b.2008級(jí)藥學(xué)本科班，江西 吉安 343000）

樟樹是中國一種常見的經(jīng)濟(jì)樹種，其來源廣泛，性溫、味辛；能通竅辟穢、溫中止痛，利濕殺蟲；用于寒濕吐瀉，胃腹疼痛；外用治疥、癬、齲齒作痛。樟樹是提煉化工原料樟腦、樟腦油、芳樟醇最重要的原料樹種［1］。為了探究樟樹更多的藥理作用，本實(shí)驗(yàn)對(duì)樟樹子水提液的抗驚厥作用進(jìn)行了研究。

1 材料

1.1 動(dòng)物

健康小鼠60只（南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)科學(xué)部提供），雌雄不限，體質(zhì)量18～30 g。

1.2 藥品與試劑

新鮮樟樹子（采自于井岡山大學(xué)校園內(nèi)的樟樹的成熟種子），0.05%地西泮溶液，生理鹽水。

1.3 主要儀器

JTC-1型驚厥與痛覺實(shí)驗(yàn)交流電刺激器（成都儀器廠生產(chǎn)），天平，注射器，常規(guī)玻璃儀器等。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 藥物配制

2.1.1 樟樹子水提液的制備

稱取新鮮樟樹子200 g，洗凈，搗碎，置于1000 mL蒸餾器中，加水浸泡2 h；連接索式提取器，加入400 mL蒸餾水直接加熱蒸餾，回流2～3 h，收集水提液，過濾，濃縮至 20 mL（相當(dāng)于含生藥10 g·mL-1）［2］。再將濃縮液配置成高、中、低（10.0、7.5、5.0 g·mL-1）3個(gè)劑量的樟樹子水提液。

2.1.2 地西泮溶液的制備

取0.05%地西泮溶液適量，用蒸餾水配成0.0005 g·mL-1。

2.2 分組與給藥

將60只小鼠，按體質(zhì)量分層、采用隨機(jī)數(shù)字表法分為5組，每組12只，即生理鹽水對(duì)照組（A組），地西泮溶液組（B組），高、中、低劑量樟樹子水提液組（分別為C、D、E組）。每組小鼠均腹腔注射給予相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)藥物，給藥量均為 0.1 mL·（10 g）-1。用藥前及用藥后15、30、60 min測(cè)量小鼠驚厥閾值。

2.3 小鼠驚厥閾值的測(cè)量

將JTC-1型驚厥與痛覺實(shí)驗(yàn)交流電刺激器輸出線的鱷魚夾尖端用生理鹽水浸濕，2個(gè)夾子中的1個(gè)夾于小鼠雙耳，另1個(gè)夾住下頜部。開啟電源開關(guān)，輸出電壓調(diào)到30 V，刺激時(shí)間設(shè)為0.2 s，刺激周期設(shè)為單周期。按動(dòng)“開始/停止”按鍵通電刺激，通電時(shí)觀察小鼠是否發(fā)生驚厥 （小鼠的驚厥發(fā)生過程:僵直屈曲期→后肢伸直期→陣攣期→恢復(fù)期，以后肢強(qiáng)直作為驚厥的指標(biāo)）。刺激后，若小鼠沒有產(chǎn)生后肢強(qiáng)直驚厥，則應(yīng)適當(dāng)調(diào)大輸出電壓繼續(xù)刺激，直至產(chǎn)生后肢強(qiáng)直驚厥，記錄實(shí)驗(yàn)電壓參數(shù)作為小鼠的驚厥閾值；對(duì)每只小鼠的驚厥閾值各測(cè)2次，每次間隔5 min，取其平均值為小鼠的驚厥閾值。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3 結(jié)果

與A組比較，給藥前各組驚厥閾值比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；B、C、D 組給藥后 15、30、60 min與A組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01或 P＜0.05），E 組給藥后 15、30、60 min 與 A 組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與自身給藥前比較，A、E組給藥后15、30、60 min差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），B、C、D 組給藥后 15、30、60 min 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01 或 P＜0.05），見表 1。

表1 各組給藥前后驚厥閾值比較 ,U/V

表1 各組給藥前后驚厥閾值比較 ,U/V

*P＜0.01，**P＜0.05 與 A 組比較；△P＜0.01，△△P＜0.05 與同組給藥前比較。

組別 n 給藥前 給藥后15 min 30 min 60 min A 組 12 38.5±5.3 38.1±5.8 39.2±4.6 37.8±4.5 B 組 12 39.7±6.856.75±7.5﹡△ 60.6±6.4﹡△ 53.4±7.3﹡△C 組 12 37.6±4.3 52.1±6.1﹡△ 57.7±5.5﹡△ 59.2±6.6﹡△D 組 12 38.3±2.6 45.7±5.0﹡﹡△△ 48.6±4.4﹡﹡△△ 47.2±4.8﹡﹡△△E 組 12 39.1±3.9 38.7±6.2 40.3±4.1 39.30±5.8

4 討論

為探討樟樹子是否具有抗驚厥作用，本實(shí)驗(yàn)采用電刺激法驚厥模型對(duì)樟樹子水提液進(jìn)行了抗驚厥作用的初步研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，高劑量樟樹子水提液明顯提高電刺激法所致小鼠的驚厥閾值，與生理鹽水對(duì)照組比較和自身給藥前比較差異極顯著，表明樟樹子水提液具有明顯的抗驚厥作用，為其進(jìn)一步研究提供了初步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。其抗驚厥有效成分及作用機(jī)制有待于進(jìn)一步研究［3］。

［1］肖姍美，羅小會(huì)，楊曉東.樟樹葉揮發(fā)油B-環(huán)糊精包合物的制備研究［J］.光譜實(shí)驗(yàn)室，2008，25（4）:735-737.

［2］張炯炯，李功華，李躍軍.樟樹自然脫落葉揮發(fā)油提取工藝的研究［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2009，28（8）:1651-1653.

［3］王莉，徐寧，孫娟，等.12種中藥乙醇提取物抗驚厥作用和時(shí)間-體存生物當(dāng)量的比較研究［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2010，8（4）:460-462.