汪濤胡衛(wèi)東曾凡波李育芳

(1.解放軍武漢療養(yǎng)院，430074；2.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，430030)

復(fù)方太子參片的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究

汪濤1胡衛(wèi)東1曾凡波2李育芳1

(1.解放軍武漢療養(yǎng)院，430074；2.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，430030)

目的 對(duì)復(fù)方太子參片的主要藥效學(xué)進(jìn)行觀察，為該藥的臨床應(yīng)用提供藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法 通過二甲苯致小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)，觀察其抗炎作用；通過小鼠氨水引咳實(shí)驗(yàn)，觀察其鎮(zhèn)咳作用；通過大鼠毛細(xì)管祛痰實(shí)驗(yàn)，觀察其祛痰作用；通過磷酸組胺致豚鼠哮喘實(shí)驗(yàn)，觀察其平喘作用。結(jié)果 復(fù)方太子參片能降低二甲苯導(dǎo)致的小鼠耳廓腫脹程度，具有明顯的抗炎作用；能顯著抑制25%氨水誘發(fā)的小鼠咳嗽；能明顯增加大鼠痰量的排出；能有效抑制磷酸組胺誘發(fā)的豚鼠哮喘。結(jié)論 復(fù)方太子參片具有抗炎、止咳、祛痰、平喘作用。

復(fù)方太子參片；抗炎；止咳；祛痰；平喘

慢性支氣管炎、哮喘是臨床常見病癥。其病機(jī)多為肺氣上逆所致，歷代醫(yī)家對(duì)其皆有論述。將咳喘分為虛實(shí)兩大類。一般邪氣壅肺所致的咳喘為實(shí)癥，臟腑功能失調(diào)精氣兩虛所致的咳喘為虛癥。復(fù)方太子參片為解放軍武漢療養(yǎng)院自配的純中藥制劑。其組方既考慮到外邪實(shí)證，又顧及到內(nèi)傷虛證，扶正固本，補(bǔ)肺益腎，清熱解毒，化痰止咳，降氣平喘，適用于各類型的慢性支氣管炎、哮喘。體現(xiàn)了中醫(yī)辨證施治、標(biāo)本兼顧的治療特色。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康SD大鼠，雌雄各半，體質(zhì)量(200±20)g，由同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)：SCXK(鄂)2008-010；ICR小鼠，雌雄各半，體質(zhì)量(20±2)g，由同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)：SCXK(鄂)2008-010；豚鼠100只，雌雄各半，體質(zhì)量(250±20)g，由上海市松江區(qū)車墩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物質(zhì)量合格證編號(hào)：SCXK(滬)2007-0008。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品 復(fù)方太子參片，由本院制劑室提供，制劑批文：廣L2011003(批號(hào)：120612)；醋酸潑尼松片 5 mg/片(浙江仙琚制藥股份有限公司)，批號(hào)：120369；急支糖漿，(太極集團(tuán)重慶涪陵制藥廠有限公司)，國(guó)藥準(zhǔn)字Z50020615，批號(hào)：12040330。

1.3 實(shí)驗(yàn)試劑 二甲苯(北京五二九五二化工廠)，批號(hào)：20010828；磷酸組胺(上海三杰生物技術(shù)有限公司)，批號(hào)：080101；25%氨水(江西洪都生物化學(xué)試劑有限公司)，批號(hào)：080102；氯化銨 (河北海驊制藥廠)，批號(hào)：050905。

1.4 實(shí)驗(yàn)儀器 天福PC396電子秒表(深圳市惠波工貿(mào)有限公司)；FA2204B電子分析天平(上海臺(tái)衡電子衡器有限公司)；0～(125.00±0.02)mm游標(biāo)卡尺(成都量具刃具廠)；402A超聲霧化器(江蘇魚躍醫(yī)療設(shè)備股份有限公司)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 抗炎實(shí)驗(yàn) 二甲苯致小鼠耳廓腫脹法[1]。取小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分成5組，設(shè)復(fù)方太子參片高、中、低劑量組，分別為生藥1.8、0.9、0.45 g/kg；陽(yáng)性對(duì)照組，給醋酸潑尼松片30 mg/kg；空白對(duì)照組[2-4]。實(shí)驗(yàn)前4、2、1 h按組別灌胃，于末次給藥30 min后，用移液器將二甲苯滴涂到小鼠的左耳廓的內(nèi)外兩面致炎(40 μL/只)，1 h后將小鼠脫椎處死，剪下左右耳廓，以直徑8 mm的打孔器分別在兩耳同一部位打下圓耳片。用分析天平稱重，計(jì)算各組動(dòng)物耳腫脹度和抑制率[5-6]。

腫脹度(%)＝(左耳重－右耳重)/右耳重×100%

抑制率(%)＝(對(duì)照組腫脹率－給藥組腫脹率)/對(duì)照組腫脹率×100%

2.2 鎮(zhèn)咳實(shí)驗(yàn) 小鼠濃氨水噴霧法[7]。取小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為空白對(duì)照組，給等容積蒸餾水；陽(yáng)性對(duì)照組，給急支糖漿 20 mL/kg；復(fù)方太子參片高、中、低劑量組，分別給復(fù)方太子參片生藥1.8、0.9、0.45 g/kg。 各組均灌胃給藥，1次/d，連續(xù)7 d。末次給藥60 min后，小鼠接受25%濃氨水噴霧10 s，觀察咳嗽反應(yīng)出現(xiàn)的時(shí)間和次數(shù)，記錄小鼠的咳嗽潛伏期和2 min內(nèi)咳嗽次數(shù)。

2.3 祛痰實(shí)驗(yàn) 復(fù)方太子參片對(duì)大鼠痰液排泌的影響[8]。取大鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為空白對(duì)照組，給生理鹽水；陽(yáng)性對(duì)照組，給氯化銨1.0 g/kg；復(fù)方太子參片分高、中、低劑量組，分別給復(fù)方太子參片生藥1.0、0.5、0.25 g/kg。各組均每天灌胃給藥1次，給藥容量1 mL/100 g，連續(xù)3 d，末次藥后45 min，分別腹腔注射10%烏拉坦1 mL/100 g麻醉，仰位固定，解剖分離氣管，在甲狀軟骨下緣正中兩軟骨之間，插入已知重量的毛細(xì)玻璃管，管長(zhǎng)10 cm，內(nèi)徑0.5 mm左右，使氣管分泌液沿毛細(xì)管上升，60 min后，將收集氣管分泌引流液后的毛細(xì)管稱重，計(jì)算收集引流液前后毛細(xì)管重量的差值，即氣管分泌液重量。

2.4 平喘實(shí)驗(yàn) 豚鼠磷酸組胺引喘法[9]。取豚鼠放置在4 000 mL透明玻璃鐘罩內(nèi)，0.2%的磷酸組胺溶液超聲霧化給予15 s，觀察記錄豚鼠的引喘潛伏期 (從噴霧開始到哮喘發(fā)作，出現(xiàn)呼吸困難，直至抽搐跌倒的時(shí)間)，若超過150 s無反應(yīng)者，不予選用。取篩選合格的豚鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分成5組，每組10只。即空白對(duì)照組，給等容積蒸餾水；陽(yáng)性對(duì)照組，給急支糖漿10 mL/kg；復(fù)方太子參片高、中、低劑量組，分別給復(fù)方太子參片生藥2.4、1.2、0.6 g/kg。 各組均灌胃給藥，1次/d，連續(xù)7 d。末次給藥1 h后，將豚鼠放入4 000 mL透明玻璃鐘罩內(nèi)，按預(yù)選條件和方法測(cè)定豚鼠的引喘潛伏期。若超過6 min仍不發(fā)生哮喘反應(yīng)者，其潛伏期按360 s計(jì)算。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 復(fù)方太子參片對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響與陽(yáng)性對(duì)照組比較，復(fù)方太子參片中、高劑量組小鼠耳廓腫脹減輕，顯示明顯抑制小鼠耳廓腫脹度(P＜0.05和P＜0.01)，其抑制率以高劑量較為明顯，呈現(xiàn)良好的量效關(guān)系(表1)。提示該藥對(duì)二甲苯所致的小鼠耳廓急性滲出性炎癥有明顯作用。

3.2 復(fù)方太子參片對(duì)濃氨水致小鼠咳嗽的影響 結(jié)果表明復(fù)方太子參片可有效抑制濃氨水誘導(dǎo)的小鼠咳嗽，使小鼠的咳嗽次數(shù)明顯減少的同時(shí)亦使小鼠咳嗽的潛伏期明顯延長(zhǎng)，與空白對(duì)照組比較，低、中、高劑量組差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，說明復(fù)方太子參片對(duì)濃氨水誘發(fā)的小鼠咳嗽有止咳作用(表2)。

3.3 復(fù)方太子參片對(duì)大鼠痰液排泌的影響 復(fù)方太子參片高、中、低劑量均能增加大鼠痰液排泌量，與空白組比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，提示復(fù)方太子參片祛痰作用明顯 (表3)。

3.4 復(fù)方太子參片對(duì)磷酸組胺致豚鼠哮喘的影響 結(jié)果表明復(fù)方太子參片可抑制磷酸組胺所致的豚鼠哮喘。與空白對(duì)照組比較，高、中劑量組豚鼠的引喘潛伏期延長(zhǎng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，表4)。

表1 復(fù)方太子參片對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響(±s)

表1 復(fù)方太子參片對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響(±s)

注：與空白對(duì)照組比較，P＜0.05，P＜0.01

組別 n空白對(duì)照組 10醋酸潑尼松組 10復(fù)方太子參片高劑量組 10復(fù)方太子參片中劑量組 10復(fù)方太子參片低劑量組 10***劑量 腫脹度(%) 抑制率(%)—109.16±16.45 —30 mg/kg 82.39±14.36** 26.37生藥1.80 g/kg 72.31±12.42** 31.43生藥0.90 g/kg 87.26±13.57* 18.22生藥0.45 g/kg 101.26±15.48 7.17

表2 復(fù)方太子參片對(duì)小鼠的止咳作用(±s)

表2 復(fù)方太子參片對(duì)小鼠的止咳作用(±s)

注：與空白對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別 n 劑量 咳嗽潛伏期(s) 咳嗽次數(shù)(次)空白對(duì)照組 10 — 28.6±11.54 50.3±9.81急支糖漿組 10 20 mL/kg 49.5±6.35** 31.2±9.24**復(fù)方太子參片高劑量組 10 生藥1.80 g/kg 55.4±6.93** 28.5±6.39**復(fù)方太子參片中劑量組 10 生藥0.90 g/kg 52.1±8.26** 26.7±5.61**復(fù)方太子參片低劑量組 10 生藥0.45 g/kg 46.3±11.21* 30.5±7.42**

表3 復(fù)方太子參片對(duì)大鼠痰液排泌的影響(±s)

表3 復(fù)方太子參片對(duì)大鼠痰液排泌的影響(±s)

注：與空白對(duì)照組比較，*P＜0.01

組別 n 劑量(g/kg) 痰液量(g)空白對(duì)照組 10 — 0.006 5±0.002 8氯化銨組 10 1.0 0.010 5±0.003 1*復(fù)方太子參片高劑量組 10 生藥1.0 0.012 2±0.004 6*復(fù)方太子參片中劑量組 10 生藥0.5 0.011 7±0.006 5*復(fù)方太子參片低劑量組 10 生藥0.25 0.010 9±0.005 3*

表4 復(fù)方太子參片對(duì)豚鼠平喘作用(±s)

表4 復(fù)方太子參片對(duì)豚鼠平喘作用(±s)

注：與空白對(duì)照組比較，*P＜0.05

組別 n 劑量 哮喘潛伏期(s)空白對(duì)照組 10 — 64.2±36.09急支糖漿組 10 10 mL/kg 118.2±65.21*復(fù)方太子參片高劑量組 10 生藥2.4 g/kg 141.3±95.29*復(fù)方太子參片中劑量組 10 生藥1.2 g/kg 126.7±101.41*復(fù)方太子參片低劑量組 10 生藥0.6 g/kg 101.8±86.24

4 討論

復(fù)方太子參片由太子參、地龍、魚腥草等生藥材組成，其具有止咳平喘、清熱解毒、祛痰等功效，臨床上常用于上呼吸道感染、慢性支氣管炎、慢性支氣管炎急性發(fā)作等。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，復(fù)方太子參片能抑制二甲苯刺激引起的小鼠耳腫脹[10]，說明其對(duì)急性炎癥有較好的抑制作用；對(duì)濃氨水對(duì)呼吸道刺激引起的咳嗽有顯著的抑制作用；能明顯增加大鼠的排痰量；能有效地抑制藥物誘發(fā)的豚鼠哮喘，這些實(shí)驗(yàn)為復(fù)方太子參片的臨床應(yīng)用提供了理論依據(jù)，也為復(fù)方太子參片的進(jìn)一步研究開發(fā)打下了基礎(chǔ)。

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[3]國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局藥品評(píng)審中心.Z GPT2-1中藥、天然藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2005.

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Objective To observe the main pharmacodynamics of compound pseudostellaria heterophylla tablets so as to provide pharmacodynamic basis for its clinical application.Methods Through dimethylbenzene-caused mice auricular swelling experiment to observe the anti-inflammatory action，through mice ammonia-caused coughing experiment to observe the antitussive effect，through rat capillary removing phlegm experiment to observe the phlegm removing effect，through histamine diphosphate-caused guinea pig asthma experiment observe the relieving asthma effect.Results Compound pseudostellaria heterophylla tablets can reduce the swelling degree of dimethylbenzene-caused mice auricular swelling with clear anti-inflammatory action，control 25%of ammonia-caused mice coughing，clearly increase the discharge of rat phlegm amount，and effectively restrain histamine diphosphate-caused guinea pig asthma.Conclusion Compound pseudostellaria heterophylla tablets have the effects of anti-inflammation，cough relieving，phlegm eliminating，and asthma relieving.

Compound pseudostellaria heterophylla tablets；Anti-inflammation；Cough relieving；Phlegm eliminating；Asthma relieving

1005-619X(2013)05-0386-03

2012-12-03)