王麗榮，王俊秋，周立春

(北京市藥品檢驗所抗生素室，北京 100035)

左氧氟沙星為第3代氟喹諾酮類藥物[1]，是氧氟沙星的左旋體，抗菌效力是右旋體的8～128倍，是氧氟沙星的2倍，且不良反應(yīng)明顯小于右旋體，臨床應(yīng)用廣泛[2]。鹽酸左氧氟沙星片劑是目前臨床常用藥品，已被2010年版《中國藥典(一部)》收載[3]，在國內(nèi)、外有多個廠家生產(chǎn)。為考察其質(zhì)量，現(xiàn)選取國內(nèi)、外4個廠家共12批片劑樣品，對其有關(guān)物質(zhì)、溶出度、異構(gòu)體及含量等進行考察并比較。

1 儀器與試藥

島津LC－10A型及LC－20A型高效液相色譜儀(日本島津公司);溶出儀(Hanson公司)。左氧氟沙星對照品(批號為130455－200905，含量為 97.3%)、氧氟沙星對照品(批號為130454－200905，含量為98.8%)均由中國藥品生物制品檢定所提供;左氧氟沙星片(規(guī)格為0.1 g)、鹽酸左氧氟沙星片(規(guī)格為 0.1 g)分別來自 4 個廠家(A，B，C，D)，共 12 個批號(每個廠家 3 個批號，分別以 A1，A2，A3，B1，B2，B3，C1，C2，C3，D1，D2，D3表示);甲醇、乙腈均為色譜純，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 有關(guān)物質(zhì)檢測

取本品片劑10片，研細(xì)，取適量，精密稱定，用流動相溶解并稀釋成每1 mL中約含1.0 mg的溶液，搖勻，作為供試品溶液;精密量取適量，加流動相稀釋成每1 mL中含左氧氟沙星5 μg的溶液，作為對照溶液。照含量測定項下的色譜條件，取對照溶液10 μL注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)儀器的靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的50%，再精密量取對照溶液和供試品溶液各10 μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的3倍。按照外標(biāo)法，以峰面積計算供試品溶液中雜質(zhì)A，B，C(相對于保留時間約為 0.74，1.08，2.57 處)和其他各雜質(zhì)的量，結(jié)果見表1。對4廠家12批樣品有關(guān)物質(zhì)含量結(jié)果進行比較，發(fā)現(xiàn)4個廠的樣品中已知雜質(zhì)均未檢出，而均檢出未知雜質(zhì)。不同廠家之間檢出的未知雜質(zhì)的含量均有所不同。同一廠家不同批號之間有關(guān)物質(zhì)的水平相當(dāng)。這說明不同廠家從合成原料藥到制備制劑，再經(jīng)貯藏、運輸方法有所不同，進而在此期間所產(chǎn)生的有關(guān)物質(zhì)也有所不同，從試驗結(jié)果可以看出A廠家的產(chǎn)品質(zhì)量優(yōu)于其他3個廠家。左氧氟沙星見光不穩(wěn)定，容易產(chǎn)生降解。本次有關(guān)物質(zhì)的測定方法是采用能很好的分離兩個光降解產(chǎn)物的色譜系統(tǒng)(分離度在1.5以上)。以A廠家樣品為例，其有關(guān)物質(zhì)高效液相色譜見圖1。

2.2 溶出度測定

取本品，照溶出度測定法[2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅩC第一法]，以鹽酸溶液(9→1 000)為溶劑，轉(zhuǎn)速為100 r/min，依法操作。經(jīng)45 min時，取溶液適量，濾過，精密量取續(xù)濾液適量，加鹽酸溶液(9→1 000)稀釋成每1 mL約含左氧氟沙星5.5 μg的溶液，作為供試品溶液;另精密稱取左氧氟沙星對照品適量，加鹽酸溶液(9→1 000)溶解并稀釋成每1 mL中約含9 μg的溶液，作為對照品溶液，取上述兩種溶液，照紫外－可見分光光度法(附錄ⅣA)，在294 nm波長處分別測定吸光度，按二者吸光度的比值計算每片的溶出量。結(jié)果見表1。不同廠家的鹽酸左氧氟沙星片的溶出度良好，這表明各廠家在控制制劑溶出度方面十分重視，數(shù)據(jù)之間無顯著性差異。

圖1 A廠家產(chǎn)品的有關(guān)物質(zhì)圖譜

2.3 異構(gòu)體含量測定

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以硫酸銅D－苯丙氨酸溶液(取D－苯丙氨酸1.32 g與硫酸銅1 g，加水1 000 mL溶解后，用氫氧化鈉試液調(diào)pH至3.5)－甲醇(82∶18)為流動相;柱溫40℃;流速為1 mL/min;檢測波長為293 nm。取氧氟沙星適量，用流動相溶解并稀釋成每1 mL中分別約含0.2 mg的溶液，取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。取本品適量，用流動相溶解并稀釋成每1 mL中約含1.0 mg的溶液，作為供試品溶液，精密量取適量，加流動相制成每1 mL中含左氧氟沙星10 μg的溶液，作為對照品溶液。再精密量取對照品溶液和供試品溶液各20 μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計算供試品中左氧氟沙星的含量。結(jié)果見表1。從試驗數(shù)據(jù)來看，A，C廠家的產(chǎn)品好于B，D廠家產(chǎn)品。D廠家光學(xué)異構(gòu)體含量為最高。以D廠家產(chǎn)品為例，異構(gòu)體色譜見圖2。

圖2 D廠家原料藥的異構(gòu)體圖譜

2.4 左氧氟沙星含量測定

用十八烷基硅烷鍵和硅膠為填充劑;以己烷磺酸鈉溶液(取己烷磺酸鈉0.98 g，加磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀6.8 g，加水溶解并稀釋至1 000 mL，加0.05 mol/L磷酸約500 mL，使pH為2.4)－甲醇(3∶1)為流動相;柱溫40℃;流速1 mL/min;檢測波長為293 nm。取左氧氟沙星對照品水溶液(1→1 000)10 mL于一無色試管中，用日光燈(3 500 lx)照射3 h，取該溶液10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，相對于色譜主峰保留時間約為1.1 min和1.2 min處應(yīng)均能檢測出色譜峰。取本品約50 mg，置50 mL量瓶中，加鹽酸溶液(0.03 mol/L)溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5 mL，置另一50 mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，再精密量取10 μL注入色譜儀，記錄色譜圖。另取左氧氟沙星對照品適量，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算出供試品中左氧氟沙星(C18H20FN3O4)的含量。測定結(jié)果見表1。從測定結(jié)果來看，A，B廠家產(chǎn)品含量約為100%，C廠家產(chǎn)品含量測定結(jié)果偏低，D廠家產(chǎn)品含量測定結(jié)果偏高。這可能由系統(tǒng)誤差或廠家投料所致。

表1 各廠家產(chǎn)品指標(biāo)檢測結(jié)果

3 討論

本試驗通過對4廠家12批鹽酸左氧氟沙星片的質(zhì)量比對，所有產(chǎn)品的檢查項均符合2010年版《中國藥典(二部)》的要求，但不同廠家的產(chǎn)品在有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體的含量方面存在較大差異。提示有必要在鹽酸左氧氟沙星片劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中增訂異構(gòu)體檢查項，也提示由左氧氟沙星導(dǎo)致的臨床不良反應(yīng)可能與有關(guān)物質(zhì)和光學(xué)異構(gòu)體有關(guān)。

[1]景士云，張君穎.紫外分光光度法測定鹽酸左氧氟沙星片的含量[J].藥學(xué)進展.2008，32(7):323.

[2]趙環(huán)宇，王 昕，王靚.鹽酸左氧氟沙星注射液質(zhì)量評價[J].中國藥事，2007，21(8):618.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:652.