胡慶梅，彭 紅，程青正

(江西中醫(yī)學(xué)院，江西 南昌 330004)

對(duì)氯苯氧異丁酸甲氧基苯丙烯酸酯(AZ)是經(jīng)結(jié)構(gòu)改造，具有調(diào)血脂作用的全新化合物，其作用機(jī)制是通過(guò)降低極低密度脂蛋白(VLDL)的合成，促使VLDL分解而使甘油三酯減少，從而調(diào)節(jié)血脂[1－5]。筆者采用元素分析、核磁共振、質(zhì)譜以及紅外光譜對(duì)AZ的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了確證[6－9]?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Vario ELⅢ型元素分析儀(德國(guó)EA公司);Varian Cary 5000型紫外/可見(jiàn)/近紅外分光光度計(jì);Avance 400型核磁共振波譜儀(瑞士布魯克公司);Agilent 6460型質(zhì)譜儀;Diamond TG/DTA熱重分析儀;D/max－2500/PC型轉(zhuǎn)靶X射線衍射儀。AZ對(duì)照品(批號(hào)為090806，由江西中醫(yī)學(xué)院藥物化學(xué)學(xué)科組提供)，化學(xué)結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖1;其他試劑均為分析純，水為超純水。

圖1 AZ的化學(xué)結(jié)構(gòu)式

2 方法與結(jié)果

2.1 元素分析

AZ對(duì)照品的元素C及H百分含量與理論值相符，見(jiàn)表1。

表1 AZ對(duì)照品的元素C及H的百分含量(%)

2.2 核磁共振譜(NMR)

2.2.11H 核磁共振譜(1H －NMR)

AZ對(duì)照品在CDCl3溶劑中的1H譜測(cè)定數(shù)據(jù)見(jiàn)表2，1H譜圖見(jiàn)圖 2。根據(jù)二維相關(guān)(COSY)譜(圖 3)，結(jié)合 DEPT譜(圖 4)、異核單量子關(guān)系(HSQC)譜(圖5)、多鍵碳?xì)潢P(guān)系(HMBC)譜(圖6)，可對(duì)AZ對(duì)照品的1H譜進(jìn)行歸屬。

表2 AZ對(duì)照品的1H－NMR數(shù)據(jù)

圖2 核磁共振氫譜(1H－NMR)

圖3 COSY譜

1)氫譜共給出8組氫，各組峰積分比例由低場(chǎng)到高場(chǎng)為1∶1 ∶2 ∶2 ∶3 ∶1 ∶3 ∶6。

2)第1組在HSQC譜中與分子結(jié)構(gòu)中的任何碳均不存在相關(guān)性，因此應(yīng)是分子結(jié)構(gòu)中的活潑質(zhì)子，即δ11.19 ppm為21位質(zhì)子。

圖4 DEPT譜與碳譜

圖6 HMBC譜

3)第2組和第6組峰的積分比例為1∶1，DEPT譜和HSQC譜顯示該兩組峰均與CH類型的碳相連，COSY譜表明該兩組峰與其他質(zhì)子沒(méi)有相關(guān)關(guān)系，但相互之間存在相關(guān)關(guān)系，另外在HMBC譜中，第2組峰除與第6組峰存在相關(guān)關(guān)系以外，還與兩個(gè)CH類型的碳和兩個(gè)季碳存在相關(guān)關(guān)系，第6組峰僅與兩個(gè)季碳存在相關(guān)關(guān)系，因此可以判斷出δ7.79及7.75 ppm是18位質(zhì)子，δ6.45 及 6.41 ppm 為 19 位質(zhì)子。

4)第3組、第4組和第5組峰的積分比例為2∶2∶3，DEPT譜和HSQC譜顯示這3組峰均與CH類型的碳相連，其中第4組峰和第5組峰均與兩個(gè)CH類型的碳存在相關(guān)關(guān)系;在COSY譜中第3組峰和第4組峰分別與第5組存在相關(guān)關(guān)系;另外在HMBC譜中，第3組峰與2個(gè)季碳存在相關(guān)關(guān)系，第4組峰與4個(gè)CH類型的碳和2個(gè)季碳存在相關(guān)，且其中1個(gè)CH為18位的碳;第5組峰與2個(gè)CH類型的碳和5個(gè)季碳存在相關(guān)關(guān)系，因此 δ7.28 及 7.26 ppm 是 2 位、6 位質(zhì)子，δ7.18 及 7.15 ppm 是13位、16位質(zhì)子，δ7.02－6.99 ppm 是 3位、5和 15位質(zhì)子。

5)DEPT譜和COSY譜顯示第7組和第8組峰均是與CH3類型的碳相連，HMBC譜顯示第7組峰僅與1個(gè)季碳存在相關(guān)關(guān)系，第8組峰與2個(gè)季碳存在相關(guān)關(guān)系，因此δ3.87 ppm是17位質(zhì)子，δ1.77ppm 是 8位、9位的質(zhì)子。

2.2.213C 核磁共振譜(13C －NMR)

AZ對(duì)照品在CDCl3溶劑中的13C譜測(cè)定數(shù)據(jù)見(jiàn)表3。碳譜中給出17組峰，圖3中的DEPT90譜和DEPT135譜說(shuō)明有7個(gè)CH和2個(gè)CH3存在，其余均為季碳。

表3 AZ對(duì)照品的13C譜測(cè)定數(shù)據(jù)

1)分子的結(jié)構(gòu)中有7個(gè)CH存在，根據(jù)氫譜分析結(jié)果，可知δ146.24 ppm 是 18 位碳，δ129.12 ppm 是 2 位、6 位碳，δ122.99 ppm是 15 位碳，δ121.63 ppm 是 16 位碳，δ120.87 ppm 是 3 位、5 位碳，δ117.71 ppm 是 19 位碳，δ111.48 ppm 是 13 位碳。

2)DEPT135圖譜顯示結(jié)構(gòu)中有2個(gè)CH3，即δ55.89 ppm是17位碳，δ25.47 ppm 為 8 位、9 位碳。

3)比較13C譜和DEPT135譜，可發(fā)現(xiàn)該分子結(jié)構(gòu)中有8個(gè)季碳，HMBC 譜顯示，δ172.24 ppm 和 δ79.53ppm 均與 8 位、9 位質(zhì)子存在相關(guān)關(guān)系，比較與此2個(gè)質(zhì)子存在相關(guān)季碳的化學(xué)環(huán)境可判斷出，δ172.24 ppm 應(yīng)是 10 位季碳，δ79.53 ppm 應(yīng)是 7位季碳;δ171.97 ppm與18位、19位質(zhì)子存在相關(guān)關(guān)系，應(yīng)是20位季碳;δ153.93 ppm與2位、6位質(zhì)子存在相關(guān)關(guān)系，因此應(yīng)屬于1位季碳;δ151.45 ppm與13位、16位質(zhì)子存在相關(guān)關(guān)系，應(yīng)是12位季碳;δ141.54 ppm與13位、15位、16位的質(zhì)子存在相關(guān)關(guān)系，應(yīng)是11位季碳;δ133.29 ppm與15位、18位、19位的質(zhì)子存在相關(guān)關(guān)系，應(yīng)是 14位季碳;δ127.51 ppm 與 2位、3位、5位、6位的質(zhì)子存在相關(guān)關(guān)系，應(yīng)是4位季碳。

綜上所述，NMR給出的信息與結(jié)構(gòu)式相符。

2.3 質(zhì)譜

離子化方式為ESI(－)。質(zhì)譜測(cè)得本品的分子離子峰[M－H]－，其質(zhì)荷比 m/z為 389.05，與 AZ的相對(duì)分子質(zhì)量(分子式C20H19ClO6，相對(duì)分子質(zhì)量為390.814)一致。

2.4 紫外光譜分析

在甲醇溶液中，λmax275為取代苯環(huán)的大共軛體系的π→π＊躍遷特征吸收，λmax224為取代苯環(huán)的K帶特征吸收。

2.5 紅外光譜(IR)分析

儀器校正:用聚苯乙烯薄膜的紅外光譜吸收峰對(duì)儀器波數(shù)進(jìn)行校正[參考2010年版《中國(guó)藥典(第二部)》附錄ⅣC]，符合規(guī)定。方法為KBr壓片法。AZ對(duì)照品的IR譜各吸收峰歸屬見(jiàn)表4。

表4 AZ的IR譜數(shù)據(jù)及歸屬

3 討論

元素分析結(jié)果表明，AZ對(duì)照品的組成與C20H19ClO6相符，測(cè)量不確定度在允許范圍內(nèi)。氫譜顯示，共8組氫，各組峰積分比例由低場(chǎng)到高場(chǎng)為 1∶1∶2∶2∶3∶1∶3∶6。AZ分子結(jié)構(gòu)中有 20個(gè)碳，本品的13C譜顯示有17組碳峰;DEPT譜顯示結(jié)構(gòu)中有2個(gè)CH3，即 δ55.89 ppm 是 17 位碳，δ25.47 ppm 為 8 位、9 位碳;結(jié)合氫譜分析可知，δ129.12 ppm 是 2 位、6 位碳，δ120.87 ppm 是 3位、5位碳。質(zhì)譜測(cè)得本品的分子離子峰[M－H]－，其質(zhì)荷比 m/z為389.05，與AZ的相對(duì)分子質(zhì)量一致。經(jīng)紅外光譜驗(yàn)證，與AZ的分子結(jié)構(gòu)相符。

本研究采用薄層色譜法和高效液相色譜法對(duì)AZ的純度進(jìn)行檢查。采用硅膠G薄層板，分別選用甲醇－氯仿(20∶20)，甲醇－乙酸乙酯(20∶30)為展開劑展開，置紫外燈365 nm下檢視。結(jié)果表明，AZ對(duì)照品在兩個(gè)展開條件下均能顯示1個(gè)斑點(diǎn)，所含成分單一，無(wú)雜質(zhì)。通過(guò)高效液相色譜法，經(jīng)面積歸一法計(jì)算，對(duì)照品含量為100%，可以作為對(duì)照品使用。

[1]梁 藝，唐建華，黃學(xué)成，等.冠心病患者降脂藥物的有效應(yīng)用研究[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2009(16):88.

[2]王汝濤，周四元，張 峰.阿魏酸乙酯減輕四氯化碳致小鼠急性肝損傷[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2004，20(10):1 196.

[3]王汝濤，周四元，張 峰.阿魏酸乙酯的藥理活性及其機(jī)制研究[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2004，9(8):925－765.

[4]Nightingale CH.A survey of the quality of genericclarithromycin products from 13 countries[J].Clin DrugInvest，2000，19(4):293.

[5]Wetterich U，Mutschler E.Quality of cefotaxime soditim preparations[J].ArzneimForsch/DrugRes，1995，45(1):74.

[6]辛玉峰，曲曉華.鹽酸頭孢唑蘭的結(jié)構(gòu)確證[J].藥物分析雜志，2011，31(3):433 －437.

[7]寧黎麗.化學(xué)原料藥結(jié)構(gòu)確證的研究思路和方法[J].中國(guó)新藥雜志，2008，17(18):1 637 －1 639.

[8]涂國(guó)剛，熊 芳，麥 曦，等.奈韋拉平的波譜特征和結(jié)構(gòu)確證[J].藥品評(píng)價(jià) 2008，5(5):213－215.

[9]陳 王月，李劍峰，韋亞兵，等.新藥鹽酸洛美利嗪的波譜特征與結(jié)構(gòu)確證[J].波譜學(xué)雜志，2006，3(23):341 －348.