高梅玲 (鶴壁市人民醫(yī)院檢驗科，河南 鶴壁 458000)

內(nèi)分泌、神經(jīng)和免疫系統(tǒng)之間具有密切關(guān)系。皮質(zhì)醇對免疫功能的影響比較清楚，誘導(dǎo)免疫抑制，降低細(xì)胞和體液免疫應(yīng)答〔1〕。褪黑素能夠影響許多內(nèi)分泌腺功能，對免疫系統(tǒng)功能具有調(diào)節(jié)作用〔2，3〕。垂體激素直接刺激輔助T淋巴細(xì)胞活動，通過嗎啡樣肽〔4〕和非甲狀腺激素依賴途徑發(fā)揮作用。甲狀腺激素(TRH)和TSH、胰島素樣生長因子(IGF1)是許多腫瘤細(xì)胞株強(qiáng)有力的促細(xì)胞分裂劑，IGF1受體的刺激是多數(shù)細(xì)胞增生的必要條件〔5〕。近期研究表明生長激素(GH)和IGF1對于刺激淋巴細(xì)胞生成和功能有重要作用〔6〕。激素水平以及各種淋巴細(xì)胞亞群異?？梢娪诙喾N腫瘤性疾病〔7〕。本研究探討肺癌患者淋巴細(xì)胞亞群和神經(jīng)內(nèi)分泌激素的變化。

1 資料與方法

1.1 對象 10例男性健康成人，年齡45～67〔平均(57.2±2.7)〕歲，作為對照組，10例男性非小細(xì)胞肺癌患者，年齡46～64〔平均(56.6±0.2)〕歲，為實驗組。對照組入組條件:男性、年齡＜80歲、BMI(＞25 kg/m2，＜30 kg/m2)正常生理活動、無心理與精神障礙、無酒精嗜好、無慢性疾病、血壓正常。所有受試對象的健康狀態(tài)進(jìn)行體格檢查評定，進(jìn)行基礎(chǔ)血液和尿液檢查、ECG、胸片、腹部超聲波檢查。肺癌患者入選標(biāo)準(zhǔn):男性、年齡＜80歲、BMI(＞25 mg/m2，＜30 mg/m2)、正常生理活動、無心理精神疾病、無酒類嗜好、功能狀態(tài)＞80%(Karnofsky功能狀態(tài)標(biāo)準(zhǔn))或ECOG計分＜2分、無慢性疾病、正常血壓水平、非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)、經(jīng)臨床檢查，支氣管活檢、CT檢查確診。其中包括3例鱗狀上皮細(xì)胞癌和7例腺癌。病理學(xué)診斷依據(jù)光學(xué)顯微鏡WHO分級標(biāo)準(zhǔn)。腫瘤分期按照TNM分級標(biāo)準(zhǔn)，T1期3例、T2期5例、T3-4期2例。10例患者均有區(qū)域性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期分別為2、5和3例。

1.2 方法 所有受試對象均在相同時間采集樣本，即早7:00和晚10:00。每一血樣本檢測褪黑素、TRH、TSH、GH、IGF-1和IL-2。血液標(biāo)本離心并保存于－20°C待測。用放免分析測定褪黑素水平，免疫熒光分析皮質(zhì)醇水平。TRH采用放射免疫分析方法，TSH、FT4采用免疫酶促分析，IGF-1采用放射性同位素分析，IL-2采用免疫酶促分析。淋巴細(xì)胞亞群檢測CD3，CD4，CD8。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行描述性分析、單因素方差分析、t檢驗和Mann-Whitney隊列總和檢驗。

2 結(jié)果

健康對照組ANOVA顯示皮質(zhì)醇、褪黑素、TRH、TSH、GH、CD3、CD4、CD8、CD16 具有明顯的周期性節(jié)律:褪黑素，TRH，TSH，GH，CD3(T 細(xì)胞)，CD4(T 輔助/誘導(dǎo))，HLA-DR(B 細(xì)胞和活化T細(xì)胞)，CD20(B細(xì)胞)和CD25(T活化淋巴細(xì)胞)呈現(xiàn)日夜間周期性節(jié)律。FT4，IGF-1和IL-2未顯示出周期性節(jié)律。肺癌患者ANOVA顯示皮質(zhì)醇、褪黑素、TSH、CD4、CD16、CD25和IL-2受時間影響。皮質(zhì)醇、TRH、TSH和GH水平以及淋巴細(xì)胞亞群變化(CD4除外)均失去其周期性節(jié)律。皮質(zhì)醇、TRH、GH、IL-2和 CD16顯著增加，而 TSH，IGF-1，的 MESOR 顯著下降。對日間均值比較顯示，腫瘤患者GH(P＜0.001)和CD16(P＜0.01)水平上升，IGF1(P＜ 0.001)、CD8(P=0.03)水平降低。夜間均值比較顯示，皮質(zhì)醇(P=0.02)，TRH(P=0.03)，GH(P ＜0.01)，CD16(P ＜0.000 1)及 CD25(P=0.03)水平，肺癌患者高于健康對照組。褪黑素(P=0.04)、TSH(P=0.02)、IGF-1(P ＜0.000 1)、CD8(P=0.01)、CD20(P=0.03)，肺癌患者低于健康對照組。褪黑素/皮質(zhì)醇比值降低(P=0.01)。見表1。

表1 兩組患者的激素及淋巴細(xì)胞比較(±s，n=10)

表1 兩組患者的激素及淋巴細(xì)胞比較(±s，n=10)

組別 褪黑素(pg/ml)TRH(mIU/L)TSH(mIU/L)GH(ng/ml)00 4.26±0.53 6.08±0.94 4.33±0.34 3.47±0.58 22:00 6.48±0.66 5.08±0.87 1.01±0.88 3.35±0.47對照組 7:00 5.52±0.89 4.34±0.86 5.15±0.94 4.25±0.40 22:00 20.47±8.49 1.29±0.34 2.78±0.84 2.24±0.25組別 IFG1(pg/ml)IL-2(kU/L) CD3(%) CD16(%)肺癌組 7:肺癌組 7:00 2.26±0.53 16.72±4.21 3.46±1.65 13.42±0.53 22:00 3.48±0.61 20.12±3.91 4.11±0.83 11.35±0.46對照組 7:00 5.52±0.89 7.11±1.83 6.98±1.74 8.21±0.40 22:00 1.41±0.41 6.29±0.34 5.78±0.85 6.24±0.25組別 CD8(%) CD20(%) CD4(%) CD25(%)00 2.21±0.52 6.72±1.24 3.47±1.63 5.42±0.56 22:00 3.11±0.34 5.12±1.94 3.55±0.86 4.56±0.45對照組 7:00 3.55±0.89 7.34±1.82 4.91±1.74 3.21±0.45 22:肺癌組 7:00 5.41±0.47 6.64±1.34 4.78±0.84 3.24±0.55

3 討論

本研究資料顯示，肺癌患者皮質(zhì)醇、TRH、TSH和GH分泌發(fā)生改變并呈現(xiàn)節(jié)律性喪失。皮質(zhì)醇分泌的節(jié)律性喪失是高皮質(zhì)醇癥的特征，伴有夜間褪黒素減低，表現(xiàn)為褪黒素/皮質(zhì)醇比值降低。皮質(zhì)醇分泌形式變化(節(jié)律性喪失及增加分泌量)，與降低的夜間褪黒素水平一起，可能是神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)紊亂標(biāo)志。皮質(zhì)醇血清水平變化的生物節(jié)律喪失可由中樞神經(jīng)系統(tǒng)對皮質(zhì)醇調(diào)節(jié)機(jī)制改變引發(fā)，也可能涉及褪黒素分泌形式的雙重關(guān)系。松果體影響下丘腦-腦垂體-腎上腺軸的功能，褪黒素調(diào)節(jié)皮質(zhì)類固醇受體，腎上腺皮質(zhì)類固醇調(diào)整松果體褪黒素合成〔8〕。有研究表明，松果體功能在應(yīng)用地塞米松后或改變皮質(zhì)醇分泌形式的病人發(fā)生顯著損害。褪黒素/皮質(zhì)醇比值根據(jù)平均血清泉水平或夜間尿皮質(zhì)醇和褪黒素(或代謝物6-羥-褪黒素-硫酸鹽)檢測計算，對于篩查一般人群中的癌癥病人可能是有用且可行的方法。褪黒素對男性和女性性腺類固醇的分泌有不同的影響。

本研究中，癌癥患者GH血清水平增高，但晝夜節(jié)律性喪失，GH分泌和IGF-1分泌二者間的血清水平呈現(xiàn)不平衡關(guān)系。GH不足病人采取不同的治療時間對IGF-1血清水平效果有差異，與正常激素和代謝形式極為相似，晚間給予GH效果最佳。納入研究的所有病人均為正常范圍的BMI，癌癥患者呈現(xiàn)低水平的血清IGF-1顯然與營養(yǎng)狀態(tài)無關(guān)，這類病人存在神經(jīng)內(nèi)分泌軸整體性紊亂，因此導(dǎo)致TRH水平增加和TSH水平下降。一個重要原因可能是時間構(gòu)成發(fā)生了變化，GH和TRH分泌呈現(xiàn)時間上的紊亂，但也可能與激素抵抗有關(guān)，IL-2血清水平在肺癌患者增加，可能是由于免疫活性改變或是由于其他的細(xì)胞/化學(xué)因子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)所致〔9〕。肺癌病人TRH/TSH軸和GH/IGF-1軸的改變可甬由于炎癥性細(xì)胞因子介導(dǎo)。細(xì)胞培養(yǎng)和動物實驗證據(jù)表明，白介素-1(IL-1)和腫瘤壞死因子-α(TNFα)能夠引起GH抵抗。增加的循環(huán)性水平的炎癥因子和(或)增加的周圍血單核細(xì)胞在肺癌病人中亦有報道。在肺癌病人中存在GH抵抗對肝臟IGF-1生成刺激影響，炎癥因子的作用可能是由復(fù)雜的旁泌系統(tǒng)所介導(dǎo)而非單純的內(nèi)分泌途徑。

神經(jīng)內(nèi)分泌免疫系統(tǒng)功能有復(fù)雜的時間結(jié)構(gòu)形式，由多種節(jié)律形式組成，存在不同的頻率范圍。本研究發(fā)現(xiàn)，肺癌患者的淋巴細(xì)胞亞群中的CD8細(xì)胞和T抑制細(xì)胞亞群減少，T抑制性細(xì)胞亞群減少也可見于其他種類的腫瘤患者，可能是免疫受損的標(biāo)志。本研究中，自然殺傷細(xì)胞增加，而T細(xì)胞受體1δ鏈可變域和恒定載的表達(dá)增強(qiáng)是重要的發(fā)現(xiàn)，因為γδTCR復(fù)合物是細(xì)胞表面和細(xì)胞毒淋巴細(xì)胞的主要表達(dá)標(biāo)記，涉及T細(xì)胞活化和活化γδ表達(dá)細(xì)胞，這些細(xì)胞通常顯示細(xì)胞毒活性，可針對多種細(xì)胞株，也包括腫瘤細(xì)胞在內(nèi)。

本研究發(fā)現(xiàn)，肺癌患者存在下丘腦(TRH)和腦垂體(GH，TSH)、松果體(褪黒素)、腎上腺(皮質(zhì)醇)內(nèi)分泌結(jié)果結(jié)構(gòu)和血清水平的改變，可能是由于神經(jīng)、內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)之間的相互作用改變所致。肺癌患者生理節(jié)律性喪失還表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞亞群特別是CD4的變化。這一現(xiàn)象可損害 有效的免疫反應(yīng)，可能與改變的激素血清水平以及自然生理節(jié)律性改變有關(guān)，這些改變可引起神經(jīng)/內(nèi)分泌結(jié)構(gòu)和免疫效應(yīng)器之間相互作用的生理時間窗的改變，也需要考慮到免疫細(xì)胞與激素結(jié)合位點(diǎn)和激素生成能力等。CD8數(shù)量降低以及周圍血γδTCR表達(dá)細(xì)胞降低可能象征著免疫異常。

總之，本研究結(jié)果提示肺癌患者存在激素分泌紊亂和淋巴細(xì)胞亞群比值及生理節(jié)律異常，可能是神經(jīng)、內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)間完整性破壞，而這些變化可能先于腫瘤進(jìn)展。這些系統(tǒng)具有天然生理性節(jié)律形式，從而維持內(nèi)部穩(wěn)定性，而這些節(jié)律性喪失可能會引發(fā)腫瘤病變的起始和進(jìn)展。

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