尼瑪才讓 賽桑杰 多杰拉旦

（青海省藏醫(yī)藥研究院，青海 西寧 810007）

藏藥復(fù)方“瑪諾西湯”始載于藏醫(yī)現(xiàn)存最早的典籍《月王藥珍》，根據(jù)《四部醫(yī)典》記載：藏木香、紫色懸鉤子、寬筋藤、野姜4味共研煎湯內(nèi)服，可促使瘟熱成熟，能除灰津癥、紫津癥、空虛熱、血刺痛等癥。公元15世紀(jì)藏醫(yī)南派創(chuàng)始人蘇喀巴·年尼多杰對“瑪諾西湯”進行多年潛心研究，在“瑪諾西湯”方子的基礎(chǔ)上添加不同藥材，演變成百余種藏藥瑪諾系列制劑，可治療腎病、肝膽病、肺病、心臟病等五臟病和腸胃病、心腦血管病、風(fēng)濕病、血隆病等。因此，在藏藥方子中此方具有重要的地位和價值,被稱為“瑪努輪王”。該研究成果匯入其藏醫(yī)名著《千萬舍利》，至今仍在應(yīng)用，療效確切，已有百年的應(yīng)用歷史。

復(fù)方瑪諾西湯顆粒是臨床經(jīng)驗方，由藏木香、懸鉤木、寬筋藤、干姜等4味藥材組成，主治瘟病初期，流感初期，惡寒頭痛，關(guān)節(jié)酸痛，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，發(fā)燒等，療效肯定。本研究以君藥藏木香中土木香內(nèi)酯的含量為指標(biāo)，采用正交設(shè)計考察了復(fù)方瑪諾系湯顆粒水煎煮工藝條件；并對濃縮干燥的溫度及方法進行了考察。

1 儀器與藥品

島津LC-20AT高效液相色譜儀，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，甲醇、乙腈、0.1%磷酸溶液、雙蒸餾水；土木香內(nèi)酯對照品，由衛(wèi)生部藥品生物制品檢定所提供。GLP-21型噴霧設(shè)備。

2 實驗方法與結(jié)果

2.1 高效液相色譜條件色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-0.1%磷酸溶液(10：6:9)為流動相；檢測波長為194nm；流速1.0ml/min。

2.2 藏木香生藥中土木香內(nèi)酯的含量測定：精密稱取藏木香細粉 0.5g，加 20ml水回流提取 1.5h，濾過，取續(xù)濾液為供試品溶液，HPLC測定，結(jié)果土木香內(nèi)酯生藥中土木香內(nèi)酯的含量為0.32%，以下試驗中的藏木香均用本批樣品。

2.3 水煎條件的優(yōu)選：按處方比例稱取各味中藥每份56g，共9份，按正交設(shè)計表進行實驗。得 9份水煎液，分別濾過，加水定容至一定體積，按含量測定方法測定水溶液中的土木香內(nèi)酯含量，計算土木香內(nèi)酯的轉(zhuǎn)移率(藏木香生藥中土木香內(nèi)酯的含量以0.32%計，以下同)。試驗安排及結(jié)果見表1-2。

表1 水煎提取正交設(shè)計因素

極差結(jié)果表明，C因素(煎煮次數(shù))為主要影響因素；方差分析結(jié)果表明，A、C因素3個水平間有顯著性差異，應(yīng)選 A3、C3，由于 C因素 K2與 K3比較接近，考慮到大生產(chǎn)成本，應(yīng)選 C2，B因素3個水平間無顯著性差異，可任選，應(yīng)選Bl。最佳提取工藝為A3B1C2。即加12倍量水，煎煮 2次，每次 1h。

按優(yōu)選工藝(A3B1C2)加12倍量水，煎煮2次，每次1h重復(fù)實驗1次(生藥量相同)，土木香內(nèi)酯的轉(zhuǎn)移率為72.0l%與A3B1C2相近。

2.4 濃縮、干燥方法的考察

2.4.1 常壓水浴濃縮、真空干燥：以上正交樣品常壓水浴濃縮6～12h至稠膏基本無流動性(60℃相對密度為1.35以上)，真空干燥24h，干膏粉碎，過 80目篩，取約0.2g，精密稱重，用 20 mL甲醇：0.5% 甲酸 95：5)超聲20min溶解，按含量測定方法測定土木香內(nèi)酯含量，計算轉(zhuǎn)移率，結(jié)果表明，以上述條件濃縮干燥，水煎液中45%～97% 的土木香內(nèi)酯受熱破壞。見表3。

表2 正交實驗安排與結(jié)果

表3 常壓水浴濃縮,真空干燥對土木香內(nèi)酯轉(zhuǎn)移率的影響

2.4.2 濃縮對阿魏酸含量的影響：正交A3B1C2提取條件制備的水煎液，分別75℃=以下減壓濃縮 1.5h、水浴(100℃)濃縮 2h、水浴(100℃)加熱 4h、水浴(100℃)加熱8h，測定土木香內(nèi)酯含量，計算轉(zhuǎn)移率，結(jié)果減壓濃縮明顯優(yōu)于常壓濃縮，水浴(100℃)加熱時間延長，土木香內(nèi)酯轉(zhuǎn)移率降低。見表4。

2.4.3 干燥對土木香內(nèi)酯含量的影響：正交A3B1C2提取條件制備的水煎液，減壓濃縮至清膏，醇沉除雜，減壓回收乙醇至相對密度約1.10～1.14的清膏(60℃)。分別噴霧干燥 (進口溫度：150～170℃，出口溫度 75～85℃)，60℃真空干燥4h，結(jié)果表明噴霧干燥對土木香內(nèi)酯無破壞，60℃真空干燥4h對土木香內(nèi)酯有明顯破壞，見表5。

表4 濃縮對土木香內(nèi)酯轉(zhuǎn)移率的影響

表5 減壓濃縮，真空干燥、噴霧干燥對土木香內(nèi)酯轉(zhuǎn)移率的影響

3 討 論

藏木香藥材含測時，分別用甲醇：0.5%甲酸(95：5)、50%甲醇超聲提取，測得的土木香內(nèi)酯含量較低(0.094%，0.128%)，后改用水回流 1.5h，測得的土木香內(nèi)酯含量為0.32% ，故藏木香藥材土木香內(nèi)酯含量按0.32%計。

土木香內(nèi)酯的轉(zhuǎn)移率＝樣品中土木香內(nèi)酯得量/樣品中藏木香用量×0.32%

復(fù)方瑪諾系湯顆粒中藏木香為君藥，土木香內(nèi)酯含量為質(zhì)量控制指標(biāo)，水煎液濃縮受熱溫度、時間對土木香內(nèi)酯含量有一定影響，應(yīng)采用減壓濃縮。干燥方式對阿魏酸的影響非常大，采用常壓濃縮干燥土木香內(nèi)酯損失率可達97%，噴霧干燥為瞬間干燥，明顯優(yōu)于真空干燥，土木香內(nèi)酯基本未損失，經(jīng)減壓濃縮、乙醇除雜，噴霧干燥等工藝制備的顆粒劑土木香內(nèi)酯的轉(zhuǎn)移率可達到122%。

[1]和尚馬哈亞那,畢如札那.月王藥珍(藏文)[M].北京：民族出版社,2006.

[2]宇妥·云丹貢布.扎塘版四部醫(yī)典(藏文)[M].北京：民族出版社,2005.

[3]蘇喀巴·年尼多杰.千萬舍利子(藏文)[M].北京：民族出版社,2005.

[4]陳曉紅.GC法測定不同產(chǎn)地藏木香藥材中異土木香內(nèi)酯含量[J].青海醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2009,30.1.