吳秀萍 謝源福 楊樂(lè)藝 吳雄 王增燕

乳腺癌患者中Ki-67蛋白的表達(dá)及其意義

吳秀萍 謝源福 楊樂(lè)藝 吳雄 王增燕

目的 檢測(cè)Ki-67蛋白在乳腺癌組織中的表達(dá), 及其與乳腺癌腫瘤病理核分裂像計(jì)數(shù)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床病理學(xué)指標(biāo)間的關(guān)系。方法 采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)乳腺癌組織中Ki-67蛋白的表達(dá), 分析陽(yáng)性表達(dá)與乳腺癌病理核分裂像計(jì)數(shù)、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、雌激素受體(ER)和孕激素受體(PR)、人表皮生長(zhǎng)因子受體-2(HER-2)表達(dá)之間的關(guān)系。結(jié)果 Ki-67蛋白在乳腺癌病理核分裂像計(jì)數(shù)的表達(dá)與惡性程度具有顯著的相關(guān)性；Ki-67蛋白在ER和PR陽(yáng)性組中表達(dá)顯著低于ER和PR陰性組, 而在HER-2陽(yáng)性組中表達(dá)顯著高于HER-2陰性組。結(jié)論 Ki-67可作為判斷乳腺癌患者預(yù)后及療效的重要標(biāo)志物, 同時(shí)聯(lián)合檢測(cè)Ki-67和其他乳腺癌病理學(xué)指標(biāo)有助于了解乳腺癌生物學(xué)行為, 為治療和預(yù)后提供思路。

乳腺癌；Ki-67蛋白；病理核分裂像計(jì)數(shù)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；ER；PR；HER-2

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤, 近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn), 已知雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)和人類表皮生長(zhǎng)因子受體-2(HER-2)均于乳腺癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。Ki67的發(fā)現(xiàn), 被認(rèn)為是能夠有效評(píng)估腫瘤細(xì)胞增殖活性的重要標(biāo)志物。本科針對(duì)Ki-67與乳腺癌腫瘤病理分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床病理學(xué)指標(biāo)(ER、PR、HER-2)之間的關(guān)系開展了研究,報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2011年1月至2013年3月手術(shù)切除的乳腺癌組織標(biāo)本300例, 均為女性, 患者年齡32~81歲,平均(44.9±3.7)歲。所有患者均經(jīng)術(shù)后病理組織學(xué)確診乳腺癌, 且術(shù)前未經(jīng)過(guò)放療、化療等輔助治療。腋窩淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移者94例, 無(wú)轉(zhuǎn)移者206例。

1.2 病理核分裂像計(jì)數(shù)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 所有病理組織的核分裂像計(jì)數(shù)參照Bloom-Richardson系統(tǒng)的Nottingham改良方案,計(jì)算出在乳腺組織細(xì)胞生長(zhǎng)活躍密集區(qū)域隨機(jī)挑選20個(gè)高倍視野(×400), 計(jì)算每10個(gè)高倍視野(10HPF)中的細(xì)胞核分裂像數(shù), 0~1個(gè)/10HPF：1分；2~3個(gè)/10HPF：2分；>3個(gè)/HPF：3分, 分?jǐn)?shù)越高, 表示癌細(xì)胞惡性程度越高［1］。本研究中, 1分有13例, 為低度惡性組；2分有188例, 為中度惡性組；3分有99例, 為高度惡性組。

1.3 Ki-67、ER、PR和HER-2測(cè)定方法 所有乳腺癌病理學(xué)指標(biāo)均采用免疫組織化學(xué)染色方法進(jìn)行測(cè)定：石蠟包埋組織塊切片后脫蠟至水, DAB染色后用蘇木精復(fù)染, 封固采用中性樹膠。陰性對(duì)照采用PBS緩沖液替代一抗。Ki-67蛋白的測(cè)定采用相對(duì)定量法, 選取陽(yáng)性信號(hào)最強(qiáng)區(qū)域(×400)計(jì)數(shù)200個(gè)腫瘤細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目, 同時(shí)計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞占200個(gè)細(xì)胞比例。ER和PR陽(yáng)性：癌細(xì)胞核陽(yáng)性細(xì)胞>1%；HER-2陽(yáng)性：浸潤(rùn)性癌細(xì)胞膜強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞>30%［1］。其中ER陽(yáng)性組192例, 陰性組108例；PR陽(yáng)性組162例, 陰性組138例；HER-2陽(yáng)性組60例, 陰性組240例。

1.4 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器 所有試劑盒、免疫組織化學(xué)染色試劑及Ki-67、ER、PR和HER-2的一抗、二抗均購(gòu)自北京中山生物技術(shù)有限公司。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 SPSS 13.0軟件分析, 計(jì)量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用百分比表示, P＞0.05, 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義, P＜0.05, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Ki-67蛋白表達(dá)與病理組織的核分裂像計(jì)數(shù)關(guān)系 Ki-67蛋白表達(dá)與病理組織的核分裂像計(jì)數(shù)關(guān)系, 見表1。

2.2 Ki-67蛋白表達(dá)與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系 Ki-67蛋白表達(dá)與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系, 見表2。

2.3 Ki-67蛋白表達(dá)與ER、PR和HER-2表達(dá)之間的關(guān)系Ki-67蛋白表達(dá)與ER、PR和HER-2表達(dá)之間的關(guān)系, 見表3。

表1 Ki-67蛋白表達(dá)與病理組織的核分裂像計(jì)數(shù)關(guān)系( x-±s)

表2 Ki-67蛋白表達(dá)與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系( x-±s)

表3 Ki-67蛋白表達(dá)與ER、PR和HER-2表達(dá)之間的關(guān)系( x-±s)

3 討論

3.1 Ki-67蛋白與乳腺癌組織學(xué)的相關(guān)性 Ki-67抗原只與增生細(xì)胞核反應(yīng), 無(wú)組織特異性, 在各類惡性腫瘤組織中, Ki-67的表達(dá)都遠(yuǎn)高于正常組織, 可以由此有效評(píng)估細(xì)胞增殖水平。早在1983年, Ki-67就因其僅和增生的細(xì)胞核反應(yīng),具有操作簡(jiǎn)單、特異性強(qiáng)的特點(diǎn), 成為了病理科免疫組化染色的常用增殖細(xì)胞免疫標(biāo)記之一［2］。已有較多研究顯示：Ki-67的表達(dá)和乳腺癌的病理學(xué)分級(jí)和臨床分期, 包括淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。值得注意的是, Ki-67在正常乳腺組織和乳腺上皮細(xì)胞纖維腺瘤中的表達(dá)水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于乳腺癌細(xì)胞,陽(yáng)性率<3%；且Ki- 67陽(yáng)性的乳腺癌患者比陰性患者預(yù)后差,提示Ki-67。有可能成為未來(lái)乳腺癌分型的指標(biāo)。

3.2 Ki-67蛋白與ER、PR、HER-2乳腺癌病理學(xué)指標(biāo)的關(guān)系 雌、孕激素與乳腺癌發(fā)病與轉(zhuǎn)歸密切相關(guān), 一般來(lái)說(shuō), ER和PR陽(yáng)性的乳腺癌分化程度高、惡性度較低、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移慢、預(yù)后較好, 這可能與ER、PR陽(yáng)性的乳腺癌患者對(duì)于內(nèi)分泌治療較ER、PR陰性患者更加敏感有關(guān)［3］。且目前多數(shù)研究認(rèn)為Ki-67蛋白的表達(dá)和ER及PR呈負(fù)相關(guān), ER、PR表達(dá)陰性者的Ki-67指數(shù)顯著高于陽(yáng)性者, 這與Ki-67蛋白表達(dá)水平較高的乳腺癌患者預(yù)后較差是一致的［4］。

HER-2屬于表皮生長(zhǎng)因子受體家族中的一員, 定位于17號(hào)染色體長(zhǎng)臂2區(qū)1帶, 平時(shí)靜止?fàn)顟B(tài)時(shí)調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和分化；當(dāng)遭到激活時(shí), 具備腫瘤轉(zhuǎn)化的特性, 其過(guò)量表達(dá)提示乳腺癌惡性程度高, 對(duì)于內(nèi)分泌治療效果較差, 生存期較短, 預(yù)后不佳, 被認(rèn)為是預(yù)測(cè)乳腺癌預(yù)后重要的生物學(xué)因子。多數(shù)研究顯示HER-2表達(dá)與Ki-67呈正相關(guān), 提示可以利用它們作為預(yù)測(cè)化療和內(nèi)分泌治療療效的重要敏感性指標(biāo)。具體為：HER-2蛋白和Ki67蛋白表達(dá)下降越明顯,則化療和內(nèi)分泌治療的療效就越肯定［5］。

在作者對(duì)于Ki-67蛋白在乳腺癌組織中的表達(dá)情況的研究中, 發(fā)現(xiàn)①Ki-67蛋白在病理組織分型趨向惡性、淋巴結(jié)存在轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者組織中表達(dá)更高, 說(shuō)明Ki-67可以用于乳腺癌患者的疾病評(píng)估和預(yù)后分析；②Ki-67與ER、PR呈負(fù)相關(guān), 與HER-2呈正相關(guān), 提示Ki-67可以和ER、PR、HER-2共同作為乳腺癌臨床病理學(xué)指標(biāo)來(lái)預(yù)測(cè)患者對(duì)于化療和內(nèi)分泌治療的療效, 為患者術(shù)后進(jìn)一步治療提供參考。

［1］ 邢家亮.Ki-67表達(dá)與乳腺癌臨床病理學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性分析.山東大學(xué), 2012.

［2］ 劉毅, 張洪蘭, 陳昊, 等.新輔助化療對(duì)乳腺癌患者Ki-67、ER、Her-2和 p53的影響及意義.中國(guó)腫瘤外科雜志, 2012, 4(6): 348-351.

［3］ 吳秀平,杜毅力,曹永政, 等.探討超聲彈性成像參數(shù)與乳腺癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Ki-67表達(dá)的相關(guān)性.中國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù), 2012, 28(5):921-924.

［4］ 王永南,王頎,張安秦, 等.Ki-67與分子亞型預(yù)測(cè)乳腺癌新輔助化療敏感性的研究.中華腫瘤防治雜志, 2012,19(23):1805-1809.

［5］ 徐立坤, 李涌濤. Ki-67 和 BRCA1 在≤35 歲乳腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義. 實(shí)用腫瘤學(xué)雜志, 2012, 27( 2):123-128.

The expression and clinical significance of Ki - 67 protein in breast cancer patients

Wu Xiuping, Xie Yuanfu, Yang Leyi, et al.
Zhangzhou hospital affiliated to fujian medical university zhang zhou 363000, China

Objective To investigate the Ki-67 expression in the tissue of breast cancer and the relationship between the Ki-67 and mitotic count, lymph node metastasis and clinical pathological parameters.Methods To test the Ki-67 expression in the tissue of breast cancer with immunohistochemistry and analyze the relationship between the Ki-67 and mitotic count, lymph node metastasis,ER,PR and HER-2.Results The Ki-67 expression in mitotic count and malignant degree has significant correlation .The Ki-67 expression in the ER and PR positive group is significantly lower than that in the ER and PR negative group.The Ki-67 expression in the HER-2 positive group is significantly higher than that in the HER-2 negative group.Conclusions Ki-67 can serve as a judge for the efficacy of breast cancer prognosis, and the combined detection of Ki-67 and other clinical pathological parameters for breast cancer can help to understand the biological behavior of breast cancer.

Breast cancer； Ki-67 protein; Mitotic count; Lymphatic metastasis; ER; PR; HER-2

363000 福建醫(yī)科大學(xué)附屬漳州市醫(yī)院普外三科乳腺外科(吳秀萍 楊樂(lè)藝 吳雄 王增燕)；福建醫(yī)科大學(xué)附屬漳州市醫(yī)院放療科(謝源福)

謝源福 E-mail：xieyanfu111@163.com