任昭君

（棗莊學(xué)院體育學(xué)院，山東棗莊 277160）

“復(fù)方抗氧化制劑”抗氧化能力的研究

任昭君

（棗莊學(xué)院體育學(xué)院，山東棗莊 277160）

摘 要：探討“復(fù)方抗氧化制劑”對(duì)大鼠骨骼肌抗氧化能力的影響，以期為開(kāi)發(fā)保健飲料提供一定的參考作用。選取42只雄性Wistar大鼠，隨機(jī)分為對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組，8周后分別于安靜狀態(tài)、定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)24 h后測(cè)試大鼠骨骼肌總抗氧能力、MDA含量、GSH含量。結(jié)果表明，安靜狀態(tài)下、定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)24 h后，實(shí)驗(yàn)組大鼠骨骼肌中總抗活性氧能力明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），GSH含量明顯高于對(duì)照組（P＜0.05）；安靜狀態(tài)下、定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)后，實(shí)驗(yàn)組大鼠骨骼肌中MDA含量明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）?！皬?fù)方抗氧化制劑”能夠提高大鼠在不同功能狀態(tài)下骨骼肌中抗氧化能力。

關(guān)鍵詞：丙二醛；復(fù)方抗氧化制劑；還原型谷胱甘肽

補(bǔ)充抗氧化劑、礦物元素以及補(bǔ)充氨基酸、中藥等，有利于增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力和提高機(jī)體的運(yùn)動(dòng)能力。但是，關(guān)于運(yùn)動(dòng)員額外補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)抗自由基損傷作用的研究還不完善，補(bǔ)充的種類、劑量、持續(xù)時(shí)間還沒(méi)有得出一致結(jié)論。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)一些藥食同源的食物如沙棘、蘆薈、人參、枸杞等具有清除機(jī)體自由基、對(duì)抗脂質(zhì)過(guò)氧化、提高機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力的作用，另外研究還表明獼猴桃、番茄、石榴等也具有抗氧化的作用。

本研究通過(guò)讓大鼠食用具有抗氧化作用并且無(wú)毒副作用的沙棘、石榴、西洋參、枸杞、蘆薈等配制的“復(fù)方抗氧化制劑”，并觀察“復(fù)方抗氧化制劑”對(duì)大鼠在不同功能狀態(tài)下骨骼肌抗氧化能力的影響，以期為開(kāi)發(fā)適合運(yùn)動(dòng)員食用或飲用的，安全、有效的、能夠提高機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力并且無(wú)毒副作用、具有抗氧化作用的食品及飲料，提供更多的科學(xué)依據(jù)。

1 材料

1.1“復(fù)方抗氧化制劑”的配制

為開(kāi)發(fā)具有抗氧化能力、抗疲勞能力并且無(wú)毒副作用的運(yùn)動(dòng)飲料，以沙棘、枸杞、核桃、西洋參、石榴等配制而成“復(fù)方抗氧化制劑”飲料。

1.2 材料

健康 Wistar大鼠，體重（160±10）g，雄性，42只（魯動(dòng)質(zhì)字：2001003），由山東大學(xué)動(dòng)物研究所提供，標(biāo)準(zhǔn)飼料飼養(yǎng)，飲用純凈水，動(dòng)物房濕度38%，室溫19℃～26℃。

2 方法

2.1 分組與服藥方法

隨機(jī)分為對(duì)照組（C組）與實(shí)驗(yàn)組（S組），實(shí)驗(yàn)組每天自由飲用“復(fù)方抗氧化制劑”飲料，對(duì)照組自由飲用純凈水。8周后分別于安靜狀態(tài)、力竭運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)24 h后取材測(cè)試大鼠骨骼肌總抗活性氧能力、丙二醛含量及還原型谷胱甘肽含量。

2.2 力竭運(yùn)動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)

大鼠尾部負(fù)重，重量是體重的3%，在水深55 cm，水溫32℃，直徑70 cm的圓形特制大鼠游泳池子中游泳。大鼠沉入水下，且10 s不能自動(dòng)浮出水面為力竭標(biāo)準(zhǔn)。

2.3 定量負(fù)荷標(biāo)準(zhǔn)

大鼠尾部負(fù)重，重量是體重的3%，在水深55 cm，水溫32℃，直徑70 cm的圓形特制大鼠游泳池子中游泳，40 min后撈出。

2.4 取材

各組大鼠分別于相應(yīng)時(shí)刻，依次用乙醚麻醉，迅速取出股四頭肌，先在0℃～4℃冰生理鹽水中洗凈血液，并用濾紙吸干水分，裝入內(nèi)徑4 mm的塑料樣品管中，并迅速放入-84℃超低溫冰箱。

2.5 儀器

水浴鍋（HH-S26）、721分光光度計(jì)、超低溫冰箱-86℃（DW86-200）、電子天平（WA 10005）、低溫離心機(jī)（GTR10-1）、百得移液器（Biohit 73070X）、恒溫混勻器（TS100）、電熱恒溫干燥箱（MX841-3）、高速勻漿器、離心管、試管等。

2.6 指標(biāo)測(cè)定

2.6.1 組織勻漿液制備

從超低溫冰箱中取出樣品，解凍，用冷生理鹽水洗凈血液，濾紙吸干，取出大鼠股四頭肌6 g左右，電子天平稱重，按1∶9加入生理鹽水，在冰浴條件下用電動(dòng)高速勻漿器制成10%的組織勻漿液，用低溫離心機(jī)（4℃）以3 500 r/min離心15 min，取上清液4 mL放入樣品管中，4℃冷藏待測(cè)。

2.6.2 測(cè)定方法

MDA：采用硫代巴比妥酸（Thibabituric Acid TBA）法，蛋白含量：采用考馬斯亮蘭法，GSH、抗活性氧能力，各指標(biāo)測(cè)定嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明操作。以上試劑盒均為南京建成生物工程研究所提供，嚴(yán)格按照說(shuō)明操作。

3 結(jié)果

3.1 總抗活性氧能力

不同功能總抗活性氧能力比較，見(jiàn)表1。

表1 不同功能狀態(tài)下兩組大鼠骨骼肌中總抗活性氧能力（AN-Ros）的比較Table 1 Changes of AN-Ros in rat skeletal muscle of Two groups at different functional status

安靜狀態(tài)下、定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)24 h后，實(shí)驗(yàn)組大鼠骨骼肌中總抗活性氧能力明顯高于對(duì)照組（P＜0.05）。與安靜狀態(tài)相比，對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)24 h后，大鼠骨骼肌中總抗活性氧能力明顯低于安靜狀態(tài)（P＜0.05）。

3.2 丙二醛（MDA）含量

不同丙二醛（MDA）含量比較，見(jiàn)表2。

表2 不同功能狀態(tài)下兩組大鼠骨骼肌中丙二醛（MDA）含量的比較Table 2 Changes of MDA content in rat skeletal muscle of Two groups at different functional status

安靜狀態(tài)下、定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)后，實(shí)驗(yàn)組大鼠骨骼肌中丙二醛含量明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）。與安靜狀態(tài)相比，對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)后，大鼠骨骼肌中丙二醛含量明顯低于安靜狀態(tài)（P＜0.05）。

3.3 還原型谷胱甘肽（GSH）含量

不同還原型谷胱甘肽（GSH）含量比較，見(jiàn)表3。

安靜狀態(tài)下、定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)24 h后，實(shí)驗(yàn)組大鼠骨骼肌中還原型谷胱甘肽含量明顯高于對(duì)照組（P＜0.05）。與安靜狀態(tài)相比，對(duì)照組定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后，力竭運(yùn)動(dòng)后，大鼠骨骼肌中還原型谷胱甘肽含量明顯低于安靜狀態(tài)（P＜0.05），實(shí)驗(yàn)組，力竭運(yùn)動(dòng)后，大鼠骨骼肌中還原型谷胱甘肽明顯低于安靜狀態(tài)（P＜0.05）。

4 結(jié)論與討論

活性氧有很強(qiáng)的氧化能力，是已知最強(qiáng)的氧化劑之一。關(guān)于補(bǔ)充抗氧化劑對(duì)機(jī)體抗活性氧能力的變化，目前報(bào)道較少。本研究顯示，對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)24 h后，大鼠骨骼肌中總抗活性氧能力明顯低于安靜狀態(tài)，而實(shí)驗(yàn)組在安靜狀態(tài)下、定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)24 h后，大鼠骨骼肌中總抗活性氧能力明顯高于對(duì)照組（P＜0.05）。這說(shuō)明補(bǔ)充“復(fù)方抗氧化制劑”能夠提高大鼠安靜狀態(tài)下、定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)24 h后大鼠骨骼肌中抗活性氧的能力，提高機(jī)體清除自由基的能力。

MDA作為脂質(zhì)過(guò)氧化物的代表產(chǎn)物是衡量機(jī)體自由基代謝的敏感指標(biāo)，其含量能客觀反映機(jī)體產(chǎn)生自由基的水平。運(yùn)動(dòng)后機(jī)體MDA含量的變化，目前研究報(bào)道不一。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，運(yùn)動(dòng)后機(jī)體MDA含量提高[1-2]，但也有學(xué)者認(rèn)為運(yùn)動(dòng)后機(jī)體MDA含量降低[3]。本研究表明，對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)后，大鼠骨骼肌中丙二醛含量明顯低于安靜狀態(tài)。而實(shí)驗(yàn)組在安靜狀態(tài)下、定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)后，大鼠骨骼肌中丙二醛含量明顯低于對(duì)照組。這說(shuō)明“復(fù)方抗氧化制劑”能夠提高機(jī)體抗氧化能力，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化，降低大鼠骨骼肌中MDA含量。

還原型谷胱甘肽不僅是體內(nèi)重要的保護(hù)因子及抗氧化物質(zhì)，還在細(xì)胞凋亡、基因表達(dá)、信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中起著重要作用。運(yùn)動(dòng)后機(jī)體還原型谷胱甘肽的變化，相關(guān)報(bào)道也存在差異，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為運(yùn)動(dòng)后機(jī)體還原型谷胱甘肽含量下降。本研究發(fā)現(xiàn)，與安靜狀態(tài)相比，對(duì)照組定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后，力竭運(yùn)動(dòng)后，大鼠骨骼肌中還原型谷胱甘肽含量明顯低于安靜狀態(tài)；實(shí)驗(yàn)組，力竭運(yùn)動(dòng)后，大鼠骨骼肌中還原型谷胱甘肽明顯低于安靜狀態(tài)。而實(shí)驗(yàn)組在安靜狀態(tài)下、定量負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)后、力竭運(yùn)動(dòng)24 h后，大鼠骨骼肌中還原型谷胱甘肽含量明顯高于對(duì)照組。這表明“復(fù)方抗氧化制劑”能夠提高大鼠在不同功能狀態(tài)下骨骼肌中GSH的含量，能有效的清除機(jī)體過(guò)多的自由基，提高機(jī)體抗氧化能力。

“復(fù)方抗氧化制劑”能夠提高大鼠在不同功能狀態(tài)下骨骼肌中抗活性氧的能力，降低骨骼肌中MDA含量，提高骨骼肌中GSH的含量，提高機(jī)體的抗氧化能力。

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[1]河春姬,胡揚(yáng),田野,等.急性常氧運(yùn)動(dòng)后低氧暴露對(duì)體內(nèi)自由基代謝的影響[J].北京體育大學(xué)學(xué)報(bào),2005,28(6):766-768

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Study the Antioxidant Capacity of the'Compound Antioxidants'

REN Zhao-jun
（College of Physical Education，Zaozhuang University，Zaozhuang 277160，Shandong，China）

Abstract：Explore the effect of"compound antioxidants"on antioxidant capacity in rat skeletal muscle， in order to offer certain reference role to development of health drink.Selecting 42 male Wistar rats，were randomly assigned to the control group and the experimental group， after 8 weeks， the total antioxidant capacity， content of MDA， GSH content in rat skeletal were tested in quiet State， after Quantitative load exercise， after exhaustive exercise， after exhaustive exercise 24 hour.under the quiet state， after quantitative load exercise， exhaustion after exercise， exercise exhaustion after 24 hours， the total antioxidant capacity in the experimental group rats skeletal muscle was significantly higher than the control group （P＜0.05）， GSH content was significantly higher than the control group（P＜0.05）； quiet condition， after quantitative load exercise， after exhaustion exercise，MDA content in the experimental group rats skeletal muscle was significantly lower than control group （P＜0.05）."compound antioxidants"can improve the antioxidant capacity in rats skeletal muscle under different functional state.

Key words：MDA；compound antioxidants；GSH

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2013.14.007

任昭君（1971—），男（漢），副教授，碩士研究生，研究方向：運(yùn)動(dòng)生理學(xué)。

2013-01-09