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        種植體周圍齦溝液中白介素-1β與牙周指數(shù)的相關(guān)性研究

        2013-09-01 02:13:34孫鴻義戴燕平鞏玉花
        中國醫(yī)藥科學(xué) 2013年17期
        關(guān)鍵詞:牙周指數(shù)齦溝種植體

        孫鴻義 戴燕平 鞏玉花

        1.濟南市第五人民醫(yī)院口腔科,山東濟南 250022;2.濱州醫(yī)學(xué)院口腔學(xué)院,山東濱州 256603

        牙周病源于齒齦下特異微生物與宿主的相互作用,兩者間的相互作用可導(dǎo)致炎癥介質(zhì)的釋放從而造成組織破壞。宿主對齦下牙菌斑的免疫應(yīng)答受一些細(xì)胞因子的調(diào)控,包括白介素(IL)-1β,IL-1α和腫瘤壞死因子α(TNFα)。IL-1β能夠刺激骨質(zhì)吸收和抑制骨形成,還可以促進(jìn)前列腺素和蛋白酶的合成。IL-1β與其他炎癥介質(zhì)協(xié)同作用還可以調(diào)節(jié)或放大牙周組織和口腔種植體周圍組織中的炎癥反應(yīng)[1],齦溝液(gingival crevicular fluid,GCF)和牙齦中高水平的IL-1β與慢性牙周炎有明顯關(guān)聯(lián)[2],所以不少研究[3]據(jù)此嘗試抑制IL-1β來減輕慢性牙周炎患者的口腔組織破壞。近年來隨著口腔種植技術(shù)逐漸普遍,已有學(xué)者注意到種植體周圍齦溝液(peri-implant crevicular fluid,PICF)中也會出現(xiàn)IL-1β水平的增高,且這種高水平的IL-1β與種植體周圍炎有關(guān)[4]。本研究將采用左右半口自身對照,探討種植體周圍齦溝液中IL-1β與牙周指數(shù)的相關(guān)性,同時種植體周圍齦溝液(PICF)和健側(cè)齒齦溝液(GCF)中IL-1β的情況也一并比較分析。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選取2011年6月~2013年6月來我院接受人工牙種植的缺牙患者。入選標(biāo)準(zhǔn)為接受骨性結(jié)合人工牙植入,身體健康,沒有吸煙史,未曾服用有可能影響種植體周圍組織、牙周組織微生態(tài)的藥物??偣灿?4例患者入選,男6例,年齡(51.5±10.3)歲;女28例,年齡(51.7±9.2)歲?;颊呷笔а涝颍糊x病拔除14例,外傷脫落5例,根尖病拔除4例,牙周病脫落3例,其他原因8例?;颊呷脒x時機為種植體負(fù)重后(35.8±8.3)個月。全部患者共計有43顆ITI種植牙組成種植體組,其中上頜前牙區(qū)11枚,前磨牙區(qū)6枚,磨牙區(qū)7枚,下頜前牙區(qū)4枚,前磨牙區(qū)6枚,磨牙區(qū)9枚。根據(jù)左右半口對照原則取每顆種植牙對側(cè)的健側(cè)牙齒作為對照,組成對照組,共43顆。所有患者均簽署知情同意書。

        1.2 牙周指數(shù)

        在收集齦溝液之前,先測定改良菌斑指數(shù)(modified plaque index,mPI)和改良牙齦指數(shù)(modified gingival index,mGI);探針平行于種植體或健側(cè)牙齒的長軸,記錄牙周袋探針深度(probing depth,PD);根據(jù)根尖周X線片測定牙槽骨吸收(alveolar bone loss,aBL)。以上數(shù)據(jù)由同一人收集。

        1.3 PICF和GCF的采集與定量

        種植體組:小心去除齒齦上臨床可見的菌斑,務(wù)必避免觸及齒齦。保持種植體或健側(cè)齒干燥,小心使用棉球隔離之。為保證結(jié)果準(zhǔn)確,使用吸唾管不斷吸出唾液。將已用分析天平稱量的2mm×8mm Whatman 3mm濾紙條插入齦溝內(nèi),直至有輕微抵抗感為止,留置濾紙條于溝內(nèi)30s后取出。濾紙條取出后立即稱重,后置入盛有400μL PBS溶液的Eppendorf管中。最后將Eppendorf管放入-70℃的冰箱保存。把Eppendorf管放置于離心機,管內(nèi)注入20μL蒸餾水,以3000g離心15min。丟棄濾紙條,取出齦溝液(PICF)標(biāo)本,在96孔微孔板上用牛血清白蛋白定量。對照組用同樣的方法獲取齦溝液(GCF)。

        1.4 IL-1β測定

        采用雙抗體夾心ELISA法檢測標(biāo)本液中IL-1β水平。ELISA試劑盒購自Endogen,USA。嚴(yán)格按照廠家說明書進(jìn)行操作。

        1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

        IL-1β在PICF中和GCF中的差異采用配對t檢驗;種植體組和對照組牙周指數(shù)的差異采用配對t檢驗;采用直線相關(guān)法分析兩組齦溝液中IL-1β含量與四個牙周指數(shù)(mPI,mGI,PD,aBL)的相關(guān)性,計算Pearson相關(guān)系數(shù),從而得出t值,查表獲知P值。使用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行處理,P<0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        種植體組PICF中的IL-1β含量為76.39pg/μL,對照組GCF中的IL-1β含量為45.68pg/μL,經(jīng)配對t檢驗兩組P=0.001。種植體組的四項牙周指數(shù)平均計分明顯高于對照組(P<0.01,表1)。直線相關(guān)顯示,兩組齦溝液中IL-1β含量都與牙周指數(shù)計分呈正相關(guān)(表2)。

        表1 種植體組和對照組的牙周指數(shù)(± s)

        表1 種植體組和對照組的牙周指數(shù)(± s)

        注:與種植體組比較:t=2.871、2.716、2.812、2.964;*P < 0.01

        組別 改良菌斑指數(shù) 改良牙齦指數(shù) 牙周袋探針深度 牙槽骨吸收種植體組 0.43±0.79 0.41±0.55 3.43±1.17 1.53±1.06對照組 0.36±0.64* 0.29±0.45* 2.97±1.18* 1.36±1.12*

        表2 兩組齦溝液中IL-1β與牙周指數(shù)的相關(guān)關(guān)系(示Pearson系數(shù))

        3 討論

        IL-1β是牙周病免疫應(yīng)答中重要的炎性因子,它在種植體周圍炎中是否具有促進(jìn)炎癥的作用,目前尚沒有定論。IL-1β由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生后激活T細(xì)胞誘發(fā)免疫反應(yīng),在分子生物學(xué)層面,IL-1β不僅能夠激活破骨細(xì)胞,而且種植體周圍炎一旦發(fā)生IL-1β濃度常常顯著提升[5]。另有臨床研究[4]證實某些患者接受口腔種植后發(fā)生種植體周圍炎,他們的齦溝液中IL-1β濃度比正常人顯著增高。Takashiba等[3]曾經(jīng)通過實驗證實IL-1β與種植體周圍骨組織的吸收呈相關(guān)性,可作為檢測種植體周圍炎邊緣骨吸收的敏感指標(biāo),而Sakai等[6]則更是提出IL-1β有評價種植體周圍炎癥程度的潛在價值。

        本研究證實PICF和GCF中IL-1β的含量確有明顯差異以PICF中為高,這一點與前人的報道是一致的。造成這種差異的原因可能是種植體或健康牙齒周圍組織的生物學(xué)特點不一。本研究還對PICF中IL-1β的含量與牙周指數(shù)的相關(guān)性進(jìn)行探討,統(tǒng)計學(xué)結(jié)果表明IL-1β與菌斑指數(shù)、牙齦指數(shù)、牙周袋探針深度、牙槽骨吸收有正相關(guān)關(guān)系,與Ata-Ali等[7]的研究結(jié)論相一致。而且,我們的課題組還發(fā)現(xiàn),即使是健康牙齒中的IL-1β水平也與牙周指數(shù)呈正相關(guān)。雖然種植體組比對照組的齦溝液IL-1β水平高,但兩組的IL-1β都與牙周指數(shù)呈正相關(guān),因此這一點提示我們今后無論患者接受人工牙植入與否,若發(fā)現(xiàn)牙周指數(shù)有變化即可推斷IL-1β的活動,應(yīng)立即采取抑制IL-1β治療以減輕患者的口腔組織破壞。Stashenko等[2]推測GCF中IL-1β的含量可能與慢性牙周炎有關(guān)。為此Ebersole等[8]專門選取健康人和慢性牙周病患者,用ELISA法測定GCF中IL-1β的含量同時對患者的牙周指數(shù)進(jìn)行評分,最終他們得出結(jié)論GCF中IL-1β的含量與牙周炎有關(guān)聯(lián)。不過,Teles等[9]對此持懷疑態(tài)度,他發(fā)現(xiàn)侵襲性牙周炎常常表現(xiàn)出超乎正常范圍的IL-1β/IL-10比值,進(jìn)而推斷牙周炎的成因不應(yīng)只是GCF中IL-1β的升高,而是諸多促進(jìn)和抑制炎癥反應(yīng)的細(xì)胞因子失衡所致。本研究測定了健康牙齒GCF和種植體PICF中的IL-1β濃度及各自的牙周指數(shù),只得出牙周組織病變的情況與齦溝液中IL-1β濃度正相關(guān),但尚不能據(jù)此認(rèn)為單純IL-1β升高即會導(dǎo)致牙周病發(fā)生,今后仍需測定更多的炎癥因子以全面分析。

        另外,還有一些報道質(zhì)疑PICF和GCF中IL-1β含量的差異。Adonogisaki等[10]和Murata等[11]在各自的實驗室測量種植體組和對照組齦溝液時,都沒有發(fā)現(xiàn)兩組間IL-1β含量有明顯差異;Melo等[1]對比健康牙齒組、健康種植體周圍組、種植體周圍炎組,齦溝液中未出現(xiàn)具備統(tǒng)計學(xué)差異的IL-1β含量值。我們認(rèn)為這可能因為各實驗室研究方法不盡相同,例如樣品數(shù)量、種植體負(fù)重時機、取樣時標(biāo)本處于活躍期抑或是靜息期等。

        種植體周圍齦溝液中的IL-1β比正常牙齒齦溝液中的IL-1β含量高,種植體和正常牙齒齦溝液中的IL-1β含量都與牙菌斑指數(shù)、牙齦指數(shù)、牙周袋探針深度、牙槽骨吸收呈正相關(guān)。IL-1β含量高低有可能作為牙周組織或種植體周圍組織病變與否的生物學(xué)標(biāo)志物,但尚存在爭議。今后仍需研究更多的炎癥因子與種植體周圍組織病變的關(guān)系。

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