王玲玲，龍斌斌，王璟睿，艾雯，張?zhí)N莉

1遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院，遼寧錦州 121000；2太和醫(yī)院，湖北十堰 442000

隨著臨床抗生素使用的增加，細(xì)菌耐藥性問題日益嚴(yán)重。為了更好地掌握本院主要病原菌分布、菌種變遷及藥物敏感性的變化趨勢，為臨床合理用藥提供客觀依據(jù)，我們對2009年1月-2011年12月我院分離的病原菌及其藥物敏感性進(jìn)行分析。

材料和方法

1 標(biāo)本來源 收集2009年1月-2011年12月從本院微生物室接收的門診和住院患者各類標(biāo)本中分離培養(yǎng)的病原菌共3 947株，主要來源于痰(55.9%)，尿液 (18.9%)，血液 (6.0%)，分泌物 (5.8%)。醫(yī)院患者主要來自遼西地區(qū)。

2 質(zhì)控菌株 大腸埃希菌(ECO)ATCC25922，銅綠假單胞菌(PAE)ATCC27853，金黃色葡萄球菌(SAU)ATCC25923.

3 細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn) 細(xì)菌分離培養(yǎng)按《臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第三版)》進(jìn)行，血液培養(yǎng)采用BACTEC9120血培養(yǎng)儀，細(xì)菌鑒定及藥敏檢測采用西門子公司的Walkaway-96微生物鑒定儀。部分菌株藥敏采用K-B紙片法，按NCCLS標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果，耐甲氧西林葡萄球菌按指示藥物苯唑西林結(jié)果判斷。產(chǎn)超光譜β-內(nèi)酰胺酶(extended spectrum beta-lactamases，ESBLs)菌株判斷根據(jù)指示藥物頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢噻肟/克拉維酸、頭孢他啶/克拉維酸結(jié)果由儀器自動判斷。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 病原菌藥物敏感性采用患者首次分離株，用世界衛(wèi)生組織細(xì)菌耐藥性監(jiān)測中心推薦的WHONET5.4軟件和Excel進(jìn)行分析，并采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料用交叉列聯(lián)χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 病原菌種類分布 3年病原菌的檢出總數(shù)為3 947株，革蘭陰性菌3 196株，占80.3%，革蘭陽性菌778株，占19.7%。2009年和2010年銅綠假單胞菌的構(gòu)成比最高，2011年肺炎克雷伯桿菌的構(gòu)成比最高。2009-2011年在我院臨床標(biāo)本分離的病原菌中，革蘭陰性桿菌分離率分別為77.8%、80.9%，80.9%。大腸埃希桿菌、肺炎克雷伯桿菌產(chǎn)ESBLs率分別為55%、45%。2009-2011鮑曼不動桿菌的分離率分別為9.8%、10.6%、12.2%。肺炎克雷伯桿菌的分離率由2009年的13.4%上升到2011年的18.0%(χ2=8.873，P=0.003)。主要的革蘭陽性菌為金黃色葡萄球菌，血漿凝固酶陰性葡萄球菌，腸球菌。真菌未納入統(tǒng)計(jì)內(nèi)，見表1。

表1 常見病原菌分布和構(gòu)成比Tab.1 Distribution of common pathogens(n, %)

2 主要腸桿科細(xì)菌的藥物敏感性 2009年1月-2011年12月分離的腸桿菌以大腸埃希桿菌、肺炎克雷伯桿菌、陰溝桿菌為主。2009-2011年大腸埃希菌對頭孢噻肟的敏感率分別為49.6%，37.4%，31.2%，呈逐年下降趨勢 (χ2=12.101，P=0.002)。2009-2011年肺炎克雷伯桿菌對頭孢噻肟的敏感率分別為60.6%，55.8%，47.5%，呈逐年下降趨勢(χ2=6.952，P=0.031)。見表 2。

表2 主要腸桿菌科細(xì)菌的藥物敏感性Tab.2 Sensitivity of main Enterobacteriaceae to antibiotics(%)

3 主要非發(fā)酵菌對抗菌藥物的敏感性 銅綠假單胞桿菌對氟喹諾酮類、碳青霉烯類、氨基糖苷類、單環(huán)內(nèi)酰胺類、青霉素類、四代頭孢類抗生素的敏感率相對較高，而對內(nèi)酰胺酶類抑制劑、第一、二、三代頭孢類抗生素敏感率＜50%。鮑曼不動桿菌僅對亞胺培南的敏感率＞50%，但其敏感性由2009年的51.2%下降到2011年的33.5%，藥物敏感性顯著下降(χ2=7.818，P=0.005)；對其他抗生素敏感率均＜35%。嗜麥芽窄食單胞菌對大部分抗生素天然耐藥，僅對復(fù)方新諾明和左氧氟沙星有較高敏感性。見表3。

4 主要革蘭陽性球菌對抗菌藥物的敏感性 凝固酶陰性葡萄球菌，金黃色葡萄球菌，腸球菌對抗生素的的敏感性逐年下降。未檢出對萬古霉素耐藥的金黃色葡萄球菌，腸球菌僅對萬古霉素的敏感率＞90%；耐甲氧西林金黃色葡萄球菌由2009年的29.5%上升到2011年的43.2%，上升趨勢明顯 (χ2=31.297，P＜0.01)。見表4。

表3 主要非發(fā)酵菌對抗菌藥物的敏感性Tab.3 Sensitivity of main non-fermenting bacteria to antibiotics(%)

表4 主要革蘭陽性菌對抗生素的敏感性Tab.4 Sensitivity of main Gram-positive bacteria to antibiotics(%)

討 論

病原菌來源于痰液標(biāo)本的構(gòu)成比為55.9%，低于謝莉，楊亞敏[1]報道的84.97%，但痰標(biāo)本仍是我院標(biāo)本的主要來源。革蘭陽性球菌分離率有下降趨勢。

大腸埃希桿菌對大多數(shù)抗菌藥物的敏感性逐年降低，對環(huán)丙沙星保持著高耐藥率，這是我國細(xì)菌耐藥中所特有的現(xiàn)象；大腸埃希桿菌除對阿米卡星和亞胺培南敏感性較高外，對頭孢西丁也有較高的敏感性[2]。大腸埃希桿菌和肺炎克雷伯桿菌產(chǎn)ESBLs率均呈逐年上升趨勢。陰溝桿菌耐藥性強(qiáng)，對常用抗生素敏感性的下降程度較大腸埃希桿菌和肺炎克雷伯桿菌更為顯著。本次調(diào)查顯示，陰溝桿菌對慶大霉素、妥布霉素等的敏感率均在66.3%~70.6%之間，這與劉紅軍等[3]報道的不足20%有較大差異。

銅綠假單胞菌有多重耐藥機(jī)制，如改變抗菌藥物的作用靶酶，主動外排系統(tǒng)的過度表達(dá)，外膜通透性的改變[4]。細(xì)菌產(chǎn)生抗菌藥物滅活酶或抗菌藥物修飾酶以及形成生物膜等造成其耐藥的復(fù)雜性，使其對許多抗菌藥物產(chǎn)生耐藥[5]。本資料中銅綠假單胞菌對環(huán)丙沙星敏感性最高，其次是阿米卡星和亞胺培南，對頭孢吡肟的敏感率均＜20.6%，這與郝秀紅等[6]的報道有較大差異。鮑曼不動桿菌對亞胺培南的敏感性最高，這與秦攀，裴保香[7]的報道有差異，除亞胺培南外，對其他抗菌藥的敏感性均＜50%。嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌對碳青霉烯類天然耐藥，對左氧氟沙星和復(fù)方新諾明敏感率較高，因此可作為一線抗菌藥。

耐甲氧西林金黃色葡萄球菌分離率仍低于楊偉業(yè)等[8]的報道。耐甲氧西林血漿凝固酶陰性葡萄球菌檢出率均＞82.4%，未檢出耐萬古霉素的葡萄球菌，這與孟祥紅等[9]報道的結(jié)果一致。金黃色葡萄球菌對呋喃妥因，復(fù)方新諾明，哌拉西林/舒巴坦，萬古霉素的敏感性均＞90%，可作為首選用藥。對萬古霉素耐藥的腸球菌屬檢出率低于張麗等[10]的報道。由于青霉素，氨芐西林較易與腸球菌細(xì)胞膜上的低分子青霉素結(jié)合蛋白結(jié)合，因此腸球菌對青霉素、氨芐西林極為敏感[11]。

1 謝莉，楊亞敏. 2009～2010年我院病原菌分布及耐藥性分析［J］.當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2011，17（22）：137-139.

2 張秀珍， 胡云建， 艾小曼， 等. Mohnarin2006--2007年度報告：華北地區(qū)細(xì)菌耐藥監(jiān)測［J］.中國抗生素雜志，2008，33（10）：616-621.

3 劉紅軍，鄧文國，劉倩，等．2011年臨床病原菌分布及耐藥性分析［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（7）：806-808．

4 Yang K， Guglielmo BJ. Diagnosis and treatment of extendedspectrum and AmpC beta-lactamase-producing organisms［J］. Ann Pharmacother， 2007， 41（9）： 1427-1435.

5 Glupczynski Y， Huang TD， Berhin C， et al. In vitro activity of temocillin against prevalent extended-spectrum beta-lactamases producing Enterobacteriaceae from Belgian intensive care units［J］.Eur J Clin Microbiol Infect Dis， 2007， 26（11）： 777-783.

6 郝秀紅，郭建巍，歐敏，等．近5年銅綠假單胞菌臨床分布及耐藥現(xiàn)狀［J］.軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報，2012，33（1）：50-51，100．

7 秦攀，裴保香．鮑曼不動桿菌的臨床分布與藥敏分析［J］.軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報，2011，32（6）：604-606．

8 楊偉業(yè)，吳秀榮，陳鳳琴，等．2008-2011年耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐藥性分析［J］.中國醫(yī)藥科學(xué)，2012，2（5）：17-18．

9 孟祥紅，董梅，董月明，等. 我院2008-2010年6983 株臨床分離細(xì)菌耐藥性分析［BE/J］. http：//www.cnki.net/kcms/detail/11.3275.R.20120910.0949.001.html

10 張麗，楊文航，肖盟，等．2010年度衛(wèi)生部全國細(xì)菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)報告：ICU來源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22（1）：34-38．

11 O'Brien TF， Stelling J. Integrated Multilevel Surveillance of the World’s Infecting Microbes and Their Resistance to Antimicrobial Agents［J］. Clin Microbiol Rev， 2011， 24（2）：281-295.