胡美榮，曾春蘭，劉軍，楊煒英

(瑞金市人民醫(yī)院檢驗科，江西 瑞金 342500)

世界變態(tài)反應(yīng)組織(WAO)對30多個國家進行調(diào)查顯示近22%的人患有IgE介導(dǎo)的過敏性疾病(變態(tài)反應(yīng)疾病)，如過敏性鼻炎、哮喘、濕疹、食物過敏、藥物過敏等[1]。過敏性疾病可以是由于人體吸入或食入過敏原引起的，因此明確過敏原對變態(tài)反應(yīng)病的診斷和治療至關(guān)重要。本文采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)對贛南地區(qū)200例過敏性疾病患者血清中9種常見過敏原特異性抗體IgE(sIgE)和總IgE進行檢測，意在為該地區(qū)過敏性疾病的診斷和預(yù)防提供科學(xué)依據(jù)?，F(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 2011年10月至2013年3月經(jīng)我院臨床診斷為過敏性疾病的患者血清200例，其中男性129例，女性71例；年齡6個月～75歲，平均27歲。200例患者中支氣管哮喘115例，蕁麻疹

37例，濕疹23例，過敏性鼻炎16例，皮炎7例，慢阻肺2例；病程3天～28年；均未患影響免疫系統(tǒng)或接受免疫治療。健康對照組120例為來我院體檢進行健康體檢的人群，年齡1~65歲，其中男性70例，女性50例，均無過敏史。

1.2 試劑和儀器

1.2.1 試劑 采用杭州浙大迪迅生物基因工程有限公司生產(chǎn)的過敏原特異性抗體IgE檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)，檢測項目包括：總IgE、戶塵螨、狗毛皮屑、蟑螂、牛奶、雞蛋白、蝦、蟹、霉菌組合(點青霉、交鏈孢霉、煙曲霉、分枝孢霉)、樹花粉組合(櫟樹、榆樹、梧桐、柳樹、楊樹)。試劑批號121210。

1.2.2 儀器 酶標(biāo)分析儀為北京普朗新技術(shù)有限公司產(chǎn)品，型號為DMN-9602；洗板機為美國Thermo公司產(chǎn)品，型號為Wellwash 4MK2。

l.3方法 采集患者和健康對照組靜脈血3ml，分離血清，并采用ELISA法測定兩組血清中9種過敏原的特異性IgE抗體和總IgE，實驗操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行。

1.4 結(jié)果判斷 以IgE校準(zhǔn)品溶液系列的濃度對數(shù)值為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的吸光度(OD值)為縱坐標(biāo)，計算出校準(zhǔn)曲線，計算出濃度值。sIgE結(jié)果分為0~6級，即 0 級(0.00~0.34IU/ml)，1 級(0.35~0.69 IU/ml)，2 級(0.70~3.49 IU/ml)，3 級(3.50~17.49IU/ml)，4 級(17.5~49.99IU/ml)，5 級 (50.0~99.99IU/ml)，6 級(≥100.00IU/ml)；sIgE高于1級即sIgE≥0.35IU/mL為陽性?？侷gE≥100IU/ml為陽性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 結(jié)果采用SPSS 17.0 for Windows軟件進行χ2檢驗，以P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清總IgE陽性率 200例過敏性疾病患者中，156例總IgE≥為陽性，陽性率78.0%；健康對照組120例中有37例總IgE陽性，陽性率為30.8%，陽性差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。

2.2 血清中過敏原sIgE陽性率 結(jié)果見1。

3 討論

過敏性疾病即I型變態(tài)反應(yīng)被世界衛(wèi)生組織(WHO)列為21世紀(jì)重點防治的四大非傳染性疾病之一[2],是當(dāng)今世界性的重大衛(wèi)生學(xué)問題。過敏性疾病的致病機制是變應(yīng)原通過呼吸道、消化道等多種途徑進入人體內(nèi)，刺激機體產(chǎn)生親細(xì)胞抗體IgE，IgE通過其Fc段與肥大細(xì)胞或嗜堿粒細(xì)胞膜上Fc受體結(jié)合，使機體處于致敏狀態(tài)；當(dāng)相同變應(yīng)原再次進入致敏機體時，可與肥大細(xì)胞或嗜堿粒細(xì)胞表面的IgE發(fā)生特異性結(jié)合，當(dāng)二價或多價變應(yīng)原與靶細(xì)胞上兩個以上相鄰的IgE結(jié)合時，細(xì)胞膜上的Fc受體因IgE橋聯(lián)而發(fā)生移位、變構(gòu)，就會引發(fā)細(xì)胞膜的一系列生物化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致肥大細(xì)胞潰破和嗜堿性顆粒脫顆粒，促使釋放多種生物活性物質(zhì)，如組胺、5-羥色胺和緩激肽釋放出來，引起變態(tài)反應(yīng)癥狀[3]。IgE抗體存在于過敏體質(zhì)個體的血清中，因此可以采用檢測血清中sIgE和總IgE水平來發(fā)現(xiàn)過敏原。

表1 200例過敏性患者9種常見過敏原特異性IgE(sIgE)抗體檢測結(jié)果

本文檢測了瑞金市過敏原患者血清中的總IgE和常見過敏原sIgE水平，總IgE陽性率為78.0%，sIgE的陽性率為44.5%，血清中總IgE和過敏原sIgE水平并不是完全一致，部分總IgE強陽性患者血清中未檢出過敏原特異性IgE，這可能是由于9種過敏原以外的其他過敏原引起的過敏性反應(yīng)，或者由于患有其他非過敏性的疾病(如寄生蟲感染等)引起了總IgE的升高，同樣應(yīng)引起臨床重視。

吸入性過敏原陽性率最高的為戶塵螨(15.0%)，說明戶塵螨是瑞金市最常見的過敏原，這與以往的一些研究結(jié)果相符[4-6]。由于戶塵螨孳生于人類居住環(huán)境，在床墊、被褥、地毯、沙發(fā)等家具中多見，人們極易接觸到，因此，控制戶塵螨孳生、避免接觸戶塵螨是防治呼吸道過敏癥的首要任務(wù)。其次為樹花粉組合(6.0%)和霉菌組合(5.0%)，這可能與贛南地區(qū)地處中亞熱帶南緣，氣候比較潮濕溫?zé)幔置懿?，樹木繁多且開花季節(jié)較長，同時霉菌也更容易繁殖生長有關(guān)。

食入性過敏原陽性率最高的是蟹 (12.0%)，與閉雄杰[7]報道蝦、蟹是最常見的食物過敏原類似，說明食物過敏原與地理位置、飲食習(xí)慣有明顯關(guān)系，瑞金市為江南魚米之鄉(xiāng)，水產(chǎn)業(yè)很發(fā)達(dá)，魚蝦蟹是該市的主要副食品之一，因此蟹成為本地區(qū)主要的食物過敏原，蝦的陽性率較低(1.5%)可能與所檢人群的飲食偏好、個人體質(zhì)以及食用蝦蟹的時節(jié)不同有關(guān)。

綜上所述，應(yīng)用ELISA對過敏性疾病患者進行血清過敏原總IgE和特異性IgE水平檢測，可以為臨床確認(rèn)過敏性體質(zhì)、尋找相應(yīng)過敏原，了解本地區(qū)主要致病過敏原分布情況以及預(yù)防、診斷和治療過敏性疾病提供依據(jù)。根據(jù)本文檢測結(jié)果，可以認(rèn)為，戶塵螨、蟹、霉菌和樹花粉是誘發(fā)瑞金市過敏性疾病的重要過敏原，過敏性疾病的預(yù)防和治療研究工作應(yīng)當(dāng)主要圍繞這幾類過敏原展開。

由于本次研究的病例數(shù)量有限，測定的過敏原種類不多，可能結(jié)果會有一些偏差。因此在今后的研究中需要加大有代表性的病例數(shù)量，增加檢測的過敏原種類，進一步研究瑞金市不同季節(jié)、不同臨床癥狀的過敏原分布，為過敏性疾病的防治進一步指明方向。

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[2]WHO Workshop.Asthma management and prevention[R].Geneva:The Globe Initiative for Asthma Secretariate,1996:1-2.

[3]吳石金,孫培龍.簡明免疫學(xué)原理[M].北京:化學(xué)化工出版社,2008:137.

[4]王魏,魏慶宇.塵螨引起的變態(tài)反應(yīng)性疾病及其防治進展[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2008,10(6):65-66.

[5]龐偉鴻,劉紅杏,寧學(xué)玲.變態(tài)性疾病患者血清特異性過敏原檢測[J]．現(xiàn)代醫(yī)院雜志，2009,9(3):89-90.

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