陳慧丹，王友基

(福建省立醫(yī)院檢驗(yàn)科，福建醫(yī)科大學(xué)省立臨床學(xué)院，福建 福州 350001)

M蛋白是由漿細(xì)胞或B淋巴細(xì)胞單克隆性惡性增殖而產(chǎn)生一種大量的異常免疫球蛋白。惡性M蛋白血癥多見于多發(fā)性骨髓瘤(lgG型、lgA型和輕鏈型)、巨球蛋白血癥(lgM型)及惡性淋巴瘤，它們都是以M開頭的疾病，故稱為“M蛋白”。多發(fā)性骨髓瘤(MM)是M蛋白病中最常見類型，在中國的年發(fā)病率約為十萬分之一，占所有惡性腫瘤的1%，(在惡性血液系統(tǒng)疾病中占有10%)[1]，隨著人口的老齡化，特別是城市人口進(jìn)入了老齡化，其發(fā)病率有逐年增高的趨勢(shì)[2]，對(duì)人們的生命和生活質(zhì)量構(gòu)成了越來越嚴(yán)重的威脅。本文對(duì)48例M蛋白血癥患者的免疫固定電泳(IFE)和免疫球蛋白定量檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較分析，說明免疫固定電泳對(duì)M蛋白的診斷和分型有具重要意義。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 2012年1月至9月本院門診及住院43例多發(fā)性骨髓瘤和5例巨球蛋白血癥 (均符合國內(nèi)診斷標(biāo)準(zhǔn)[3])共48例M蛋白血癥患者，年齡在 47~89歲(中位年齡 64歲)，男30例，女 18例;免疫球蛋白正常對(duì)照組采用的是健康體檢者35例，年齡在40~88歲，男20例，女15例。

1.2 試劑與方法 免疫固定電泳采用法國Sebia公司試劑盒及配套抗體；免疫球蛋白定量測(cè)定采用德靈BNⅡ儀器及配套試劑,均嚴(yán)格按儀器說明書進(jìn)行操作。

1.3 結(jié)果統(tǒng)計(jì) 結(jié)果采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié)果

2.1 免疫固定電泳的結(jié)果判讀 正常陰性樣本的沉淀帶呈彌散分布，見圖1。異常陽性樣本則出現(xiàn)界限分明、狹窄且濃染的沉淀帶(即M帶)；重鏈或輕鏈的M帶應(yīng)與蛋白電泳的M帶位處于同一水平，呈現(xiàn)“鏡影式”分布，見圖2。

圖1 正常人IFE圖

圖2 出現(xiàn)在γ區(qū)帶的IgM λ型M蛋白

2.2 免疫固定電泳分型結(jié)果 48例M蛋白血癥患者經(jīng)免疫固定電泳有47例檢出M蛋白，1例未檢出M蛋白，陽性符合率為97.9%，而免疫球蛋白定量只有33例異常，陽性率為68.8%。47例IFE法檢出M蛋白的具體分型見表1。從表1可見多發(fā)性骨髓瘤(lgG型、lgA型和輕鏈型)最多見有42例，占89.4%，其中l(wèi)gG型百分比最高，達(dá)51.06%。

表1 47例IFE法檢出M蛋白的患者分型結(jié)果[n(%)]

2.3 M蛋白血癥患者血清中免疫球蛋白定量結(jié)果47例IFE陽性的M蛋白血癥患者免疫球蛋白定量結(jié)果見表2。

表2 47例IFE陽性患者免疫球蛋白含量(x±s，g/L)

2.4 47例IFE陽性患者入院初診斷結(jié)果 對(duì)47例IFE陽性患者病例資料分析顯示，由于M蛋白血癥臨床表現(xiàn)多樣，首發(fā)癥狀可表現(xiàn)為腎臟損害、骨折、感染、高鈣血癥等癥狀，常因此而就診于各科。隨著醫(yī)務(wù)工作人員對(duì)M蛋白血癥認(rèn)識(shí)的提高，對(duì)大多數(shù)患者都能及時(shí)收住血液科。見表3。

表3 47例IFE陽性患者初診斷及入住科室分布

3 討論

多發(fā)性骨髓瘤MM是一種最常見的單克隆骨髓漿細(xì)胞惡性增殖性疾病。本文中48例M蛋白血癥患者經(jīng)免疫固定電泳有47例檢出M蛋白，陽性符合率高達(dá)97.9%，分型以lgG型居多；其中檢測(cè)到1例無M帶的MM患者,其血清免疫球蛋白、輕鏈含量也正常,可考慮為未分泌型MM；由于各分型有其相應(yīng)的特殊臨床表現(xiàn)和不同的預(yù)后，根據(jù)不同的免疫固定電泳分型結(jié)果，可以指導(dǎo)臨床醫(yī)生選擇更適合患者的個(gè)體化治療方法，以達(dá)到緩解病情或治愈的目的。從表2可以看出lgG型組lgG含量明顯升高，lgA、lgM含量明顯下降；lgA型組lgA含量明顯升高而lgG、lgM含量明顯下降；10例單純輕鏈型MM病人lgG、lgA、lgM均低于正常，可能是高濃度異常M蛋白通過反饋機(jī)制抑制正常免疫球蛋白的合成。實(shí)驗(yàn)中我們還注意到，有4例患者經(jīng)過治療，其血液中M蛋白逐漸消失，臨床癥狀緩解，說明IFE可用于病情監(jiān)測(cè)及預(yù)后判斷。此外，由于目前MM一般通過X線攝片、組織活檢、骨髓涂片來確診，可細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查往往要在患者多部位進(jìn)行多次穿刺，且瘤細(xì)胞＞10%才可診斷，加重患者負(fù)擔(dān)，而IFE對(duì)單克隆球蛋白的檢出敏感度為5～10mg/L，因此在診斷MM時(shí)比骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查更具有早期診斷價(jià)值[4]。總之，當(dāng)臨床觀察提示有疑診病例，或出現(xiàn)白／球蛋白比例明顯倒置、高蛋白血癥時(shí)應(yīng)進(jìn)行免疫固定電泳分析[5]。

1969年Alper使用IFE法進(jìn)行蛋白多態(tài)性的研究，經(jīng)過多年的發(fā)展現(xiàn)在IFE被廣泛應(yīng)用，它包括瓊脂糖凝膠蛋白電泳和免疫沉淀兩個(gè)過程,是目前臨床實(shí)驗(yàn)室用于對(duì)患者血清M蛋白鑒定與分型的常規(guī)檢測(cè)方法,具有檢測(cè)周期短、特異性好、靈敏度高、分辨率強(qiáng)，結(jié)果易于判讀，制成的膠片可長期保存等優(yōu)點(diǎn)[6]。由于IFE法結(jié)合了蛋白電泳的高分辨率和抗原抗體反應(yīng)的特異性,因此抗原抗體的比例要適當(dāng)，如抗原濃度太高，免疫沉淀復(fù)合物會(huì)溶解，出現(xiàn)中空現(xiàn)象而影響結(jié)果的判斷，這時(shí)可適當(dāng)稀釋樣本以調(diào)整抗原濃度；IFE法不推薦使用血漿，因?yàn)槔w維蛋白原會(huì)在電泳區(qū)帶β、γ區(qū)之間形成一條狹窄的沉淀帶，容易與M帶混肴而影響結(jié)果的判斷。

[1]韓青,孫國華.免疫固定電泳技術(shù)在多發(fā)性骨髓瘤診斷及分型中的應(yīng)用檢測(cè)[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,33(2):175-177.

[2]候建,李建勇,邱錄貴.多發(fā)性骨髓瘤理論與實(shí)踐[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2011:22-23.

[3]葛均波,徐永健.內(nèi)科學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2013：603.

[4]汪麗兒,崔凡,張遼.免疫固定電泳技術(shù)在多發(fā)性骨髓瘤鑒定中的應(yīng)用[J].皖南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2008,27(30):181-183.

[5]盧娉霞,陳鶯,張敬喜.免疫固定電泳在多發(fā)性骨髓瘤免疫分型中應(yīng)用[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2009,27(3):267-268.

[6]謝海濤,顏向軍.42例多發(fā)性骨髓瘤的血清免疫電泳分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2008,26(1):39-40.