和 梅,王秀萍,汪 麟

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科,黑龍江 佳木斯 154003)

癲癇是一種危害較大的神經(jīng)系統(tǒng)疾病,針對癲癇的病因及治療很多學(xué)者一直進行著不懈的努力,近年來隨著人們對自由基認識和深入研究,發(fā)現(xiàn)[1～3]癲癇發(fā)作時伴有活躍的自由基反應(yīng),自由基和脂質(zhì)過氧化作用參與了癲癇的發(fā)病及其發(fā)展過程,并且加重了癲癇患者發(fā)作后的神經(jīng)神經(jīng)細胞損害。清除自由基無疑為治療癲癇開辟了新的途徑,本實驗通過比色法檢測應(yīng)用傳統(tǒng)抗癲癇藥物和應(yīng)用傳統(tǒng)抗癲癇藥物加維生素 E治療后兩組癲癇患者血漿中 MDA和 T-Aoc含量,通過數(shù)據(jù)分析觀察維生素 E輔助治療的效果,為臨床治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 標本來源

隨機采取2011-09～ 2012-09佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院及佳木斯中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科及急診科門急診癲癇患者靜脈血 50例 ,其中男 29例 ,女 21例 ,年齡 15～62歲 ,所 有病 例均經(jīng)過臨床腦電圖檢查,按照2001年國際抗癲癇聯(lián)盟癲癇的診斷標準確診,并給與顱 CT及磁共振檢查,排除腦瘤、低血糖、電解質(zhì)紊亂,心、肝、腎、血液系統(tǒng)等重要臟器疾病者,病程大于3個月,每月發(fā)作≥1次。病程＞ 3個月,且每月發(fā)作次數(shù)大于1,均為部分性發(fā)作的病人 ,取30例健康成人靜脈血為正常組,其中男18例,女12例。

1.2 治療方法

將50例癲癇患者組隨機分為單用左乙拉西坦治療組和左乙拉西坦加維生素 E治療組兩組,將一組給予左乙拉西坦治療,另一組給予左乙拉西坦加維生素 E治療,加維生素 E組給予維生素 E0.1g/d,服藥后每周采用電話隨訪,了解服藥情況、發(fā)作次數(shù)改變及有無不良反應(yīng)發(fā)生等情況,治療滿3個月后,要求患者復(fù)診。

1.3 試劑與儀器

丙二醛試劑盒和總抗氧化力試劑盒均購自上海碧云天生物技術(shù)有限公司。熒光分光光度計 hitach-650-60購自上海精科分析儀器廠。離心機購自 LD4-2,北京醫(yī)用離心機廠。混勻器購自上海旦鼎國際貿(mào)易有限公司。恒溫水浴箱上海卓爵儀器設(shè)備有限公司。可調(diào)微量移液器(1～5mL)購自德國 Peference公司。微量移液管(50Ll～ 1 000Ll)購自上海儀器設(shè)備廠。

1.4 實驗方法

1.4.1 采取各組病例的靜脈血2mL,離心機3500r/min離心10min,分離出血清,于深冷冰柜中(-40℃)內(nèi)保存 ,4～ 8℃緩溶后,進行檢測。檢測方法完全按照試劑盒說明書進行。

1.4.2 治療的三個月中每周進行電話隨訪,并根據(jù)發(fā)作頻率按以下標準進行療效判斷[4]:①完全控制:即完全無發(fā)作,指發(fā)作頻率減少100%,②顯效:指發(fā)作頻率減少75%～99%,③有效:指發(fā)作頻率減少50%～74%,④無效:指發(fā)作頻率減少＜50%,⑤加重:指發(fā)作頻率＞25%。根據(jù)隨訪結(jié)果計算有效率。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用 SPSS.v16.0統(tǒng)計分析軟件,組間比較用 t檢驗和方差分析,P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療前癲癇組和正常組血清中 MDA和 T-Aoc水平比較

我們分別采集了50例癲癇患者的血清樣本和30例正常健康成人的血清樣本數(shù)值 ,見表1。

表1 兩組血漿中 MDA(nmol/mL)和 T-Aoc(uml/mL)含量比較 (±s)

表1 兩組血漿中 MDA(nmol/mL)和 T-Aoc(uml/mL)含量比較 (±s)

注:癲癇組與正常組血漿中 MDA含量比 P＜0.05;癲癇組與正常組血漿中 T-Aoc含量比 P ＜0.05。

組別 n MDA T-Aoc癲癇組 50 42.26± 9.83 11.43± 4.37正常組 30 34.02± 5.55 14.29± 3.64

2.2 癲癇各組治療后血清中 MDA及 T-Aoc水平及比較

我們分別采集了42例癲癇患者的血清樣本分為左乙拉西坦組,左乙拉西坦加維生素 E治療組兩組 ,其數(shù)值見表2～4。

表2 兩組治療后血清中 MDA(nmol/mL)和T-Aoc(uml/mL)含量比較 (±s)

表2 兩組治療后血清中 MDA(nmol/mL)和T-Aoc(uml/mL)含量比較 (±s)

注:左乙拉西坦組與左乙拉西坦加維生素 E MDA含量比較 P＜0.05;左乙拉西坦組與左乙拉西坦加維生素 ET-Aoc含量比較 P＜0.05。

組別 n MDA T-Aoc左乙拉西坦組 22 40.83±9.15 13.97±2.52左乙拉西坦加維生素 E組 20 37.35±7.27 16.80±5.52

表3 各組治療前后血清中 MDA(nmol/mL)含量比較 (±s)

表3 各組治療前后血清中 MDA(nmol/mL)含量比較 (±s)

注:左乙拉西坦組治療前與治療后血漿中 M DA含量比較P＞ 0.05,左乙拉西坦加維生素 E組治療前與治療后血漿中 M DA含量比較 P ＜0.01。

組別 n 治療前 治療后左乙拉西坦組 22 42.16±8.36 40.83±9.15左乙拉西坦加維生素 E 20 42.38±9.12 37.35±7.27

表4 各組治療后血清中 T-Aoc(uml/mL)含量比較 (±s)

表4 各組治療后血清中 T-Aoc(uml/mL)含量比較 (±s)

注:左乙拉西坦組治療前與治療后血漿中 T-Aoc含量比較P＞ 0.05;左乙拉西坦治療前與治療后血漿中 T-Aoc含量比較P＜0.01。

組別 n 治療前 治療后左乙拉西坦 22 11.38±4.56 13.97±2.52左乙拉西坦加維生素 E組 20 13.89±3.24 16.80±5.52

2.3 隨訪

50例癲癇患者中,按規(guī)定接受隨訪并按要求服藥的42例,治療期間因忘記服藥或者經(jīng)濟條件等原因未按要求服藥的 3例 ,不明原因失訪3例,因暫時去外地未能按時復(fù)診者 2例。

表5 左乙拉西坦組和左乙拉西坦加維生素 E組治療后療效觀察比較

3 討論

生物體內(nèi)存在著大量的自由基,氧自由基和脂質(zhì)過氧化反應(yīng)通常在正常情況下在機體內(nèi)處于相對的動態(tài)平衡,從而維持著體內(nèi)的多種免疫反應(yīng)和部分生理生化反應(yīng)的正常進行,當體內(nèi)這種動態(tài)平衡破壞時氧自由基發(fā)生一系列連鎖反應(yīng),一定程度的損害了生物膜結(jié)構(gòu)并影響生物膜功能,以致可能形成細胞透明性病變、纖維化,大面積細胞損傷造成進神經(jīng)、組織、器官等損傷,大量研究證明自由基可以減少致癇灶的谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX),引起神經(jīng)元變性 ,在癲癇的發(fā)病和發(fā)展中起著重要的作用[5～8],氧自由基可以通過攻擊多不飽和脂肪酸,從而誘導(dǎo)發(fā)生脂質(zhì)過氧化作用,通過發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)形成的脂氫過氧化物,在過氧化條件下很容易分解生成丙二醛(MDA)和新的氧自由基等復(fù)雜產(chǎn)物,MDA能從它生成的部位擴散到其他細胞成分中甚至還可以從細胞逸出,從而進一步參與并對細胞膜的連續(xù)性和完整性造成破壞,不但改變了膜的電生理結(jié)構(gòu)特征,而且改變膜了離子通道的活性,造成神經(jīng)原過度放電[9～10],誘發(fā)癲癇發(fā)作。本實驗通過對42例癲癇患者血漿中 M DA含量和 TAOC水平的檢測分析證實,單用抗癲癇藥物治療,雖然起到一定的治療效果,但對體內(nèi)由癲癇發(fā)作導(dǎo)致的自由基增多無明顯的影響,機體的總抗氧化力未見明顯改變,增多的自由基仍可以對機體造成一定的損害,影響癲癇患者的預(yù)后,而加用維生素 E后,由于維生素 E對自由基的清除作用,消除了一部分由癲癇發(fā)作引起的增多的自由基,增強了機體的總抗氧化力,降低了自由基對神經(jīng)元及細胞造成的損害程度,對癲癇患者的治療及其預(yù)后有積極的影響。

[1]向軍,蔣宇鋼.自由基在癲癇發(fā)生及其治療中的研究現(xiàn)狀與進展[J].醫(yī)學(xué)與哲學(xué),2007,28(4):9-12

[2]黃益民,趙輝,虞欣,等.自由基損傷紅細胞膜分子的機理研究[J].生物物理學(xué)報,1997,13(2):315-323

[3]Yamamoto HA,Mohanan PV.Ganglioside GT1Band melatonin inhibit brain mitochondrial DN A damage and seizures induced by kainic acid in mice[J].Brain Res,2003,964(1):1006

[4]宋義清,王藝,周水珍,等.托吡酯轉(zhuǎn)換治療兒童癲癇的臨床研究[J].中國臨床神經(jīng)科學(xué),2003,11:65-66

[5]謝彥,孫紅斌.癲癇與氧自由基 [J].實用醫(yī)院臨床雜志,2009,6(3):126-128

[6]Frantseva M V,Perez Velazquez J L,Hwang P A,et al.Free radicalproduction correlates with death-in an vitro model of epilepsy[J].EurNeurosci,2000,12(4):1431-1439

[7]Murakami H,Matsushima T,Matsuura Y.Development and signif-icance of free radical study in cardiovascular surgery[J].Kyobu Geka,1994,47(4):276-279

[8]Ershov V I,Kogan AKh,Gadaev IIu.Clinical significance of interac-tion between Chlamydia infection(Chlamydia pneumoniae)and freeradical processes during ischemic heart disease[J].Ter Arkh,2001,73(11):44-48

[9]Frantseva M V,Perez Velazquez J L,Tsoraklidis G,et al.Seizureinduced neurodegeneration in the kindlingmodel of epilepsy[J].Neuroscience,2000,97(3):431-435

[10]Pellmar T.Electrophysiological correlates of peroxide damage in guineapig hippocam-pus in vitro[J].Brain Res,1986,364:377