文/洪 霓

一、病毒種類

我國(guó)梨樹(shù)病毒研究始于20世紀(jì)90年代初期，通過(guò)指示植物接種與血清學(xué)鑒定技術(shù)結(jié)合，明確了我國(guó)北方種植梨樹(shù)的病毒種類主要有3種，根據(jù)在指示植物上的癥狀表現(xiàn)，確定為梨脈黃病毒（Pear vein yellowing virus，PVYV）、梨環(huán)紋花葉病毒（Pear ring mosaic virus，PRMV）和蘋(píng)果莖溝病毒（Apple stem grooving virus,ASGV）。并經(jīng)在蘋(píng)果病毒指示植物上交互接種，證實(shí)梨脈黃病毒和梨環(huán)紋花葉病毒分別與蘋(píng)果樹(shù)上發(fā)生的蘋(píng)果莖痘病毒 （Apple stem pitting virus,ASPV）和褪綠葉斑病毒（Apple chlototic leaf spot virus,ACLSV）為同種病毒。對(duì)蘋(píng)果銹果類病毒（Apple scar skin viroid,ASSVd）的為害特點(diǎn)和傳播途徑進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，明確引起蘋(píng)果花臉和銹果的病原均為蘋(píng)果銹果類病毒；我國(guó)早在20世紀(jì)50年代即發(fā)現(xiàn)梨樹(shù)與蘋(píng)果混栽地區(qū)的蘋(píng)果銹果病有明顯加重趨勢(shì)，經(jīng)生物學(xué)接種和雙向電泳分析發(fā)現(xiàn)，梨樹(shù)為蘋(píng)果銹果類病毒的潛在寄主，雖然未能證明梨樹(shù)是否受蘋(píng)果銹果病的影響，但該類病毒的機(jī)械傳播特點(diǎn)表明其具有從梨樹(shù)傳播至蘋(píng)果樹(shù)的風(fēng)險(xiǎn)，該結(jié)果為指導(dǎo)梨樹(shù)銹果病的防控提供了重要參考依據(jù)。本世紀(jì)初開(kāi)始，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)對(duì)我國(guó)各地種植的梨樹(shù)病毒侵染狀況進(jìn)行了系統(tǒng)調(diào)查，結(jié)果顯示蘋(píng)果莖溝病毒、蘋(píng)果莖痘病毒和褪綠葉斑病毒在梨樹(shù)上的侵染率均高達(dá)80%以上。

二、病毒病

近些年的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，局部地區(qū)栽培梨樹(shù)的病毒病為害有加重趨勢(shì)，推測(cè)與頻繁高接、品種替換及樹(shù)體老化而抗性降低有關(guān)。這些病害在田間梨樹(shù)上的癥狀輕重因品種和栽培條件不同而有一定差異。常見(jiàn)病害有以下幾種：

（1）梨脈黃?。罕憩F(xiàn)為梨葉片沿葉脈出現(xiàn)褪綠，嚴(yán)重時(shí)葉脈黃化。這類病害通常與蘋(píng)果莖痘病毒侵染有關(guān)。

（2）梨環(huán)紋花葉?。翰≈昃植咳~片出現(xiàn)環(huán)狀褪綠、褪綠斑塊或斑點(diǎn)。這類病害通常與蘋(píng)果褪綠葉斑病毒侵染有關(guān)。

（3）石痘?。荷贁?shù)品種果實(shí)出現(xiàn)畸形，果面不規(guī)則凹陷，切開(kāi)果實(shí)可見(jiàn)果肉中不均勻分布的石化細(xì)胞，堅(jiān)硬且很易褐化。這類病害通常與蘋(píng)果莖痘病毒侵染有關(guān)。

梨脈黃病和梨環(huán)紋花葉病通常在田間植株上混合發(fā)生，導(dǎo)致病害加重，這些病害癥狀一般在春末最為明顯。此外，在多次高接的梨樹(shù)上病毒病發(fā)生較重，產(chǎn)生類似衰退癥狀，植株生長(zhǎng)及果品產(chǎn)量和品質(zhì)均受到嚴(yán)重影響。

蘋(píng)果莖痘病毒引起梨葉片葉脈黃化

病毒誘導(dǎo)梨果實(shí)產(chǎn)生褐色環(huán)斑

蘋(píng)果褪綠葉斑病毒誘導(dǎo)梨葉片產(chǎn)生褪綠環(huán)斑

三、防治方法

梨樹(shù)為多年生植物，通常采用無(wú)性繁殖材料嫁接的方式繁殖，病毒在梨植株中通過(guò)輸導(dǎo)組織進(jìn)行擴(kuò)散，因此，采用病株接穗作為高接和繁殖材料很易導(dǎo)致病毒的傳播和病毒病的擴(kuò)展蔓延，目前尚未發(fā)現(xiàn)這些病毒通過(guò)媒體昆蟲(chóng)傳播，這些病毒也不通過(guò)種子或嫁接工具傳播。在當(dāng)今技術(shù)條件下，尚無(wú)對(duì)果樹(shù)病毒病有效的防治藥劑，因此，可通過(guò)栽培無(wú)病毒苗木防止梨樹(shù)病毒病害的發(fā)生。世界發(fā)達(dá)國(guó)家均對(duì)果樹(shù)種質(zhì)資源提出了嚴(yán)格的要求，建立了較完善的無(wú)病毒種質(zhì)培育、保存及監(jiān)控的技術(shù)及管理體系。無(wú)病毒苗木根系發(fā)達(dá)，抗逆性強(qiáng)，適合山坡瘠薄地栽培，有助于解決糧、果爭(zhēng)地矛盾，而且減少化肥用量，減少環(huán)境污染，符合生態(tài)農(nóng)業(yè)要求。

早期用于梨樹(shù)病毒脫毒技術(shù)的主要是盆栽植株熱處理與微芽嫁接相結(jié)合和莖尖培養(yǎng)，其脫毒效率相對(duì)較低，為30%左右，熱處理后切取合適大小的莖尖是提高脫除病毒效果的關(guān)鍵。為提高梨樹(shù)病毒脫除效果，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)采用梨離體植株熱處理和熱處理與化學(xué)處理相結(jié)合的方法，使脫除病毒效率得到明顯提高。研究結(jié)果顯示，在34/42℃（16/8小時(shí)）處理50天后取0.5 mm莖尖培養(yǎng)可完全脫除以上3種梨樹(shù)病毒，采用病毒醚25μg/mL結(jié)合35℃處理40天后切取的0.5～1.0 mm莖尖，所獲再生植株的病毒脫除率可達(dá)100%。目前，利用建立的脫毒技術(shù)，獲得一批無(wú)毒沙梨種質(zhì)，為梨無(wú)病毒化栽培奠定了良好基礎(chǔ)。

四、病毒檢測(cè)

在果樹(shù)種質(zhì)資源的交換和引進(jìn)過(guò)程中，很易導(dǎo)致病毒隨繁殖材料傳入和擴(kuò)散。建立高效、靈敏和快速的病毒檢測(cè)技術(shù)對(duì)加強(qiáng)繁殖材料的病毒監(jiān)測(cè)是十分重要的。近些年，我國(guó)在深入了解梨樹(shù)病毒種類及梨樹(shù)病毒生物學(xué)和分子特性基礎(chǔ)上，相繼開(kāi)展了針對(duì)梨病毒的血清學(xué)檢測(cè)試劑研制和分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)的研究，制備了抗ASGV、ASPV和ACLSV的多克隆抗體，并應(yīng)用于梨植株攜帶病毒的檢測(cè)；通過(guò)引物設(shè)計(jì)和核酸提取方法、擴(kuò)增條件及反應(yīng)體系優(yōu)化，使梨病毒的分子檢測(cè)效果得到明顯提高，為梨無(wú)病毒種質(zhì)的培育和種苗調(diào)運(yùn)的檢疫提供了重要的技術(shù)支撐。隨著梨脫病毒種質(zhì)培育的加強(qiáng)和大量脫病毒種苗的繁育和種植，建立適合大量樣本檢測(cè)的高通量和高靈敏檢測(cè)技術(shù)是目前的研究重點(diǎn)。