王曉寧，睢超霞

漯河醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校 ，河南漯河 462002

目前，我國的對農(nóng)藥的使用最多的是有機磷農(nóng)藥，該農(nóng)藥具有毒性高的特點，由于其的廣泛使用，使得近年來瓜果農(nóng)藥殘留中毒事件發(fā)生的概率提高。在農(nóng)產(chǎn)品中，對殘留農(nóng)藥存在所受到的關(guān)注程度逐漸提高，對農(nóng)藥殘留、使用加強管理勢在必行，因此，建立靈敏、可靠、簡便、快捷的監(jiān)測手段是當(dāng)務(wù)之急。

1 SPME-GCMS 簡介

一般情況下，對有機磷污染物的測定首先要采用有機溶劑，或者超臨界流體萃取等技術(shù)對污染樣品進行處理，這種方法在分離凈化的過程中存在一定的缺陷，如工作量大、步驟繁瑣、成本高、好市場，且所用的有機溶劑對生態(tài)環(huán)境、人體健康都會產(chǎn)生負面影響。SPME，及固相微萃取技術(shù)是一種無溶劑、直接的固體萃取分離技術(shù)，該技術(shù)采用不同色譜固定相或者吸附劑，涂于一根熔融石英纖維上，制成萃取頭，然后直接從樣品中提取分離欲測組分，固相微萃取裝置實質(zhì)就是微量進樣器，與氣相色譜儀進樣口相接，對待測物進行高溫?zé)峤?。SPME 最大的優(yōu)勢就是可以與GC 聯(lián)用，集萃取、分離、進樣、濃縮于一體，不需要有機溶劑，簡單方便。采用SPME 方法對農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留進行測定目前還不常見。本文主要采用SPME 和GCMS 聯(lián)用的方法，對蔬菜殘留有機磷農(nóng)藥進行分析測定，建立一種先進可靠、實用有效的方法，為藥品分析奠定理論基礎(chǔ)。

2 儀器、材料及方法

2.1 儀器、材料

SPME 裝置，氣相色譜儀（HP5890II），聚二甲基硅氧烷萃取頭（膜厚100μm），磁力攪拌臺（nuvoaII），勻漿器（National）。

有機磷農(nóng)藥標準品，去離子水，茼蒿。

2.2 方法

1）蔬菜樣品預(yù)處理。取新鮮茼蒿50g，置于勻漿器內(nèi)剪碎，加入去離子水，越150g，攪拌勻漿5min，即得到蔬菜勻漿液，總體積為150mL，按實驗需求，勻漿后加入4 種有機磷農(nóng)藥，與蔬菜組織混合；

2）SPME 萃取及GCMS 進樣。去蔬菜勻漿液5mL 裝于10mL 小容器瓶中，置于磁力攪拌臺上，在常溫下進行攪拌，轉(zhuǎn)速為中等速度。然后在勻漿液中插入SPME 萃取頭，一段時間后取出，然后放于去離子水中清洗，清洗不能超過5s，將殘留在萃取頭上的蔬菜碎屑除掉，將萃取頭縮進SPME 裝置針管內(nèi)，插入氣相色譜儀，推出萃取頭，過5min 后抽出萃取頭，拔出針管。萃取頭每次用完以后，放置在GC 進樣口處，在270℃高溫及He 氣體條件下處理二三十分鐘，一般情況下，20min 后就可以保證萃取頭上無農(nóng)藥殘留；

3）氣相色譜條件。檢查室溫度：290℃，氣化室溫度：270℃、載氣：He，5mL/min；補充氣：N2，15mL/min；升溫：初溫35℃，持續(xù)6min，然后按照30℃/min，上升到200℃，停止3min，再以10℃/min 上升到280℃，持續(xù)15min。此時，不分流進樣，5min 后打開分流閥。

3 試驗結(jié)果及討論

3.1 解熱時間

把萃取得到的附著在SPME 萃取頭上的待測化合物插入氣相色譜儀，氣化室270℃高溫目標進行解熱，依靠流動相盜圖色譜柱，這個環(huán)節(jié)是SPME 與GCMS 聯(lián)用的重要步驟。在萃取等條件相同的基礎(chǔ)上，萃取頭的解熱時間分別為1、2、···、6 分鐘時，GCMS 影響無明顯變化，四種有機磷農(nóng)藥相對標準偏差分別為：二嗪農(nóng)4.75%、甲拌磷3.63%、乙硫磷7.65%、甲基對硫磷4.33%，因此可以知道，高溫?zé)峤獾臅r間可能較短，為了方便操作，使試驗條件一直，本文所選定的解熱時間均為5min。

3.2 樣品勻漿處理

4 種有機磷農(nóng)藥都具有水溶性，不易揮發(fā)。對這些有機磷農(nóng)藥進行提取分離需要借助SPME 萃取頭，先制備液態(tài)樣品，反復(fù)試驗，采用上文所述預(yù)處理步驟，得到的蔬菜勻漿液比較均勻，蔬菜顆粒較小，有利于萃取，最主要的是有機磷農(nóng)藥的損失少，穩(wěn)定性好。

3.3 離子強度

溶液中的離子強度的增加可以在水樣中添加氯化鈉，從而有效的降低有機化合物的溶解，改善萃取的效率。為了檢驗SPME 萃取時是否收到漿液中離子強度增大的影響，設(shè)計實驗進行檢驗：取3 份漿液，各5mL，個加入標準混合農(nóng)藥，再加入NaCl 分別為0g、0.5g 和1g，混合后進行萃取，然后進行GC 測定，測定結(jié)果為，除NaCl 含量不同，其余條件均相同，氯化鈉含量越高，萃取的效率越低。因此可以肯定，加無機鹽的方法提高萃取效率并不是適合每一種待測組分。

3.4 攪拌速度

在萃取過程中，對試樣反復(fù)進行攪拌，使待測組分均勻，達到分配平衡。本文所進行的試驗攪拌速度均為中等速度。如果分別采用不攪拌、低速攪拌、中速攪拌和高速攪拌，經(jīng)過試驗發(fā)現(xiàn)，對于一種農(nóng)藥組分而言，在其余條件均相同時，SPME 吸附量上不攪拌小于高速攪拌8%，低速攪拌和中速攪拌分別達到高速攪拌的83%和87%?？梢姴粩嚢钑r的擴撒速度最慢，主要是因為固相表面有一層靜止水膜。在攪拌時，水膜破壞掉，吸附量增大。雖然高速攪拌時吸附量最大，萃取裝置中小磁轉(zhuǎn)子不穩(wěn)定，可能會出現(xiàn)不確定因素，因此選擇中等攪拌速度。

3.5 其它因素

除上述幾種影響因素之外，還有平衡時間、定量可行性分析等因素也會影響到試驗的結(jié)果，在實際試驗中，只要保持一段萃取 時間，就能保證實驗結(jié)果，沒有必要等到平衡。為了提高精密度及靈敏度，需要達到一定的萃取量。雖然固相微萃取技術(shù)是一種動態(tài)平衡技術(shù)，在一些相同條件下，采用外標法測量是可以的，主要是被測樣品相同并且干凈的影響。此外，如果存在適用的內(nèi)標物，進行稱重時加入，可以校正處理時的損失，使得樣品處理和分析定量更加的準確。

[1]楊新磊，羅明標，唐毓萍.液相微萃取技術(shù)在生物樣品藥物檢測中的應(yīng)用[J].藥物分析雜志，2007(12).

[2]屈穎.萃取技術(shù)在藥物分析中的應(yīng)用[J].天津藥學(xué)，2009(1).

[3]陳軍輝，楊佰娟，李文龍.加速溶劑萃取技術(shù)在中藥有效成分分析中的應(yīng)用[J].色譜，2007(5).

[4]黃星，馬果花，王芳琳.液相微萃取技術(shù)及其在毒物分析中的應(yīng)用[J].分析測試學(xué)報，2008(3).