葉芳麗，張平安，祝成亮

（武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北武漢430060）

·論著·

乙型肝炎患者Pre-S1、Pre-S2抗原與HBV-DNA的相關(guān)性分析

葉芳麗，張平安，祝成亮

（武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北武漢430060）

目的探討乙型肝炎病毒(HBV)Pre-S1、Pre-S2抗原與HBV-DNA的相關(guān)性。方法對(duì)180例標(biāo)本采用ELISA方法檢測(cè)前S1抗原、前S2抗原，采用熒光定量PCR方法檢測(cè)HBV DNA。結(jié)果在150例HBV DNA陽(yáng)性的乙肝患者中，Pre-S1、Pre-S2的陽(yáng)性率分別為89.33%和86.00%；30例HBV DNA陰性的乙肝患者中，Pre-S1、Pre-S2的陽(yáng)性率分別為36.67%和26.67%。HBV DNA陽(yáng)性和陰性患者的Pre-S1、Pre-S2的陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論隨著HBV DNA載量的增加，HBV乙肝患者的Pre-S1、Pre-S2的陽(yáng)性率逐漸升高。Pre-S1、Pre-S2抗原與HBV DNA載量具有高度相關(guān)性，可作為HBV DNA檢測(cè)的有效補(bǔ)充。

乙型肝炎病毒；Pre-S1抗原；Pre-S2抗原；HBV DNA

乙型肝炎是由乙肝病毒(HBV)引起的、以肝臟炎性病變?yōu)橹鞑⒖梢鸲嗥鞴贀p害的一種傳染病。因此，它已成為嚴(yán)重威脅人類健康的世界性疾病，也是我國(guó)當(dāng)前流行最為廣泛、危害性最嚴(yán)重的一種傳染病。Pre-S1、Pre-S2抗原是臨床上常用于HBV的檢測(cè)指標(biāo)，本研究主要探討HBV DNA與Pre-S1、Pre-S2抗原的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象選取2012年3～6月門診年齡在20～60歲的乙肝患者，其中HBV DNA載量為＜102copies/ml 30例；103copies/ml、104copies/ml、105copies/ml、106copies/ml、107copies/ml各30例，共計(jì)180例乙肝患者血清，年齡平均41.7歲。所有研究對(duì)象均于清晨靜脈抽血，分離血清后待測(cè)。

1.2 檢測(cè)方法采用雙抗體ELISA法檢測(cè)患者血清Pre-S1抗原、Pre-S2抗原，Pre-S1抗原試劑由上海長(zhǎng)征復(fù)星醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供；Pre-S2抗原由康華生物技術(shù)有限公司提供。洗板機(jī)為美國(guó)伯樂(lè)自動(dòng)洗板機(jī)。采用熒光定量PCR法檢測(cè)HBV DNA(羅氏公司)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS17.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，率的比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HBV DNA陰性和陽(yáng)性患者血清中Pre-S1、Pre-S2抗原的比較在180例HBV感染患者中，HBV DNA陰性患者30例，Pre-S1陽(yáng)性率為36.67%。Pre-S2陽(yáng)性率為26.67%；HBV DNA陽(yáng)性患者150例，Pre-S1陽(yáng)性率為89.33%，Pre-S2陽(yáng)性率為86.00%；HBV DNA陰性患者和陽(yáng)性患者的Pre-S1、Pre-S2陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表1。

表1 HBV DNA陰性和陽(yáng)性患者血清中Pre-S1、Pre-S2抗原的比較[例(%)]

2.2 Pre-S1、Pre-S2抗原與HBV DNA載量相關(guān)性Pre-S1陽(yáng)性率與HBV DNA、載量相關(guān)系數(shù)r=0.986，P＜0.001；Pre-S2陽(yáng)性率與HBV DNA載量相關(guān)系數(shù)r=0.999，P＜0.001；Pre-S1、Pre-S2抗原與HBV DNA載量具有高度相關(guān)性。

3 討論

乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus，HBV)是一種嚴(yán)重危害人類健康的傳染性疾病，給人類健康帶來(lái)極大危害。我國(guó)是感染的流行區(qū)，不僅人群感染率高，而且有些HBV感染可能由于外周耐受等影響轉(zhuǎn)變?yōu)槁愿腥?。HBV DNA是判定HBV感染者病毒是否復(fù)制和當(dāng)前有無(wú)傳染性的主要指標(biāo)[1]。

乙型肝炎病毒(HBV)外膜蛋白包括S、前S1和前S2三種蛋白。前S1蛋白在病毒感染、裝配、復(fù)制和刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)等方面有十分重要的作用。Pre-S2抗原是乙肝病毒外殼中蛋白的一部分，Pre-S2較S蛋白有更強(qiáng)的免疫原性，能提高機(jī)體對(duì)S蛋白的免疫反應(yīng)，在保護(hù)機(jī)體免受HBV感染中可能有重要作用[2]。HBV DNA的定量即檢測(cè)乙肝病毒在血液中的含量。HBV DNA是衡量乙肝病毒復(fù)制最靈敏、最精確的證據(jù)，是判斷患者有無(wú)傳染性最直接的指標(biāo)。

本研究結(jié)果顯示，在乙型肝炎患者中，隨著HBV DNA載量的升高，血清中Pre-S1、Pre-S2的陽(yáng)性率逐漸增高，血清Pre-S1、Pre-S2抗原的檢出率與HBV DNA的檢出率相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，因此可證明，血清Pre-S1、Pre-S2抗原是反應(yīng)HBV復(fù)制的良好指標(biāo)。我們發(fā)現(xiàn)，在HBV DNA(+)病毒復(fù)制較強(qiáng)的時(shí)候，仍有Pre-S1、Pre-S2抗原陰性存在，我們考慮HBV前C區(qū)的基因或C區(qū)啟動(dòng)子的突變，使宿主的免疫功能增強(qiáng)。

相關(guān)研究表明，Pre-S1、Pre-S2參與介導(dǎo)HBV顆粒粘附宿主肝細(xì)胞，并直接反映HBV DNA的血清濃度，是反映HBV復(fù)制及傳染的可靠血清學(xué)指標(biāo)[3]。譚立明等[4]研究結(jié)果顯示，Pre-S1、Pre-S2抗原與HBV呈不同程度的相關(guān)性，有獨(dú)立的檢測(cè)價(jià)值，是HBV檢測(cè)和復(fù)制較為直接的標(biāo)志，對(duì)HBV檢測(cè)起了重要的補(bǔ)充作用。

綜上所述，乙肝Pre-S1、Pre-S2抗原是判斷HBV感染病毒是否活動(dòng)和較大傳染性的標(biāo)志，可作為HBV DNA檢測(cè)的有效補(bǔ)充和對(duì)照，為乙肝早期及時(shí)、準(zhǔn)確的診斷提供了可靠的依據(jù)，也是療效觀察、預(yù)后評(píng)估的一個(gè)可靠標(biāo)志。

[1]王軍.探討188例乙型肝炎病毒前S2抗原的檢測(cè)及其臨床意義[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2007,4(26):27-28.

[2]Barrera A,Guem B,Notvall L,et a1.Mapping of the hepatitis B virus pre-Sl domain invoIved in receptor reoognition[J].J Virol, 2005,79:9786-9798.

[3]馬艷春.乙肝患者前S1抗原前S2抗原與HBV-DNA和HBV-M的相關(guān)性分析[J].濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009,32(4):268-269.

[4]譚立明,樂(lè)愛(ài)平,段麗玲,等.乙肝病毒Pre-S1、S2抗原檢測(cè)在乙型肝炎臨床診斷中的價(jià)值[J].江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn),2006,24(10):413-414.

Correlation analysis between Pre-S1,Pre-S2 antigen and HBV DNA in patients with HBV infection.

YE Fang-li,ZHANG Ping-an,ZHU Cheng-liang.Department of Clinical Laboratory Sciences,Renmin Hospital of Wuhan University,Wuhan 430060,Hubei,CHINA

ObjectiveTo explore the relationship between Pre-S1,Pre-S2 and HBV-DNA.MethodsSamples of 180 patients infected with HBV were collected and measured for Pre-S1 antigen and Pre-S2 antigen by ELISA. The HBV-DNA was measured by qRT-PCR.ResultsAmong the 150 patients positive for HBV DNA,the positive rates of Pre-S1and Pre-S2 were 89.33%and 86.00%,respectively.Among the 30 patients negative for HBV DNA, the positive rates of Pre-S1 and Pre-S2 were 36.67%and 26.67%,respectively.There was statistically significant difference between the positive rate of Pre-S1 and Pre-S2 antigens in both positive and negative HBV DNA patients (P＜0.05).ConclusionThe positive rate of Pre-S1 and Pre-S2 in HBV patients increases with the increasing of HBV DNA capacity.Pre-S1,Pre-S2 antigens showed significant correlation with HBV DNA capacity,which can be used as complement for HBV DNAdetection effectively.

Hepatitis B virus;Pre-S1 antigen;Pre-S2 antigen;HBV DNA

R512.6+2

A

1003—6350（2013）03—0384—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2013.03.0167

2012-09-10)

國(guó)家臨床重點(diǎn)?？平ㄔO(shè)項(xiàng)目（編號(hào)：2009ZX10004-207）

張平安。E-mail：zhangpingan@yahoo.com.cn