馬雪興，徐桂冬，姚金良，李 淵

為了探究復(fù)方降脂膠囊對血栓形成的影響，特采用小鼠進行實驗并對結(jié)果進行統(tǒng)計分析，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般材料 實驗動物包括SD大鼠80只，體質(zhì)量為210～260g，平均 (234.19±11.7)g;ICR小鼠80只，體質(zhì)量19～23g，平均 (20.4±0.7)g。以上實驗動物均由蘇州大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號為SCXK(蘇)2007-0001。

1.2 實驗試劑 本實驗采用的復(fù)方降脂膠囊為南京中醫(yī)藥大學(xué)所提供，含生藥8.9g，藥品為棕褐色粉末狀。實驗用ADP由美國sigma公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號:YY112-4B056W;曲克蘆丁由上海繁盛藥業(yè)有限公司提供;鹽酸腎上腺素注射液由南京未來氨基酸有限公司提供。

1.3 實驗儀器 實驗體血栓形成測定儀由包頭醫(yī)學(xué)院心血管研究室提供，型號為BT8723;FIRERA超純水機由南京斯特邦電子儀器設(shè)備有限公司提供，型號為FT72H19;電子天平及分析天平均有南京斯特邦電子儀器設(shè)備有限公司提供。

1.4 實驗方法

1.4.1 探究復(fù)方降脂膠囊對于大鼠頸總動脈在受到電流損傷后混合血栓形成的影響 選取SD大鼠80只，按照隨機分組的原則將其分為4組，分別為實驗A組 (曲克蘆丁組)、實驗B組 (高劑量組)、實驗C組 (低劑量組)和對照組 (0.9%氯化鈉溶液組)，各20例。A組用藥為曲克蘆丁48mg/kg;B組用藥為曲克蘆丁40g/kg;C組用藥為曲克蘆丁14g/kg，連續(xù)灌胃給藥5d，給藥容積為10ml·kg-1·d-1，每次給藥30min后開始進行刺激。在模型制備時先將大鼠腹腔內(nèi)注入10%的水合氯醛350mg/kg進行麻醉，采用仰臥位固定，做頸部正中線切口將右側(cè)的頸總動脈進行分離，采用血栓形成測定儀放置于近心端進行電流刺激，在給藥后30min開始，刺激電流調(diào)整為2mA連續(xù)刺激7min，當(dāng)接通電流后熱效應(yīng)引起的血管損傷會激活凝血系統(tǒng)促使血小板聚集形成混合血栓，由于血栓的形成血管內(nèi)的血流會被阻斷，溫宿也隨之降低，此時溫度探頭能夠測定到溫度的變化，以儀器報警時間作為血管栓閉時間，從開始刺激到血管栓閉時間作為血栓形成時間 (OT)。

1.4.2 探究復(fù)方降脂膠囊對于小鼠由于ADP混合致栓劑導(dǎo)致的肺栓塞的影響 用0.2ml ADP、0.67ml腎上腺素以及0.9%氯化鈉溶液混合制成ADP混合致栓劑，定容至10ml備用。選取ICR小鼠80只，按照隨機分組的原則將其分為4組，分別為實驗A組 (曲克蘆丁組)、實驗B組 (高劑量組)、實驗C組 (低劑量組)和對照組 (0.9%氯化鈉溶液組)各20例。A組用藥為曲克蘆丁48mg/kg;B組用藥為40g/kg;C組用藥為14g/kg，連續(xù)灌胃給藥5d，給藥容積為10ml·kg-1·d-1。同樣在給藥30min后按照0.075ml/10g的劑量進行靜脈注入ADP混合致栓劑，記錄小鼠從注射致栓劑開始到恢復(fù)自主活動能力的時間。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 15.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)處理，計量資料以(±s)表示，組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 復(fù)方降脂膠囊對于大鼠頸總動脈在受到電流損傷后混合血栓形成的影響 實驗A、B、C組OT與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05，見表1)。

表1 各組大鼠OT比較Table 1 Comparison of OT in each group of rats

2.2 復(fù)方降脂膠囊對于小鼠由于ADP混合致栓劑導(dǎo)致的肺栓塞的影響 實驗A組和實驗B組喘促時間與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05);實驗C組與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義 (P＞0.05，見表2)。

表2 各組小鼠喘促時間比較Table 2 Comparison of catch hurried in each group of mouse

3 討論

目前，臨床上常見的心腦血管疾病的發(fā)病前提大多都是由于動脈粥樣硬化從而產(chǎn)生血栓所導(dǎo)致的，而在血栓的形成過程中血小板的活化又是其重要原因之一［1-3］，所以，如何減少血栓的形成抑制血小板聚集是控制此類疾病的重要途徑。血栓的形成與血液成分改變、血流異常以及血管內(nèi)膜受損有關(guān)，而這之中脂質(zhì)的增加、血脂比例的改變以及脂質(zhì)質(zhì)量的異常都是導(dǎo)致其進一步加重的原因［4］。大量的脂質(zhì)在血管內(nèi)膜上附著和沉積，加上單核-巨噬細胞在病變部位活動，吞噬掉大量的脂質(zhì)之后轉(zhuǎn)化為泡沫細胞也是導(dǎo)致動脈粥樣硬化斑塊形成的重要因素［5］。而另一方面血脂的異常導(dǎo)致血液內(nèi)白細胞和血小板功能的異常，導(dǎo)致凝血活性增強［6］。這多方面的因素共同導(dǎo)致了血栓的形成。

本次實驗中通過電流損傷刺激大鼠的動脈內(nèi)膜，形成的血栓主要是紅白血栓兼有的混合血栓，從實驗結(jié)果可以看出，復(fù)方降脂膠囊能夠有效地延長OT，同時也能夠有效地縮短小鼠由于急性肺栓塞后到恢復(fù)自主活動的時間。這說明復(fù)方降脂膠囊可以有效地減少血小板聚集和降低全血黏度，對纖溶系統(tǒng)也有所增強，讓血小板處于解聚的狀態(tài)，從而起到抑制血栓形成的作用。

1 Smits JH，van der Linden J，Blankestijn PJ，et al.Coagulation and haemodialysis access thrombosis［J］.Nephrol Dial Transplant，2010，15(11):1755-1760.

2 Kuhli C，Scharrer I，Koch F，et al.Factor Ⅻ deficiency:a thrombo-philic risk factor for retinal vein occlusion ［J］.Ophthalmol，2011，137(3):173-179.

3 Ishii K，Oguchi S，Murata M，et al.Activated factorⅫ levels are de-pendent on factorⅫ 46C/T genotypes and factorⅫ zymogen levels，and are associated with vascular risk factors in patients and healthy subjects［J］.Blood Coagul Fibrinolysis，2010，4(11):277.

4 馬世平，劉保林，周素娣，等.西紅花總苷的藥理學(xué)研究 (對血凝、血小板聚集及血栓形成的影響) ［J］.中草藥，2009，30(3):196.

5 Steinhubl SR，Moliterno DJ.The role of the platelet in the pathogenes is of atherothrombosis［J］.Am J Cardiovasc Drugs，2005，5(6):399.

6 汪鐘，鄭植荃.現(xiàn)代血栓病學(xué)［M］.北京:北京醫(yī)科大學(xué)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，2007:462-463.