李計成，李曉明，戴如飛，蔡 軍

單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂 (GM1)是含唾液酸的糖神經(jīng)鞘脂，存在于哺乳類動物細胞膜，神經(jīng)系統(tǒng)中含量尤其豐富，是神經(jīng)細胞膜的組成成分，在神經(jīng)發(fā)生、生長、分化過程中起必不可少的作用，對于損傷后的神經(jīng)修復也非常重要，具有促進神經(jīng)再生、促進神經(jīng)軸突生長和突觸形成、恢復神經(jīng)支配功能;改善神經(jīng)傳導、促進腦電活動及其他神經(jīng)電生理指標的恢復;保護細胞膜、促進細胞膜各種酶活性恢復等作用。中、重型顱腦損傷不但引起嚴重的腦挫裂傷等原發(fā)性損傷，還引起顱內(nèi)血腫及腦水腫等繼發(fā)性損傷，腦細胞水腫崩解死亡，導致嚴重的并發(fā)癥和后遺癥。而神經(jīng)元特異性烯醇化酶 (neuron-specific enolase，NSE)廣泛存在于神經(jīng)元內(nèi)，神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞結構破壞后，其在血清濃度的變化能在一定程度上反映腦損傷的嚴重程度及預后。本研究把血清NSE水平及患者預后作為評價外源性GM1對顱腦損傷患者神經(jīng)元損傷的保護及改善預后的作用?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2009年5月—2012年9月在我院住院治療的顱腦損傷患者96例，其中男63例，女33例;年齡19～71歲，平均41.3歲;格拉斯哥評分8～11分。手術治療者62例，保守治療者34例，其中腦挫裂傷患者79例。排除標準:既往有明確的肝、腎、心臟及內(nèi)分泌疾病史者，嚴重多發(fā)傷或復合傷者，休克及低血壓者，雙側(cè)瞳孔散大、瀕臨死亡者。

1.2 主要試劑儀器 ELISA檢測NSE試劑盒 (德國DRG公司)，GM1(申捷，齊魯制藥有限公司)，Bio-rad酶標儀 (美國伯樂公司)。

1.3 研究方法

1.3.1 分組 將其隨機分為GM1治療組 (48例)，常規(guī)治療組 (48例)。GM1治療組手術者30例，非手術者18例;常規(guī)治療組手術者32例，非手術者16例。

1.3.2 治療及用藥方法 顱內(nèi)血腫或廣泛性腦挫裂傷待CT檢查后具備手術指征者入院后即行手術治療，所有患者進行常規(guī)治療。GM1治療組急性期應用GM1 100mg/d，靜脈滴注;2～3周后改為維持量，20～40mg/d，一般療程為6周。

1.3.3 標本采集及處理 采集外周靜脈血進行離心，取血清置于-70℃冰箱保存，采用放射免疫分析法測定血清NSE含量。GM1治療組和常規(guī)治療組患者的樣品保存以及測定方法均相同。

1.4 預后評定 采用格拉斯哥預后評分 (GOS)評定患者預后。

1.5 統(tǒng)計學方法 應用SPSS 12.0軟件包對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料以(±s)表示，組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組未手術患者血清NSE水平比較 兩組未手術患者治療前血清NSE水平比較，差異無統(tǒng)計學意義 (P＞0.05);治療后24h、48h、72h血清NSE水平比較，差異均有統(tǒng)計學意義 (P＜0.05);治療后7h血清NSE水平比較，差異無統(tǒng)計學意義 (P＞0.05，見表1)。

2.2 兩組手術患者血清NSE水平比較 兩組手術患者治療前血清NSE水平比較，差異無統(tǒng)計學意義 (P＞0.05);治療后24h、48h、72h血清NSE水平比較，差異均有統(tǒng)計學意義 (P＜0.05);治療后7h血清NSE水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P ＞0.05，見表2)。

2.3 兩組患者預后比較 治療后14d，兩組患者GOS評分比較，差異無統(tǒng)計學意義 (P＞0.05);治療后3個月，兩組患者GOS比較，差異有統(tǒng)計學意義 (P＜0.05，見表3)。

表1 兩組未手術患者血清NSE水平比較(±s，μg/L)Table 1 Comparison of serum NSE level between two groups did not operation

表1 兩組未手術患者血清NSE水平比較(±s，μg/L)Table 1 Comparison of serum NSE level between two groups did not operation

.7 15.7±3.1 GM1治療組 18 9.0±2.5 17.4±2.8 24.5±1.9 25.8±3.3 22.2±3 7d常規(guī)治療組 16 9.2±2.1 20.6±2.1 27.9±2.2 33.1±3.5 30.2±2例數(shù) 治療前 治療后12h 治療后24h 治療后48h 治療后72h 治療后.1 12.2±2.5

表2 兩組手術患者血清NSE水平比較(±s，μg/L)Table 2 Comparison of serum NSE level between two groups did operation

表2 兩組手術患者血清NSE水平比較(±s，μg/L)Table 2 Comparison of serum NSE level between two groups did operation

3.3 14.7±2.8 GM1治療組 30 10.5±2.4 15.5±1.8 25.6±1.3 26.4±3.1 23.2±7d常規(guī)治療組 32 11.2±2.1 22.7±1.1 30.8±2.3 35.6±2.5 32.7±例數(shù) 治療前 治療后12h 治療后24h 治療后48h 治療后72h 治療后2.4 12.5±3.5

表3 兩組患者GOS比較(±s，分)Table 3 Comparison of GOS score between two groups

表3 兩組患者GOS比較(±s，分)Table 3 Comparison of GOS score between two groups

個月組別 例數(shù) 治療后14d 治療后3 48 2.45 ±0.45 4.31 ±0.98 48 2.35 ±0.55 3.23 ±1.03 GM1治療組常規(guī)治療組

3 討論

NSE特異性存在神經(jīng)元胞質(zhì)中，其陽性表達計數(shù)間接反映神經(jīng)元缺失程度［1］，正常情況下血液中含有極少量NSE。但是當發(fā)生顱腦損傷、腦卒中時神經(jīng)遭破壞，NSE可經(jīng)細胞間隙釋放入血和腦脊液中，更甚者血-腦脊液屏障破壞，大量神經(jīng)元崩解壞死，NSE大量釋放，非特異性的腦損傷越嚴重釋放的NSE越多，NSE被認為評價腦外傷損傷程度及預后恢復的特異性敏感性指標之一［2-4］。本研究中GM1治療組較常規(guī)治療組NSE指標無論手術組和非手術組在治療后24h、48h、72h都明顯降低，排除早期手術影響，提示在早期抑制神經(jīng)細胞繼發(fā)損傷上有明確意義。在后期神經(jīng)修復上，臨床GOS評分GM1治療組也較常規(guī)治療組有顯著性差異。

在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的許多部位已發(fā)現(xiàn)GM1受體，GM1與其受體結合，被逆行轉(zhuǎn)運到神經(jīng)元內(nèi)。促進蛋白質(zhì)合成能量合成，發(fā)揮神經(jīng)趨化作用，能夠防止損傷的神經(jīng)元死亡。促神經(jīng)元的再生和腦功能恢復，它對受損細胞的分化、功能維持和生存起著十分重要的作用［5］，主要作用體現(xiàn)在GM1可以對抗興奮神經(jīng)毒性，它通過抑制神經(jīng)細胞Ca持續(xù)內(nèi)流及抑制谷氨酸對蛋白激酶C的激活，從而防止興奮毒性發(fā)生，而外源性GM1與細胞膜的特異區(qū)域結合，改變Na-K-ATP酶周圍環(huán)境或膜的穩(wěn)定性，減低細胞耗氧量;GM1可通過抑制胱冬酶-3，調(diào)節(jié)Bcl-2和BaX的表達及激活磷酸肌醇3-激酶及活化鞘氨醇肌酶而抑制凋亡。從而促進神經(jīng)修復改善神經(jīng)功能［6］，另外GM1能活化多種神經(jīng)營養(yǎng)因子，其本身也具有營養(yǎng)神經(jīng)作用，可促進神經(jīng)元修復和神經(jīng)功能恢復;GM1通過抑制神經(jīng)元型一氧化氮合酶來源的一氧化氮合成防止神經(jīng)元遲發(fā)性損害，對神經(jīng)元有保護作用［7］;另外它還在誘導熱休克蛋白70表達調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)方面改善和保護神經(jīng)功能。長期隨訪表明，外源性GM1至少可以改善部分認知與運動功能［8-9］。腦挫裂傷引起腦水腫等繼發(fā)性損傷病理基礎是缺血缺氧性損傷，通過使用GM1減少早期神經(jīng)細胞繼發(fā)損傷，增強神經(jīng)元對抗損傷耐受性，加強損傷后腦神經(jīng)元修復，并通過NSE量化評價，反映出使用GM1治療腦挫裂傷具有良好的腦神經(jīng)保護和后期明顯提高認知和運動的作用。

本研究因臨床原因采用測定血清NSE水平變化來評定臨床療效，且選取檢查時間區(qū)間較短，可在以后研究中行腦脊液NSE含量變化和增長時間跨度進一步檢驗療效及尋找最佳監(jiān)測時間窗。研究中非手術患者病例較少無法對比評價手術對NSE的早期影響，隨著樣本量的增加相信可以得到進一步闡明。

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