李志鋒劉進(jìn)忠李冠軍石榮亞

S100A6蛋白在甲狀腺癌中檢測(cè)的意義

李志鋒1劉進(jìn)忠1李冠軍1石榮亞2

目的探討S100A6蛋白在甲狀腺癌中檢測(cè)的臨床意義。方法免疫組化法檢測(cè)110例患者甲狀腺石蠟標(biāo)本中S100A6蛋白的表達(dá)情況，其中甲狀腺癌70例（乳頭狀癌48例、濾泡癌22例），甲狀腺濾泡型腺瘤40例，正常甲狀腺組織30例（對(duì)照），并對(duì)臨床病理特征進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果S100A6蛋白在甲狀腺癌、腺瘤、正常甲狀腺組織中陽(yáng)性表達(dá)率分別為82.9%（58/70）、35.0%（14/40）、16.7%（5/30）。甲狀腺癌組織與后兩者比，S100A6蛋白的表達(dá)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織S100A6蛋白表達(dá)陽(yáng)性率高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織（P＜0.05）。結(jié)論S100A6蛋白在甲狀腺癌組織中過(guò)表達(dá)、與轉(zhuǎn)移相關(guān)，可作為甲狀腺癌重要的生物學(xué)指標(biāo)，有希望成為一個(gè)能夠預(yù)測(cè)甲狀腺癌病情發(fā)展的標(biāo)記物。

甲狀腺癌；甲狀腺濾泡型腺瘤；S100A6；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

甲狀腺腫瘤是最常見的內(nèi)分泌系統(tǒng)腫瘤之一，其多起病隱匿，生物學(xué)特征多變。研究表明，在新生腫瘤組織出現(xiàn)形態(tài)學(xué)改變之前即有分子水平的變化，S100A6又稱為鈣周期蛋白，在腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中是一個(gè)具有多種功能的調(diào)節(jié)因子，在許多惡性腫瘤中高表達(dá)。S100A6蛋白作為臨床腫瘤檢測(cè)的標(biāo)志物正日益受到重視，本實(shí)驗(yàn)將甲狀腺手術(shù)患者的切除組織進(jìn)行免疫組化SP法檢測(cè)S100A6蛋白的表達(dá)，以探討其在甲狀腺不同組織的表達(dá)及與甲狀腺癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料收集2009年8月～2013年5月我院甲狀腺手術(shù)后石蠟組織標(biāo)本的患者110例，男性38例，女性72例；年齡21～68歲，平均（43.8±5.2）歲。其中甲狀腺癌70 例（包括乳頭狀癌48例，濾泡狀癌22例）和甲狀腺濾泡型腺瘤40例。另取腺瘤旁經(jīng)病理證實(shí)的正常甲狀腺組織30例為對(duì)照。

1.2 免疫組織化學(xué)檢測(cè)樣本均經(jīng)10%福爾馬林固定，石蠟包埋，4um厚連續(xù)切片，石蠟切片經(jīng)脫蠟、水化，免疫組化SP法染色：室溫孵育15min以消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的作用，PBS漂洗，一抗4℃孵育過(guò)夜，加入二抗，DAB顯色，蘇木素復(fù)染。結(jié)果判斷：S100A6蛋白的免疫著色主要位于細(xì)胞質(zhì)，其次為細(xì)胞核，因此，以細(xì)胞質(zhì)和或細(xì)胞核中出現(xiàn)清晰的黃色、棕黃色顆粒為S100A6蛋白表達(dá)陽(yáng)性。染色強(qiáng)度共分4級(jí)，（-）：無(wú)陽(yáng)性染色或陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜5%，（+）：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)5%～25%；（++）：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)26%～50%；（+++）：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞50%（S100A6抗體為兔抗人濃縮型單克隆抗體）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)數(shù)資料的比較采用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)某一個(gè)理論數(shù)1＜T≤5時(shí)，須對(duì)χ2進(jìn)行連續(xù)性校正，以P＜0.05為差異有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 不同甲狀腺組織中S100A6的表達(dá)S100A6蛋白在甲狀腺癌、腺瘤、正常甲狀腺組織中陽(yáng)性表達(dá)率分別為82.9%（58/70）、35.0%（14/40）、16.7%（5/30）。S100A6在甲狀腺癌組織中的表達(dá)均高于在腺瘤組織及正常甲狀腺組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（見表1）。

表1 S100A6在不同甲狀腺組織中的表達(dá)(n,%)

2.2 甲狀腺癌組織中S100A6與臨床病理特征的關(guān)系S100A6在70例甲狀腺癌組織中的表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)（P＜0.05），而與年齡、性別、臨床分期無(wú)關(guān)（P＞0.05）見表2。

表2 S100A6在甲狀腺癌組織中的表達(dá)及與臨床病理特征的關(guān)系(n)

3 討論

S100A6蛋白表達(dá)異?？赡苁悄[瘤發(fā)生的早期事件，繼而參與腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移[1]，并與患者的預(yù)后密切相關(guān)。S100A6蛋白是一種由90個(gè)氨基酸殘基組成的蛋白分子，屬于S100鈣黏蛋白家族，該家族含有20多個(gè)成員，大部分在染色體Iq21區(qū)密集排列。在許多腫瘤中都存在該區(qū)的缺失或重排擴(kuò)增現(xiàn)象，提示該家族基因在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮作用[2]。

S100A6蛋白的異常表達(dá)與細(xì)胞的增殖和分化密切相關(guān)，當(dāng)靜止細(xì)胞在生理或病理?xiàng)l件下受到血清、表皮生長(zhǎng)因子、血小板源生長(zhǎng)因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子、視黃酸、缺血性損傷等刺激時(shí)，胞內(nèi)S100A6蛋白的表達(dá)會(huì)有顯著升高[3]。S100A6蛋白的高表達(dá)可以激活細(xì)胞骨架蛋白tropomyosin，從而改變細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)，提高細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力。S100A6蛋白質(zhì)存在多種翻譯后修飾，包括乙?；?、磷酸化、糖基化等，通過(guò)翻譯后修飾改變了蛋白質(zhì)的一些特性，同時(shí)使蛋白質(zhì)可以行使新的功能。眾多研究表明，S100A6蛋白在黑色素瘤、卵巢癌、肺癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌、胰腺癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤等許多惡性腫瘤中高表達(dá)。

S100A6蛋白的活性形式是同源二聚體，它通過(guò)鈣離子信號(hào)途徑能與多種蛋白質(zhì)結(jié)合，與S100A6蛋白相關(guān)的幾種蛋白質(zhì)，包括甘油醛-3-磷酸脫氫酶、原肌球蛋白、P30、膜聯(lián)蛋白XI等，與S100A6蛋白相互作用形成的復(fù)合物參與細(xì)胞的增殖[4]。RNA干擾試驗(yàn)證實(shí)，當(dāng)S100A6蛋白受到抑制后可以影響活化轉(zhuǎn)錄因子3和活化素A的表達(dá)[5]。后兩種蛋白在細(xì)胞增殖和侵襲過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用[6]。研究表明，S100A6蛋白在腫瘤浸潤(rùn)邊緣表達(dá)高于腫瘤的其它部位，這一結(jié)果提示S100A6可能還與腫瘤細(xì)胞向周圍組織浸潤(rùn)侵襲的惡性生物學(xué)行為有關(guān)[7]。而統(tǒng)計(jì)結(jié)果也發(fā)現(xiàn)，S100A6蛋白浸潤(rùn)深度越深者，淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移可能性越大。本研究表明S100A6蛋白可作為甲狀腺癌的一個(gè)潛行性標(biāo)志，它的表達(dá)與腫瘤轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān)，S100A6蛋白將可用于對(duì)腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移危險(xiǎn)性的預(yù)測(cè)。

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R736.1

A

1673-5846(2013)08-0284-02

1河北省保定市第一醫(yī)院普外科，河北保定 071000

2河北省保定市傳染病醫(yī)院，河北保定 071000