徐 晏

（浙江醫(yī)藥高等專(zhuān)科學(xué)校，浙江 寧波 315000）

棗仁安神膠囊中丹參酮ⅡA的含量測(cè)定

徐 晏

（浙江醫(yī)藥高等專(zhuān)科學(xué)校，浙江 寧波 315000）

目的為后續(xù)制訂棗仁安神膠囊的質(zhì)量控制指標(biāo)提供參考依據(jù)。方法利用高效液相色譜法測(cè)定棗仁安神膠囊丹參酮ⅡA的含量。結(jié)果丹參酮ⅡA在4.04～36.32μg之間線(xiàn)性關(guān)系良好，r=0.9999，丹參酮ⅡA平均回收率為98.36%，RSD=2.01%。結(jié)論該方法準(zhǔn)確、專(zhuān)屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好，可作為本品中丹參酮ⅡA的含量測(cè)定方法。

棗仁安神膠囊；丹參酮ⅡA；高效液相色譜法

棗仁安神膠囊由酸棗仁、丹參、五味子等中藥材組成，經(jīng)過(guò)多年的臨床實(shí)踐證明，對(duì)神經(jīng)衰弱患者心、肝血虛癥引起的失眠，兼有頭暈、健忘等癥有顯著的療效，處方中所含有的丹參酮ⅡA是主要有效成分之一。本文利用HPLC法對(duì)其所含成份中的丹參酮ⅡA含量測(cè)定，為以后制訂該制劑的質(zhì)量控制指標(biāo)提供參考依據(jù)。

1 儀器與材料

島津LC-2010AT型高效液相色譜儀，AL204-IC型電子分析天平（d=0.0001g，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司），市售棗仁安神膠囊（091201，貴州同濟(jì)堂制藥有限公司），丹參酮對(duì)照品（1241-200302，中國(guó)藥品生物制品檢定研究院），甲醇為色譜醇和分析醇，水為重蒸餾水，0.45μm微孔濾膜。

2 含量測(cè)定

2.1 色譜條件

島津LC-2010AT型高效液相色譜儀；UV紫外檢測(cè)器；Diamonsil C18色譜柱（5μm，200×4.6mm）；檢測(cè)波長(zhǎng)：270nm；流動(dòng)相為甲醇-水（75∶25）；流速1mL/min；柱溫40℃。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取丹參酮ⅡA對(duì)照品10mg置于50mL棕色瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖均。再?gòu)闹芯芰咳?mL置于50mL棕色量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖均，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取裝量差異項(xiàng)下的膠囊內(nèi)容物約1g，緊密稱(chēng)定，置50mL棕色量瓶中，加甲醇40mL，超聲處理2次，每次超聲30min，過(guò)濾，靜置冷卻后，加入甲醇稀釋至刻度，搖均，再以0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，取濾液作為供試品溶液。

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備

精密吸取丹參酮ⅡA對(duì)照品溶液（濃度為20.18ug/mL）2.0μL、4.0ul、6.0μL、10.0μL、14.0μL、18.0μL注入高效液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定，按上述色譜條件測(cè)定其峰面積，以峰面積值為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)樣體積為橫坐標(biāo)（X）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得到的回歸方程為y=104232x+6149.5，R=0.9999。結(jié)果表明丹參酮ⅡA在4.04～36.32μg范圍內(nèi)具有良好的線(xiàn)性關(guān)系。

2.4.2 精密度考察

精密稱(chēng)取供試品1.0026g制成供試品溶液，取10μL按上述色譜條件重復(fù)進(jìn)樣測(cè)定6次，測(cè)得丹參酮ⅡA峰面積值的RSD為1.11%。

2.4.3 穩(wěn)定性考察

精密稱(chēng)取供試品1.0064g制成供試品溶液，在室溫下放置，分別在0h、8h、16h、24h、36h、48h進(jìn)樣進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得丹參酮ⅡA峰面積值的RSD為1.58%。

2.4.4 重復(fù)性考察

分別精密稱(chēng)取供試品5份，每份1g，按上述制備方法制成供試品溶液，分別吸取上述溶液各10ul進(jìn)樣進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得丹參酮ⅡA峰面積值的RSD為1.57%。

2.4.5 加樣回收率

分別精密稱(chēng)取已知含量的供試品（含量為1.7583g/g）6份，每份0.5g，分別加入丹參酮ⅡA對(duì)照品溶液（濃度為0.8736mg/mL甲醇溶液）各1mL，按上述供試品制備方法制備供試品溶液，并以上述色譜條件測(cè)定峰面積，計(jì)算得到丹參酮ⅡA的平均回收率為98.36%，RSD為2.29%，表明回收率良好。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 加樣回收率考察數(shù)據(jù)

2.5 含量測(cè)定

取供試品按照上述色譜條件測(cè)定其峰面積值，各批膠囊平行測(cè)定3次，利用外標(biāo)一點(diǎn)法結(jié)合制劑含量計(jì)算公式計(jì)算丹參酮ⅡA的含量，結(jié)果見(jiàn)表2。樣品及對(duì)照品色譜圖見(jiàn)圖1。

表2 三批樣品的含量測(cè)定

3 結(jié)果與討論

圖1 丹參酮ⅡA對(duì)照品及樣品色譜圖

本文在進(jìn)行含量測(cè)定之前已利用回流及超聲兩種方法提取膠囊中的丹參酮ⅡA，兩種方法含量測(cè)定結(jié)果顯示回流提取的效率和色譜峰的分離效果均不及超聲處理好，并對(duì)超聲時(shí)間進(jìn)行考察得出超聲30min已將其中丹參酮ⅡA提取完全，此時(shí)超聲處理的含量比回流處理的含量高33.3%，故本文選擇超聲提取丹參酮ⅡA；此外，本文還對(duì)溶劑干擾通過(guò)陰性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行考察，結(jié)果顯示溶劑并未對(duì)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生干擾。經(jīng)對(duì)三批樣品的測(cè)定，表明本含量測(cè)定方法可靠，操作簡(jiǎn)便，符合高效液相色譜法《中國(guó)藥典（一部）》（2010版）的規(guī)定，且該方法重現(xiàn)性好，可作為本品中丹參酮ⅡA的含量測(cè)定方法。

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R282.710.3

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1671-8194（2013）18-0100-02