王詩(shī)會(huì)

（河南省南陽市第二人民醫(yī)院，河南 南陽 473000）

黃芩有效化學(xué)成分及抑菌作用的分析

王詩(shī)會(huì)

（河南省南陽市第二人民醫(yī)院，河南 南陽 473000）

目的 探討黃芩的有效化學(xué)成分及抑菌作用。方法 分別使用超聲法和水煮法提取黃芩的有效成分，然后比較兩種方法所提取的黃芩成效成分，提取液和黃芩結(jié)晶物在體外的抑菌效果。結(jié)果 使用超聲法提取得到的黃芩有效成分的體外抑菌效果明顯優(yōu)于使用水煮法提取得到的黃芩有效成分（P＜ 0.05）；使用超聲法提取得到的黃芩結(jié)晶物的體外抑菌效果明顯優(yōu)于水煮法提取得到的的黃芩有效成分（P＜ 0.05）。結(jié)論 黃芩在臨床上具有很好的抑菌作用，使用超聲法可以有效的提取出黃芩的有效成分，值得臨床推廣。

腸球菌屬細(xì)菌；耐藥性；藥敏試驗(yàn)

1 資料與方法

1.1 藥品、試劑和菌種

實(shí)驗(yàn)所用黃芩均采購(gòu)由浙江省藥材公司；MH肉湯以及瓊脂采購(gòu)于上海微生物試劑有限公司；實(shí)驗(yàn)研究所用的的其他試劑均為分析純標(biāo)準(zhǔn)；實(shí)驗(yàn)所用的金黃色葡萄球菌為采購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢驗(yàn)所的腸炎沙門氏菌ATCC13076。

1.2 檢測(cè)儀器

黃芩有效成分的提取主要使用的儀器包括：使用由上海亞榮生化儀器廠制造的RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器； SW-CJ-2F超凈工作臺(tái)和DHP9162電熱恒溫培養(yǎng)箱由上海齊欣科學(xué)儀器有限公司制造；超聲波發(fā)生器由蘇州安泰空氣技術(shù)有取公司制造，超聲發(fā)生頻率為20kHz、800kHz以及1100kHz。

1.3 提取方法

1.3.1 水煮法

首先制備水煎提取液：使用天平精確稱取50g黃芩飲片，他別加入500g以及400g水煎煮2次，每次煮1h，然后進(jìn)行過濾，將兩次濾液合并，然后濃縮濾液至50mL，此時(shí)的黃芩水煎液濃度為1000mg/mL，經(jīng)過無菌處理后備用。然后制備結(jié)晶物：使用天平精確稱取50g黃芩飲片，他別加入500g以及400g水煎煮2次，每次煮1h，然后進(jìn)行過濾，將兩次濾液合并，然后在濾液中加入濃鹽酸并將濾液的pH值調(diào)節(jié)至1～2，并于80℃環(huán)境放置30min，靜置12h后將上清液棄除，然后加適量水將沉淀物溶解，攪勻后向溶液內(nèi)加入40%的NaOH溶液，將黃芩素溶解，并將溶液的值調(diào)節(jié)至6～7，之后加入等量的95%濃度的乙醇，加熱至50℃后過濾，使用10%鹽酸調(diào)節(jié)濾液的pH值至2～3，并靜置于50℃水浴中30min，使黃芩結(jié)晶物能夠完全析出，過濾得到結(jié)晶物，并用清水將結(jié)晶物沖洗至中性，60℃干燥至恒重，得到實(shí)驗(yàn)用的黃芩結(jié)晶物，最后配制為10mg/mL的溶液，經(jīng)過無菌處理后備用。

1.3.2 超聲提取法

首先取適量（＞50g）的黃芩飲片，于60℃進(jìn)行烘干，然后進(jìn)行粉碎并使用10目篩進(jìn)行過濾，使用天平精確稱取50g黃芩粗粉，向粗粉中加入10倍量的水，并使用超聲進(jìn)行處理，頻率選擇20kHz，并注意隨時(shí)補(bǔ)充水，讓溶液的液面保持同一高度，超聲處理1h后進(jìn)行過濾，使用鹽酸將濾液的pH值調(diào)節(jié)至1～2，80℃水浴靜置30min，將黃色的結(jié)晶物充分析出后進(jìn)行過濾。向沉淀物中加入蒸餾水并攪勻，然后向溶液中加入40%的NaOH溶液，將黃芩素溶解，并將溶液的值調(diào)節(jié)至6～7，之后加入等量的95%濃度的乙醇，加熱至50℃后過濾，使用10%鹽酸調(diào)節(jié)濾液的pH值至2～3，并靜置于50℃水浴中30min，使黃芩結(jié)晶物能夠完全析出，過濾得到結(jié)晶物，并用清水將結(jié)晶物沖洗至中性，60℃干燥至恒重，得到實(shí)驗(yàn)用的黃芩結(jié)晶物，最后配制為10mg/mL的溶液，經(jīng)過無菌處理后備用。

本研究用均方差(root mean square error,RMSE)、殘差累積系數(shù)(residual accumulation coefficient,CRM)和平均誤差(average mean error,AME),評(píng)估模擬值與觀測(cè)值的吻合程度。三者的值越趨近于0,表明模型的模擬精度越高。同時(shí)用觀測(cè)值與模擬值之間的1∶1線來評(píng)估模型的可靠性。

1.4 抑菌作用比較方法

將實(shí)驗(yàn)用腸炎沙門氏菌接種于MH肉湯中，體積約為3mL，在37℃環(huán)境下培養(yǎng)18h，并將菌液稀釋到濁度105CFU/mL，然后使用二倍稀釋法進(jìn)行提取物的體外抑菌實(shí)驗(yàn)，每個(gè)濃度的實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析，全部數(shù)據(jù)資料用采用t檢驗(yàn)，χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有顯著性，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 提取液的抑菌濃度

使用超聲法提取得到的黃芩有效成分的體外抑菌效果明顯優(yōu)于使用水煮法提取得到的黃芩有效成分（P＜0.05），見表1。

表1 兩種提取方法黃芩提取液的最低抑菌濃度MIC比較

2.2 結(jié)晶物的抑菌濃度

使用超聲法提取得到的黃芩結(jié)晶物的體外抑菌效果明顯優(yōu)于水煮法提取得到的的黃芩有效成分（P＜0.05），見表2。

表2 兩種提取方法黃芩提取結(jié)晶物的最低抑菌濃度MIC比較

3 討 論

黃芩是臨床上常用的中藥，其中最為主要的有效成分為黃芩苷，具有良好的清熱解毒，消炎利膽，保肝抗變態(tài)反應(yīng)的作用，并且具有非常廣泛的抗菌譜，對(duì)金葡菌、綠膿桿菌以及沙門氏菌均具有十分良好的抑制作用。在臨床上，黃芩主要是用于治療熱病煩燥、肺熱咳嗽、濕熱瀉痢以及煩渴等疾病。近年來，有研究發(fā)現(xiàn)，黃芩還具有良好的抗病毒作用[2]。

傳統(tǒng)的黃芩苷提取方法為水煮法，但水煮法的提取時(shí)間比較長(zhǎng)，而且提取率比較低。因此，為了提高黃芩苷的提取率，筆者采用最新的超聲提取法和傳統(tǒng)的水煮法進(jìn)行對(duì)比分析[3]。研究結(jié)果顯示，超聲法提取黃芩的抑菌效果明顯優(yōu)于水煮法提取的黃芩，超聲法提取黃芩結(jié)晶物的抑菌效果明顯優(yōu)于水煮法提取的黃芩。

綜上所述，黃芩在臨床上具有很好的抑菌作用，使用超聲法可以有效的提取出黃芩的有效成分，值得臨床推廣。

[1]魏述永.黃芩有效成分提取物對(duì)沙門氏菌的抑菌活性比較研究[J].中國(guó)醫(yī)藥雜志,2008,6(5):40-41.

[2]黎丹戎.漢黃芩素對(duì)人卵巢癌細(xì)胞株SKOV3裸鼠移植瘤生長(zhǎng)及端粒酶活性的抑制作用[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2007,23(4):534-538.

[3]郭京華.淺析黃芩有效化學(xué)成分及抑菌作用[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥, 2012,7(16):195-196.

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：1671-8194（2013）08-0083-02