劉德勝，龍姣燕，張樹平，劉孟安

(濱州醫(yī)學(xué)院，山東 煙臺 264003)

醫(yī)院制劑胃腸舒片(批準(zhǔn)文號為魯藥制字Z1620030009)是由大黃、枳殼、甘草等數(shù)種中藥組成的復(fù)方中藥制劑，經(jīng)10多年臨床使用及試驗證明，其對胃腸動力障礙性疾病具有滿意療效[1－4]。體外溶出度測定法是一種模擬口服固體制劑在胃腸道中崩解和溶出的體外試驗法，可更好地對藥物在胃腸道中的溶出過程進(jìn)行評價。目前，尚未見對該制劑體外溶出度進(jìn)行考察的文獻(xiàn)報道。為此，筆者采用高效液相色譜(HPLC)法，以方中大黃游離蒽醌和枳殼主要成分柚皮苷為指標(biāo)，考察了胃腸舒片的體外溶出度，為評價和控制該制劑的質(zhì)量提供依據(jù)。

1 儀器與試劑

TU－1901型紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司);Waters 600E型高效液相色譜儀(含有2468紫外可見分光檢測器，在線脫氣機以及Empower化學(xué)工作站，美國Waters公司);電子天平(梅特勒托利多儀器上海有限公司);SB2200－T型超聲波清洗器(上海必能信超聲有限公司);臺式高速冷凍離心機(Biofuge Primo);RCZ－8A型溶出度測定儀(天津大學(xué)精密儀器廠);漩渦震蕩儀(海門市其林貝爾儀器制造有限公司)。胃腸舒片由濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院藥劑科提供;蘆薈大黃素(批號110795－201007)、大黃酸(批號 110757－200906)、大黃素(批號 110756－201010)、大黃酚(批號 110796－201017)、大黃素甲醚(批號110758－201013)以及柚皮苷(批號110722－200610)對照品均由中國藥品生物制品檢定所提供;甲醇為色譜醇，其他試劑均為分析純，水為哇哈哈純凈水(脫氣處理)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗[5－6]

色譜柱:Thermo BDS 柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流動相:乙腈 －水溶液(17 ∶83);檢測波長:230 nm;流速:1.0 mL/min;柱溫:室溫;進(jìn)樣量:20 μL。按照理論板數(shù)不低于1 500計，分離度不低于1.5。此色譜條件下，柚皮苷保留時間約為7.80 min，色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.2 溶出試驗條件選擇

溶出方法:取樣品，以0.1%的鹽酸水溶液為溶出介質(zhì)，體積選用900mL(符合漏槽條件)，轉(zhuǎn)速為100r/min，溫度為(37±0.5)℃，依法操作。分別在不同時刻下取樣，采用HPLC法測定。在該條件下，槳法的溶出效果明顯優(yōu)于轉(zhuǎn)籃法，故選用槳法測定本品的溶出度。

溶出介質(zhì):由于所測指標(biāo)成分5種游離大黃蒽醌及柚皮苷的極性差別較大，溶出介質(zhì)對各組分的溶出影響較大，因此對溶出介質(zhì)進(jìn)行了選擇，考察了胃腸舒片在水、人工胃液、人工腸液、不同pH的磷酸緩沖鹽溶液和0.1%和0.5%的十二烷基硫酸鈉中的溶出情況。結(jié)果表明，在0.5% 的十二烷基硫酸鈉溶液樣品中上述組分溶出最多，故選擇0.5% 的十二烷基硫酸鈉溶液為溶出介質(zhì)。

轉(zhuǎn)速:量取經(jīng)脫氣處理的0.5%的十二烷基硫酸鈉900 mL，用轉(zhuǎn)籃法，轉(zhuǎn)速分別設(shè)定為50，75，100 r/min。取3批樣品，精密稱定，于 5，15，30，60，90，120，180，240，480 min 時取樣 1.0 mL，濾過，同時補充已預(yù)熱至(37±0.5)℃的溶出介質(zhì)1.0 mL，依法測定，計算累積溶出百分率。結(jié)果顯示，100 r/min轉(zhuǎn)速的溶出速率相對較快且溶出的穩(wěn)定性也較好，因此選用100 r/min的轉(zhuǎn)速。

100% 溶出量測定:取本品10片，研磨，精密稱取相當(dāng)于平均粒重的樣品量，置900 mL溶出介質(zhì)中，(37±0.5)℃水浴，轉(zhuǎn)速為100 r/min，6 h后，取適量，過濾，取續(xù)濾液，在上述色譜條件下測定蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚以及柚皮苷含量，作為胃腸舒片100% 溶出時蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚以及柚皮苷的量。

2.3 含量測定方法學(xué)考察

標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:分別稱取蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚以及柚皮苷對照品，用甲醇溶解制備成質(zhì)量濃度分別為 240.0，150.0，100.0，190.0，100.0，400 g/L 的對照品貯備溶液。采用倍比稀釋法制成系列質(zhì)量濃度的溶液，在上述色譜條件下，取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜峰面積。以峰面積(Y)為縱坐標(biāo)、對照品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)(X)進(jìn)行線性回歸。結(jié)果見表1。

精密度試驗:取6 h樣品溶出液，重復(fù)進(jìn)樣5次，每次20 mL，記錄色譜圖面積。結(jié)果蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚以及柚皮苷的 RSD 分別為 1.0% ，0.7% ，1.1% ，0.8% ，1.3% 和 0.7%。

表1 各組分線性關(guān)系測定結(jié)果

重復(fù)性試驗:取同一批樣品，按溶出度測定方法重復(fù)測定6次。結(jié)果蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚以及柚皮苷的 RSD 分別為 1.2% ，1.0% ，0.8% ，0.9% ，1.5% 和0.8%(n=6)。

加樣回收試驗:取已知含量的樣品粉末約0.5 g，精密稱定，精密加入6種對照品的混合甲醇溶液適量，揮干，置900 mL溶出介質(zhì)中，置(37±0.5)℃水浴中，不斷攪拌6 h，取液，過濾，取續(xù)濾液，在上述色譜條件下測定各組分含量，計算加樣回收率。結(jié)果見表2。

表2 6種成分加樣回收試驗結(jié)果(X ± s，n=6)

2.4 溶出曲線繪制

按照2.2項下方法制備樣品溶液，依照擬訂的色譜條件，測定各組分的峰面積，求出每粒的溶出量，再與100%溶出量比較得出每粒的累積溶出百分率。3批樣品測定后取平均值，計算平均溶出量，以不同時間平均累計溶出率為縱坐標(biāo)、時間為橫坐標(biāo)，使用Origin 8.0軟件繪制溶出曲線。見圖2。

圖2 3批胃腸舒片累積溶出曲線

3 討論

本試驗中建立了胃腸舒片多種指標(biāo)成分為溶出指標(biāo)的溶出方法，采用HPLC法測定了大黃中的5種游離蒽醌:蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚以及枳殼中的主要成分柚皮苷的溶出，方法簡單，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，適用于胃腸舒片的溶出度以及質(zhì)量控制。由于所測定的6種指標(biāo)成分極性差別較大，溶出介質(zhì)對各組分的溶出影響較大，通過對溶出介質(zhì)的選擇，結(jié)果表明，以0.5%十二烷基硫酸鈉水溶液作為胃腸舒片的溶出介質(zhì)最能體現(xiàn)其在體內(nèi)的溶出情況。

[1]李 瓊，劉同慎，劉孟安.胃腸舒片對胃腸功能障礙大鼠胃腸道乙酰膽堿及P物質(zhì)的影響[J].中國中醫(yī)急癥，2010，19(1):96－98.

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[6]董軍偉，王華新，李國川，等.高效液相色譜法測定潤降利膈顆粒中柚皮苷含量[J].中國藥業(yè)，2011，20(13):25.