劉秀波 龔賀 王加志 雷霞 宋麗艷 石玉生 張燕 馬偉
【摘 要】目的:通過測定黃芪種子的活力來評定黃芪種子的質(zhì)量。方法:將去皮的黃芪種子放入培養(yǎng)皿中,用5%紅墨水染色10~20min后觀察沖洗后的種子胚部著色情況。結(jié)果:紅墨水染色率較低,僅為6.6%。結(jié)論:所測定的黃芪種子質(zhì)量較好,生活力較高。
【關(guān)鍵詞】黃芪;種子活力;染色
種子活力是指種子健壯程度,包括迅速、整齊萌發(fā)的發(fā)芽潛力、生長潛勢和生長潛力[1]。黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.monghoicus(Bge.)Hsiao和膜莢黃芪Astragalus membranaceus (Fisch.)Bge.的干燥根[2]。黃芪種子外皮堅實而厚,種子小,硬實度較大,不易萌發(fā)[3]。通常測定種子生活力可直接由發(fā)芽試驗測定,但是對休眠期長的或經(jīng)過特殊處理后才能發(fā)芽的種子就可用下列快速、間接的方法去測定,如TTC法(氯化三苯基四氮唑法)、紅墨水染色法等[4,5]。本實驗通過紅墨水染色法來測定黃芪種子的活力,建立中藥黃芪種子活力的測定方法,為生產(chǎn)實踐提供依據(jù)。
1.材料與方法
1.1儀器與試劑
培養(yǎng)皿2套,鑷子1靶;單面刀片1片;墊板(剝種子用)1塊;燒杯1個;放大鏡;綜合試劑瓶;市售的紅墨水;膜莢黃芪種子(購于藥材公司)5%紅墨水溶液的配制 取市售紅墨水稀釋20倍(1份紅墨水加19份蒸餾水)作為染色劑。
1.2原理
有生活力的種子其細(xì)胞的原生質(zhì)具有半透性,有選擇吸收外界物質(zhì)的能力,某些染料如紅墨水中的酸性大紅G不能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),胚部不染色。而喪失活力的種子,其胚部細(xì)胞原生質(zhì)膜喪失了選擇吸收的能力,染料可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)使胚部染色。所以可根據(jù)種子胚部是否染色來判斷種子的生活力。
1.3方法
先將待測黃芪種子用水浸泡3~4 h,待充分吸脹后取出一部分新種子,在沸水中煮沸3~5min,作為死種子。取浸泡好的新種子和死種子各100粒(隨機(jī)取樣),重復(fù)五次,將黃芪種子進(jìn)行剝皮處理。將備好的種子分別放在培養(yǎng)皿內(nèi),加入紅墨水溶液,以浸沒種子為度。染色10~20min后傾出溶液,用自來水反復(fù)沖洗種子,直到所染顏色不再洗出來為止。對比觀察沖洗后的新種子、死種子胚部著色情況。凡生活力強(qiáng)的種子,胚部完全不著色,或在子葉和胚根上面有不大的著色很淡的斑點,略淺紅色;若整個胚全部著色或在胚根和子葉上有著色很濃的斑點,呈深紅色,則為完全喪失或大部分喪失生命活力的種子。把測定結(jié)果記入表內(nèi)。
2.結(jié)果
由圖版1可知膜莢黃芪的死種子全部著色,不具有生活力。由表1可知膜莢黃芪新種子的染色率為6.6 %,說明這些種子的紅墨水染色率低,生活力則較高。
表1膜莢黃芪新種子活力表
A 膜莢黃芪死種子 B 膜莢黃芪新種子 C 膜莢黃芪對照組
圖版1 膜莢黃芪種子染色效果圖
3.結(jié)論與討論
用紅墨水染色測定種子生活力,具有簡單方便、快速準(zhǔn)確的優(yōu)點,較可靠的判斷種子生活力的強(qiáng)弱,即種子發(fā)芽潛在的能力的高低。需要注意的是由于種子是隨機(jī)選取以及人為操作和判斷,所以各個重復(fù)之間有一定的差異,這種情況是允許的。
【參考文獻(xiàn)】
[1]張志良,瞿偉菁.植物生理學(xué)實驗指導(dǎo)(第三版)[M].北京,高等教育出版社,2005:35-229.
[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(2005年版一部).北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005,212.
[3]段琦梅,梁宗鎖,慕小倩,等.黃芪種子萌發(fā)特性的研究[J].西北植物學(xué)報,2005,25(6):1246-1249.
[4]楊清,王偉.種子活力的快速測定[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2006,11:98-101.
[5]馬愛玲,王新明,孫德江.種子生活力昀快速測定法[J].中國種業(yè),2005,5:24.