吳松遠(yuǎn) 溫靜雅 孔祥騫
自身免疫性溶血性貧血(AIHA)是由于患者免疫系統(tǒng)功能紊亂, 產(chǎn)生自身抗體和(或)補(bǔ)體吸附于紅細(xì)胞表面, 導(dǎo)致紅細(xì)胞破壞加速而產(chǎn)生溶血性貧血。自身免疫性溶血性貧血可分為根據(jù)抗體作用于紅細(xì)胞膜所需的最適溫度, 可分為溫抗體型和冷抗體型。本文就33例AIHA患者對(duì)ABO正反定型、RhD血型鑒定和交叉配血試驗(yàn)的影響與處理進(jìn)行探討?,F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。
1.1 一般資料 選取本院2009年1月~2012年12月收治的33例AIHA患者, 年齡19~86歲, 平均66.7歲。均經(jīng)抗人球蛋白試驗(yàn)及結(jié)合臨床表現(xiàn)確診。
1.2 正反定型 抗A、抗B、抗AB、抗RhD和反定型 A1、B、O型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞, 以及廣譜抗人球蛋白血清由上海血液中心提供。
1.3 凝聚胺試劑盒由中山市生科試劑儀器有限公司提供。
1.4 方法
1.4.1 抗體放散 將AIHA患者ABO正反定型不一致的紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌3次, 取洗滌后紅細(xì)胞1.0 ml加入3.0 ml生理鹽水中, 置50℃水浴10~15min, 再用生理鹽水洗滌3次后, 取放散后紅細(xì)胞進(jìn)行直接抗人球蛋白試驗(yàn), 試驗(yàn)方法見(jiàn)文獻(xiàn)[1];如果呈陽(yáng)性反應(yīng), 再行抗體放散至直接抗人球蛋白試驗(yàn)陰性的紅細(xì)胞備用。
1.4.2 抗體吸收 AIHA患者血清(或血漿)0.5 ml, 加入等量經(jīng)過(guò)上述放散后的紅細(xì)胞, 置37℃水浴或4℃冰箱, 經(jīng)30~60min吸收, 取上清進(jìn)行間接抗人球蛋白試驗(yàn), 試驗(yàn)方法見(jiàn)文獻(xiàn)[1];如果呈陽(yáng)性反應(yīng), 再行抗體吸收至間接抗人球蛋白試驗(yàn)陰性的上清備檢。
2.1 抗體放散前后患者紅細(xì)胞定型 33例AIHA患者紅細(xì)胞經(jīng)抗體放散處理前后與抗-A、抗-B、抗-AB、抗RhD(試管法)呈陽(yáng)性反應(yīng)例數(shù)如表1所示。
2.2 抗體放散前后患者血漿定型 33例AIHA患者血漿經(jīng)抗體吸收前后與A、B、O三型紅細(xì)胞(試管法)呈陽(yáng)性反應(yīng)例數(shù)如表2所示。
2.3 放散吸收前后患者ABO正、反定型的一致性 33例AIHA患者紅細(xì)胞和血漿經(jīng)抗體放散、吸收前, ABO正、反定型不一致的7例;經(jīng)抗體放散、吸收處理后, ABO正、反定型全部一致。
2.4 AIHA患者紅細(xì)胞、血漿, 經(jīng)放散和吸收的凝聚胺法交叉配血試驗(yàn)結(jié)果 33例AIHA患者紅細(xì)胞、血漿, 經(jīng)放散和吸收的凝聚胺法交叉配血試驗(yàn)結(jié)果如表3所示。
表1 抗體放散前后患者紅細(xì)胞血型抗-A、抗-B、抗-AB、抗RhD呈陽(yáng)性反應(yīng)對(duì)比(n)
表2 抗體吸收前后患者血漿與A、B、O三型紅細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)對(duì)比(n)
表3 抗體放散吸收前后患者交叉配血試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比(n)
AIHA的自身抗體分為冷抗體型和溫抗體型, 少數(shù)為混合型。冷抗體型AIHA多為IgM型, 4℃活性最強(qiáng), 可以干擾鹽水介質(zhì)中的血型鑒定和交叉配血試驗(yàn);溫抗體型AIHA多為IgG型, 37℃活性最強(qiáng), 可以干擾低離子介質(zhì)中的血型鑒定和交叉配血試驗(yàn)。
AIHA患者因血清中存在自身抗體, 而且部分患者還同時(shí)存在同種抗體, 因自身抗體能凝集患者及他人紅細(xì)胞而導(dǎo)致ABO血型尤其是Rh血型鑒定困難[2-4], 通過(guò)對(duì)AIHA患者紅細(xì)胞、血漿, 進(jìn)行抗體放散和吸收, 排除其對(duì)ABO血型和RhD血型鑒定的干擾。RhD血型鑒定沒(méi)有正、反定型相互印證;因此, 遇患者ABO正、反定型不一致, 反定型出現(xiàn)O型紅細(xì)胞凝集或交叉配血不合, RhD血型鑒定弱凝集等現(xiàn)象時(shí), 可以對(duì)患者紅細(xì)胞進(jìn)行抗體放散后再行RhD血型鑒定。
33例AIHA患者紅細(xì)胞、血漿, 經(jīng)放散和吸收處理后,凝聚胺法交叉配血時(shí)有1例主側(cè)不合, 考慮同種抗體存在。檢測(cè)同種抗體的最好方法, 是應(yīng)用酶處理細(xì)胞或用患者自身紅細(xì)胞對(duì)自身血清作抗體吸收, 排除自身抗體的干擾, 然后再用譜細(xì)胞對(duì)吸收后的血清進(jìn)行抗體檢測(cè), 90%以上的AIHA病例可檢出同種抗體[5]。
輸血治療一般只用于溶血危象或AIHA暴發(fā)型出現(xiàn)心肺功能障礙者, 對(duì)慢性型經(jīng)治療貧血無(wú)好轉(zhuǎn)時(shí)也可輸血。
[1]楊世明,張紅麗,張勇萍,等.自身免疫性溶血性貧血患者的血清學(xué)特異檢測(cè)分析.細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志, 2008(8): 834-835.
[2]魏亞明,呂毅.基礎(chǔ)輸血學(xué).北京:人民衛(wèi)生出版, 2011:399-405.
[3]胡麗華.臨床輸血檢驗(yàn).中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 2004:151-153.
[4]張魯平,李繼明,劉雯馨.自身免疫性溶血性貧血引起血型及配血困難2例.臨床血液學(xué)雜志(輸血與檢驗(yàn)版), 2007, 4(2):95-96.
[5]肖星甫.輸血技術(shù)手冊(cè).成都: 四川省科學(xué)技術(shù)出版社, 1992:89-98.