李寶莉 朱 梅 陳雅慧 朱建文 高 楓 張正祥

(延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院，陜西 延安 716000)

酸柏梔油軟膠囊是將酸棗仁、柏子仁、梔子的有效成分——酸棗仁油、柏子仁油、梔子油配伍組成的復(fù)方制劑?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，酸棗仁油具有鎮(zhèn)靜催眠、促學(xué)習(xí)記憶作用〔1～3〕，柏子仁油有鎮(zhèn)靜催眠等作用〔4，5〕，梔子油有鎮(zhèn)靜、催眠、抗驚厥及促學(xué)習(xí)記憶等作用〔6，7〕。本研究擬更準(zhǔn)確地了解該復(fù)方軟膠囊中脂肪酸和維生素E的組成。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥品 酸棗仁油由陜西旭煌植物科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)，批號(hào):XHS-080107。柏子仁油由廣西山云生化科技有限公司生產(chǎn)，批號(hào):081012。梔子油由廣西山云生化科技有限公司生產(chǎn)，批號(hào):080501。酸柏梔油軟膠囊由西安東盛醫(yī)藥研究所生產(chǎn)，酸棗仁油、柏子仁油、梔子油配比為 3∶3∶1，0.5 g/粒，批號(hào):081120。

1.1.2 試劑 脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品，α-生育酚、δ-生育酚、δ-生育酚(純度95%，Sigma公司)，苯并〔e〕芘標(biāo)準(zhǔn)液、甲醇為色譜純，濃鹽酸、石油醚(60℃ ～90℃)、正己烷、無水乙醚、無水乙醇、無水硫酸鈉、三氟化硼、氫氧化鈉、氫氧化鉀、抗壞血酸、硝酸銀、氨水，均為分析純。

1.1.3 儀器 氣相色譜儀:型號(hào)GC4011A(北京東西分析有限公司)，氫火焰離子化檢測器(FID)，微量進(jìn)樣器(10μl)，電子天平，調(diào)熱磁力攪拌器。高效液相色譜儀帶紫外分光檢測器，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，高速離心機(jī)，恒溫水浴鍋，紫外分光光度計(jì)。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件

1.2.1.1 酸柏梔油軟膠囊脂肪酸的氣相色譜條件 色譜柱:石英毛細(xì)管聚乙二醇柱，型號(hào):Agilent HP-INNOWAX，19091N-133(30 m×0.53 mm×0.25μm);載氣為高純氮?dú)狻Ｉ郎爻绦?由 80℃ 開始，10℃/min升高至 140℃，保持 5 min，再以3℃/min升高至170℃，保持40 min。汽化室溫度230℃，檢測器溫度230℃。氮?dú)饬魉?5 ml/min;分流比9;氫氣流量為35.0 ml/min，空氣流量為350.0 ml/min。進(jìn)樣量1μl。

1.2.1.2 酸柏梔油軟膠囊維生素E的液相色譜條件 色譜柱:ultrasphere ODS-C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)，流動(dòng)相:甲醇+水=98+2;紫外檢測器波長:295 nm;流速1.7 ml/min。進(jìn)樣量20μl。

1.2.1.3 維生素E標(biāo)準(zhǔn)液 用脫醛乙醇分別溶解α-生育酚、δ-生育酚、δ-生育酚標(biāo)準(zhǔn)品，使其濃度大約為1 ml相當(dāng)于1 mg。臨用前用紫外分光光度法分別標(biāo)定此三種維生素E的準(zhǔn)確濃度。

1.2.2 測定步驟

1.2.2.1 脂肪酸的測定 參照GB/T17376-7-1998方法進(jìn)行分析，將酸柏梔油軟膠囊內(nèi)容物過40目篩，精密稱取0.35 g，置于皂化瓶中，加0.5 mol/L的氫氧化鈉甲醇溶液2 ml，充以氮?dú)?，?65±5)℃水浴中加熱20 min，待油珠溶解，放冷至室溫時(shí)，加入15%三氟化硼甲醇溶液2 ml，再在水浴上加熱5 min，冷卻至室溫，精密加入經(jīng)氫氧化鈉飽和的正己烷5 ml，振搖提取1 min，靜置分層后，取上清液經(jīng)無水硫酸鈉脫水供GC分析。

1.2.2.2 維生素E的測定 (1)皂化:將酸柏梔油軟膠囊內(nèi)容物過40目篩，精密稱取2 g試樣置于皂化瓶中，加入30 ml無水乙醇，攪拌均勻。再加5 ml 10%抗壞血酸，1%苯并〔e〕芘標(biāo)準(zhǔn)液2 ml，混合均勻。繼續(xù)加入50%氫氧化鉀10 ml，混合均勻。然后在沸水浴中回流30 min使皂化完全，皂化后立即放入冰水中冷卻。(2)提取:將皂化液移入分液漏斗中，取60 ml蒸餾水分2～3次沖洗皂化瓶，沖洗液合并到分液漏斗中。取100 ml乙醚分2次沖洗皂化液及殘?jiān)?，沖洗液并入分液漏斗后，輕輕振搖2～3 min，靜置分層，棄去水層。(3)洗滌:取約50 ml蒸餾水洗分液漏斗中的乙醚層，直到水層不顯堿性為止。(4)濃縮:將無水硫酸鈉(約5 g)濾過的乙醚提取液，濾入球形蒸發(fā)瓶中，用100 ml乙醚沖洗3次分液漏斗及無水硫酸鈉，并入蒸發(fā)瓶，連接旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，在55℃水浴中減壓蒸餾至約2 ml，取下蒸發(fā)瓶，立即用氯氣吹掉乙醚，加入2 ml乙醇，充分混勻溶解提取物。再將乙醇液移入離心管，5 000 r/min離心5 min，取上清液供色譜分析。

2 結(jié)果

酸柏梔油軟膠囊中維生素E組成:δ-維生素E(mg/100 g)占(4.34%)，γ +β-維生素 E(mg/1 000 g)占(34.6%)，α-維生素E(mg/100 g)占(8.69%)，維生素 E總量(mg/100 g)占(47.6%)。酸柏梔油軟膠囊中脂肪酸組成及含量見表1。

表1 酸柏梔油軟膠囊脂肪酸組成及含量

3 討論

酸柏梔油軟膠囊中含有豐富的油酸、亞油酸、亞麻酸和維生素E。油酸、亞油酸在體內(nèi)可以代謝為γ-亞麻酸，二高-γ-亞麻酸、花生四烯酸及前列腺素E1或其他前列腺素和白三烯等〔8，9〕;而α-亞麻酸進(jìn)入體內(nèi)后轉(zhuǎn)化為機(jī)體必需的生命活性因子EPA和DHA。其中二高-γ-亞麻酸、花生四烯酸、EPA、DHA被稱為多不飽和脂肪酸〔10〕。

多不飽和脂肪酸可以降低血中總膽固醇和甘油三酯，并降低血液黏稠度，從而改善微循環(huán)。多不飽和脂肪酸也不調(diào)節(jié)心臟功能，提高腦細(xì)胞的活性，增強(qiáng)記憶力和思維能力，增強(qiáng)人體防御系統(tǒng)的功能。此外，多不飽和脂肪酸還可以排除人體內(nèi)多余的“垃圾”，也就是排除攝入過量飽和脂肪酸形成的多余脂肪。因此，多不飽和脂肪酸能調(diào)節(jié)人體的脂質(zhì)代謝，治療和預(yù)防心腦血管疾病，促進(jìn)生長發(fā)育，對(duì)抗癌、免疫調(diào)節(jié)、延緩衰老、減肥、美容等方面均具有重要的生理作用〔11〕。多不飽和脂肪酸性質(zhì)活潑，暴露在空氣中很快自動(dòng)發(fā)生氧化變質(zhì)，其結(jié)構(gòu)中的不飽和雙鍵發(fā)生過氧化反應(yīng)，引起體內(nèi)脂質(zhì)過氧化，破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能，引發(fā)蛋白質(zhì)交聯(lián)，破壞酶活性，損傷細(xì)胞核，引發(fā)炎癥、動(dòng)脈粥樣硬化，使免疫功能下降，致突變、癌變等〔12〕，從而失去其商業(yè)和營養(yǎng)價(jià)值。

維生素E又名生育酚，為脂溶性維生素，是常用的抗氧化劑或抗氧化助劑，能保護(hù)體內(nèi)易氧化的紅細(xì)胞及其他物質(zhì)不被氧化，從而保證了各組織器官的供氧，同時(shí)具有清除自由基的作用〔13～15〕，故化學(xué)家稱它為“體內(nèi)警察”〔16〕。維生素 E 又是生理活性物質(zhì)，能維持人體的生殖系統(tǒng)和肌肉正常代謝，維持中樞神經(jīng)和血管系統(tǒng)的完整，與多不飽和脂肪酸具有協(xié)同作用。

酸柏梔油軟膠囊組方中的三味藥酸棗仁、柏子仁、梔子仁均為藥食同源物品，軟膠囊中自身含有大量的多不飽和脂肪酸以及維生素E，維生素E既協(xié)同多不飽和脂肪酸發(fā)揮藥理作用，同時(shí)也防止了多不飽和脂肪酸的氧化作用，其藥用價(jià)值或保健功效需進(jìn)一步研究開發(fā)。

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