[摘要] 目的 探討四川富順地區(qū)不同程度宮頸病變患者人乳頭瘤病毒（HPV） 感染與宮頸病變的關(guān)系。 方法 應用基因芯片技術(shù)對富順地區(qū)295例婦女不同程度宮頸病變樣本，分為慢性宮頸炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、乳頭狀瘤及宮頸癌6組，分別進行HPV基因分型檢測。結(jié)果 （1）HPV總感染率為58.98% ， 各組獨立性x2及線性趨勢x2檢驗差異均有統(tǒng)計學意義 （P<0.05），其中，慢性炎癥組為28.10%，與其余各組差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），乳頭狀瘤組為92.86%，與慢性炎癥和CINI組差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。（2）HR-HPV感染率為63.73%，獨立x2及線性趨勢x2檢驗差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），其中，宮頸癌組（95.35%）與炎癥（35.54%）、CINI（77.27%）及乳頭狀瘤組（57.14%）差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。（3）LR-HPV感染率為21.36%，乳頭狀瘤組（92.86%）與其余各組差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），宮頸癌組（27.91%）與炎癥組（13.22%）差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。 結(jié)論 富順地區(qū)婦女不同程度的宮頸病變與HPV及HR-HPV感染率有關(guān)，且有隨感染率升高而病變程度加重的趨勢。乳頭狀瘤的高危因素為LR-HPV感染。

[關(guān)鍵詞] 四川富順地區(qū)；人乳頭瘤病毒；基因芯片技術(shù)；宮頸癌

[中圖分類號] R737.33 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2013）19-18-03

宮頸癌是全球女性第二位最常見的惡性腫瘤[1]，雖然其發(fā)生發(fā)展是多因素共同作用的結(jié)果，但目前認為高危型HPV持續(xù)感染是引發(fā)宮頸癌的主要病因，并且HPV疫苗對

預防宮頸癌有明顯的效果[2-3]。本研究旨在了解富順地區(qū)女性HPV感染與宮頸病變程度的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2011年5月～2013年3月，年齡20～70周歲，在瀘州醫(yī)學院附屬醫(yī)院、富順縣人民醫(yī)院、富順縣婦幼保健院就診及手術(shù)切除的295例宮頸病變患者（宮頸脫落細胞樣本155例，石蠟樣本140例）。

1.2 研究方法

1.2.1 標本采集 由上述醫(yī)院取宮頸脫落細胞，制成細胞懸液保存在專門的取樣器皿中，粘貼患者條碼，隨后送實驗室保存于4℃冰箱中，3d內(nèi)完成檢測。宮頸脫落細胞準備如方莉等[4]所述。石蠟樣本取自瀘州醫(yī)學院附屬醫(yī)院及富順縣人民醫(yī)院病理科庫。

1.2.2 HPV分型檢測 利用GPMT W2600系統(tǒng)，可同時檢測24種不同亞型的HPV，包括高危型16種，即HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68和81；低危型8種，即HPV6、11、40、42、43、44、54和70。DNA提取試劑盒、PCR Taq-擴增混合液，基因分析陽性對照液池內(nèi)控品、雜交緩沖液、HPV基因芯片、基因分型分析儀及PCR儀均由北京金菩嘉有限責任公司提供，具體操作如我們已報道所述[5]。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用Microsoft Excel 2003和SPSS13.0軟件進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析。感染構(gòu)成比間采用x2檢驗，相關(guān)性分析采用獨立性x2及線性趨勢x2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 宮頸病變程度與HPV感染的關(guān)系

295例患者包括慢性炎癥、CINI、CINII、CINIII、乳頭狀瘤/尖銳濕疣、原位及浸潤性癌，各組例數(shù)分別為：121、44、35、38、14和43例。（1）HPV總檢出陽性率為58.98%（174/295），高危型感染率63.73%（188/295），低危型感染率為21.36%（63/295），單一感染率為40%（118/295）。（2）不同程度的宮頸病變HPV感染率情況：慢性炎癥組HPV感染率為28.10%，與其余各組差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；乳頭狀瘤組HPV感染率為92.86%，與慢性炎癥組及CINI組有統(tǒng)計學意義（x2=23.187，P<0.05；x2=5.497，P<0.05）；各組獨立性x2檢驗：x2=92.658， P<0.05，列聯(lián)系數(shù)R=0.489，及線性趨勢x2檢驗：x2=77.303，P<0.05。（3）HR-HPV感染情況：宮頸癌組與炎癥組、CINI、乳頭狀瘤組差異存在統(tǒng)計學意義（x2=23.187，P<0.05；x2=5.497，P<0.05；x2=12.778，P<0.05）；各組獨立性x2檢驗：x2=78.280，P<0.05，列聯(lián)系數(shù)R=0.458，線性趨勢x2檢驗：x2=53.177，P<0.05。（4）LR-HPV感染情況：乳頭狀瘤組（92.86%）最高與其余各組差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），宮頸癌組與炎癥組差異存在統(tǒng)計學意義（x2=4.831，P<0.05）。（5）單一感染情況：乳頭狀瘤組最高與炎癥組、CINI組差異存在統(tǒng)計學意義（x2=30.183，P<0.05；x2=9.466，P<0.05），炎癥組最低與CINI組差異有統(tǒng)計學意義（x2=5.925，P<0.05），CINII各組差異無統(tǒng)計學意義（x2=1.59，P>0.05）。詳見表1。

2.2 高、低危HPV亞型與宮頸病變的關(guān)系

在174例陽性標本中，不同HPV亞型在不同宮頸病變中的分布情況如表2所示。（1）高危型HPV亞型感染率中HPV16（25.42%）最高，與其余各高危型差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），其次分別是58、52和81，但HR-HPV各亞型在不同宮頸病變中的分布差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

（2）LR-HPV6、11和43感染率和在不同宮頸病變中的分布差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

3 討論

明確HPV感染與宮頸病變的相關(guān)性及其亞型分布特

點，對HPV所致疾病的防治及相應疫苗開發(fā)應用有著重要的指導意義。本研究主要采用基因芯片技術(shù)，對富順地區(qū)295例不同宮頸病變患者HPV感染狀況進行分析，24種待測亞型均有檢出。如表1所示，慢性炎癥組總體HPV感染率最低且與其余各組均有統(tǒng)計學差異；乳頭狀瘤組感染率最高，但只與慢性炎癥組和CINI組有統(tǒng)計學差異；各組獨立性x2及線性趨勢x2檢驗均顯示有統(tǒng)計學意義。同樣，高危HPV感染率各組獨立性x2及線性x2檢驗也均有統(tǒng)計學意義。宮頸癌組與炎癥組、CINI、乳頭狀瘤組差異有統(tǒng)計學意義。以上說明富順地區(qū)宮頸病變婦女總HPV感染率及HR-HPV感染率與不同程度的宮頸病變程度有關(guān)系，且有隨宮頸病變程度加重而升高的趨勢，提示HR-HPV是宮頸癌和高度上皮內(nèi)瘤變的危險因素。這與國內(nèi)楊松等[6]研究結(jié)果一致。LR-HPV檢測顯示，乳頭狀瘤組感染率最高，與其余各組差異均有統(tǒng)計學意義，說明乳頭狀瘤的高危因素是LR-HPV感染。宮頸癌組LR-HPV感染率比炎癥組顯著增高，這種差異是否提示宮頸組織癌變后更易合并低危型HPV感染，或是由于此次檢測的樣本量有限所致，還需大樣本量來進一步研究證實。

從感染型別上看，富順地區(qū)宮頸病變婦女低危型以HPV6、11和43最為常見，各低危亞型在不同宮頸病變中的分布差異也無統(tǒng)計學意義，可能與感染低危型HPV樣本量較少有關(guān)。高危型HPV感染以HPV16最高，其次分別是58、52和81，但HR-HPV各亞型在不同宮頸病變中的分布差異無統(tǒng)計學意義?？紤]到樣本量不多的情況，該結(jié)論不能說明不同高危型別HPV與宮頸病變程度無關(guān)，但結(jié)合以上結(jié)果仍可得出HPV16是富順地區(qū)宮頸病變的優(yōu)勢型別的結(jié)論。Masayoshi等[7]的報道顯示，日本婦女宮頸病變達CINIII者感染HPV亞型前4位依次為HPV16、52、58和31，并指出CINII發(fā)展為CINIII的進程和概率依賴于HPV基因亞型。Jorge等[8]報道委內(nèi)瑞拉地區(qū)婦女宮頸病變?yōu)镃INIII和浸潤性宮頸癌常見HPV感染亞型依次為16、18、31和33，在CINII宮頸病變中依次為HPV16、31、51和52，并且HPV16或18在CINIII病變中感染率更高。Miranda等[9]報道巴西地區(qū)婦女宮頸組織細胞學正常者常見HPV感染為16、6、61、83、66。羅招云等[10]報道潮州地區(qū)婦女伴有HPV52、16、58、68、33和18感染者發(fā)生宮頸癌的比例大幅度增加。Bao等[11]的報道中18型感染率也較高，而本次研究中18型在高危型中比例較低（8/188），原因可能仍與樣本量較少有關(guān)。以上均說明HPV16是高度宮頸病變的危險因素，與國內(nèi)Jia等[12]報道的一致。

總之，富順地區(qū)宮頸病變婦女HPV及HR-HPV感染率與不同程度的宮頸病變有關(guān)，且有隨感染率升高而宮頸病變程度加重的趨勢。HR-HPV是宮頸癌和高度上皮內(nèi)瘤變的危險因素，LR-HPV是尖銳濕疣等良性性傳播疾病的主要危險因子。

[參考文獻]

[1]Bosch FX，Lorincz A，Mu?oz N.The causal relation between human papillomavirus and cervical cancer[J].J Clin Pathol，2002，55：244-265.

[2] 單玉珍，馬向東，劉明暉，等.西安市長安區(qū)婦科就診婦女高危型HPV感染及亞型分布調(diào)查研究[J].中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志，2012，14（4）：38-41.

[3] 趙文華.HPV疫苗預防宮頸癌及HPV相關(guān)感染的有效性與安全性[J].中國醫(yī)藥科學，2012，2（20）：233-234.

[4] 方莉，黃義山，唐中，等.南充地區(qū)女性人乳頭瘤病毒感染狀況分析[J].中國婦幼健康研，究，2011，22（1）：69-71.

[5] 李世寧，阮思蓓，鄧正華，等.瀘州地區(qū)人乳頭瘤病毒感的分子流行病學研究[J].現(xiàn)代預防醫(yī)學，2013，40（16）：156-159.

[6] 楊松，何銀，薛麗萍，等.靖江地區(qū)宮頸病變患者高危型人乳頭瘤病毒感染及其基因型分析[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學進展，2011，11（12）：2342-2344.

[7] Masayoshi H，Hiromasa F，Sharon JBH，et a1.Incidence risk of cervical intraepithelial neoplasia 3 or more severe lesions is a function of human papillomavirus genotypes and severity of cytologic al and histological abnormal ities in adult Japanese women[J].Int J Cancer，2013，132（2）：327-334.

[8] Jorge SL，Paula C，Carmen LL，et a1.Human papillomavirus in invasive cervical cancer and cervical intraepithelialneoplasia 2 and 3 in Venezuela：A cross-sectional study[J].Cancer Epidemiol，2012，36（5）：e284-278.

[9] Miranda PM，Pitol BCV，Moran MS，et a1.Human papillomavirus infection in Brazilian women with normal cervical cytology[J]. Genet Mol Res，2012，11（2）：1752-1761.

[10] 羅招云，楊立業(yè)，林敏，等.潮州地區(qū)高危型人乳頭瘤病毒載量與宮頸病變的關(guān)系[J].臨床與實驗病理學雜志，2012，28（5）：526-529.

[11] Bao YP，Li N，Smith JS，et al.Human papillomavirus type- distribution in the cervix of Chinese women：a meta-analysis[J].Int J STD AIDS，2008，19（2）：106-111.

[12] Jia J，Jennifer SS，He Wang，et a1.Seroprevalence of human papillomavirus types 6，11，16 and 18 in Chinese women[J].BMC Infect Dis，2012，12（1）：137-147.

（收稿日期：2013-09-04）

[基金項目]瀘州醫(yī)學院博士啟動基金（2011204）；四川省瀘州市科技局科技計劃項目（2013-S-47）。