李暢

摘 要：綜述了近年來(lái)在植物性食品中農(nóng)藥殘留分析技術(shù)中廣泛應(yīng)用的氣相色譜法、液相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用法、液質(zhì)聯(lián)用法、安培檢測(cè)法和免疫分析技術(shù)等幾種分析檢測(cè)技術(shù)，并展望了植物性食品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展前景。

關(guān)鍵詞：植物性食品；農(nóng)藥殘留；檢測(cè)技術(shù)；研究進(jìn)展

中圖分類號(hào) Q949 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2013）08-127-03

農(nóng)藥殘留（Pesticide residues）是農(nóng)藥使用后一個(gè)時(shí)期內(nèi)沒(méi)有被分解而殘留于生物體、收獲物、土壤、水體、大氣中的微量農(nóng)藥原體、有毒代謝物、降解物和雜質(zhì)的總稱[1-2]。農(nóng)藥殘留問(wèn)題是隨著農(nóng)藥大量生產(chǎn)和廣泛使用而產(chǎn)生的。第二次世界大戰(zhàn)以前，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用的農(nóng)藥主要是含砷汞或含硫、鉛、銅等的無(wú)機(jī)物，其代謝產(chǎn)物砷、汞等最終無(wú)法降解而殘存于環(huán)境和植物體中。隨著時(shí)代的發(fā)展，越來(lái)越多的農(nóng)藥新品種開(kāi)發(fā)出來(lái)并廣泛使用，農(nóng)藥尤其是有機(jī)農(nóng)藥的大量施用，造成嚴(yán)重的農(nóng)藥污染，對(duì)人體健康產(chǎn)生嚴(yán)重威脅[3-4]。我國(guó)已制定的一些農(nóng)副產(chǎn)品中的農(nóng)藥最高殘留限量值，如《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763-2012）[5]規(guī)定了322種農(nóng)藥2293項(xiàng)最大殘留限量。研究植物性食品中農(nóng)藥殘留問(wèn)題對(duì)于減少農(nóng)藥使用量，提高我國(guó)植物性食品的質(zhì)量，應(yīng)對(duì)國(guó)際貿(mào)易壁壘，提升我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品的國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力有著重要的現(xiàn)實(shí)和理論意義。

本文就近年來(lái)在植物性食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)領(lǐng)域快速發(fā)展的檢測(cè)方法，包括氣相色譜法、液相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用法、液質(zhì)聯(lián)用法、安培檢測(cè)法和免疫分析技術(shù)等作了綜述，并展望了農(nóng)藥殘留檢測(cè)的發(fā)展方向。

1 食品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)

1.1 氣相色譜法 氣相色譜法的分離原理是利用要分離的諸組分在流動(dòng)相和固定相兩相間的分配有不同的分配系數(shù)，當(dāng)兩相作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，組分在兩相間的分配反復(fù)進(jìn)行數(shù)百次到數(shù)千次，最后使這些組分得到徹底分離并且檢測(cè)的目的。氣相色譜法是具有高靈敏度、高選擇性、高效能、速度快、應(yīng)用范圍廣、所需試樣量少等優(yōu)點(diǎn)，所以氣相色譜法是用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)最廣泛的方法之一。

我國(guó)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 5009.20-2003對(duì)食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的測(cè)定[6]，就是規(guī)定應(yīng)用氣相色譜法，火焰光度檢測(cè)器（FPD）來(lái)檢測(cè)水果、谷物、蔬菜中的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量，一次可以檢出16種有機(jī)磷農(nóng)殘。

周曉龍采用氣相色譜法測(cè)定了蔬菜中百菌清、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的殘留量。通過(guò)對(duì)芹菜進(jìn)行添加回收率試驗(yàn)，結(jié)果表明此方法前處理簡(jiǎn)單、易操作，回收率在81.4%～112.8%，變異系數(shù)（RSD）為2.04%～9.32%，最低檢測(cè)濃度為0.38～0.73μg/kg[7]。

王建華等人創(chuàng)立了含硫蔬菜（洋蔥、大蒜、青蔥、韭菜等）中有機(jī)磷、有機(jī)氯和擬除蟲(chóng)菊酯多類農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，采用微波爐處理樣品40 s滅酶活性，然后采用乙腈均質(zhì)提取，固相萃取柱凈化，用氣相色譜-電子俘獲檢測(cè)器（ECD）及火焰光度檢測(cè)器檢測(cè)。該方法檢測(cè)限低，靈敏度高，能夠滿足檢測(cè)要求[8]。

1.2 液相色譜法 高效液相色譜法有“四高一廣”的特點(diǎn)：高壓、高速、高效、高靈敏度、應(yīng)用范圍廣，高效液相色譜更適宜于分離、分析高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、有生理活性及相對(duì)分子量比較大的物質(zhì)。在農(nóng)殘檢測(cè)領(lǐng)域，液相檢測(cè)方法檢出限比氣相高，不如氣相靈敏，所以常用來(lái)分析熱穩(wěn)定性差、易分解的農(nóng)藥。

我國(guó)的進(jìn)出口標(biāo)準(zhǔn)SN/T 1753-2006進(jìn)出口濃縮果汁中噻菌靈、多菌靈殘留量的檢測(cè)方法[9]就是利用高效液相色譜、二極管陣列檢測(cè)器（DAD）檢測(cè)的。

林維宣等人研究了用高效液相色譜-紫外檢測(cè)器方法同時(shí)檢測(cè)大米中8種氨基甲酸酯類農(nóng)藥（殺線威、滅多威、涕滅威、抗芽威、殘殺威、苯惡威、西維因、仲丁威）的殘留量，研究結(jié)果表明用丙酮作為提取劑，用florisil和C18固相萃取凈化柱雙柱凈化樣品，簡(jiǎn)化了凈化操作，且提高了檢測(cè)靈敏度[10]。

1.3 氣質(zhì)聯(lián)用法 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）既具有氣相色譜高分辨率，又具有質(zhì)譜檢測(cè)高靈敏度優(yōu)點(diǎn)，可同時(shí)準(zhǔn)確快速地測(cè)定樣品中多種農(nóng)藥殘留，已經(jīng)被許多國(guó)家開(kāi)發(fā)并應(yīng)用在農(nóng)藥殘留檢測(cè)領(lǐng)域。

吳巖等以V（乙腈）∶V（水）=4：1為提取劑，經(jīng)高速勻漿方法提取，提取液以ENVI-18固相萃取柱凈化，除去樣品中大部分的脂肪和甾醇等干擾基質(zhì)，再經(jīng)在線凝膠滲透色譜-氣相色譜/質(zhì)譜（GPC-GC/MS）分析，加標(biāo)水平為0.05mg/kg時(shí)，大部分農(nóng)藥的回收率為65%～120%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于15%，44種農(nóng)藥的檢出限為0.002～0.05mg/kg[11]。

郭嵐等人創(chuàng)立了一種可同步測(cè)定食用植物油中4種類型共29種農(nóng)藥殘留的分析方法，樣品用凝膠滲透色譜提取凈化，然后用自動(dòng)快速濃縮儀濃縮后直接用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）測(cè)定，其在0.05mg/kg、0.10mg/kg、0.20mg/kg 3個(gè)添加水平的平均回收率為82%～119%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.35%～10.2%，29種農(nóng)藥殘留分析方法檢出限和定量下限分別為0.1～10.0μg/kg和0.4～33.0μg/kg[12]。

王耀等人用乙腈為溶劑，樣品經(jīng)ASE萃取，提取液用凝膠滲透色譜除去脂類、蛋白質(zhì)和大部分的色素，再經(jīng)Carb/PSA小柱凈化；采用GC-MS定性分析、GC-FPD定量分析；加標(biāo)水平為0.05～0.20mg/kg時(shí)，農(nóng)藥的回收率為64.5%～98.6%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.7%～14.7%。此方法的檢出限為0.6～9.0 μg/kg（以3倍性噪比計(jì)） [13]。

1.4 液質(zhì)聯(lián)用法 農(nóng)藥殘留分析多采用氣相色譜法和氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)方法，但是隨著農(nóng)藥種類的不斷增多，很多農(nóng)藥殘留不適用氣相色譜分析。近年來(lái)，一些文獻(xiàn)報(bào)道了農(nóng)藥殘留利用液質(zhì)聯(lián)用分析的方法。液質(zhì)聯(lián)用（HPLC-MS）全稱叫液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用，分離系統(tǒng)為液相色譜，檢測(cè)系統(tǒng)為質(zhì)譜，樣品經(jīng)過(guò)分離并且離子化后，經(jīng)質(zhì)譜檢測(cè)器檢測(cè)得到質(zhì)譜圖，HPLC-MS可以分析氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）所不能分析的強(qiáng)極性、難揮發(fā)、熱不穩(wěn)定性的化合物。

柳菡等人創(chuàng)立了蔬菜中26種農(nóng)藥的反相高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜（LC-ESIMS/MS）檢測(cè)方法，樣品經(jīng)乙腈提取、濃縮、固相萃取凈化、經(jīng)過(guò)液質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行測(cè)定，26種農(nóng)藥在5.0～200μg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r2>0.997）；檢出限和定量限均為2.0μg/kg和5.0μg/kg；26種農(nóng)藥的回收率為70%～110%，精密度（RSD）均小于15%；該方法準(zhǔn)確、靈敏、簡(jiǎn)單，適用于蔬菜中26種農(nóng)藥殘留的同時(shí)測(cè)定[14]。

丁濤等人研究了高效液相色譜-柱后衍生熒光檢測(cè)和液質(zhì)聯(lián)用分別測(cè)定大米中14種和16種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的方法，樣品采用二氯甲烷和丙酮的混和溶劑提取后，用柱后衍生熒光檢測(cè)法、離子阱多級(jí)質(zhì)譜聯(lián)用法分別進(jìn)行了測(cè)定，并且比較了兩種方法的適用性；柱后衍生熒光檢測(cè)法檢出限為20～50μg/kg，離子阱多級(jí)質(zhì)譜聯(lián)用法檢出限為10～20μg/kg，添加平均回收率在70%～92%，RSD均低于12%[15]。

1.5 安培檢測(cè)法 安培檢測(cè)法是對(duì)可控電壓下樣品在電極表面發(fā)生氧化或者還原反應(yīng)產(chǎn)生的電解電流進(jìn)行檢測(cè)的方法[16]。安培檢測(cè)法，具有較高的靈敏性，因此，安培檢測(cè)法多年來(lái)已被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境科學(xué)、藥物學(xué)以及食品科學(xué)領(lǐng)域，成為分析化學(xué)中最具前景的研究領(lǐng)域之一。洪琴對(duì)幾種氨基甲酸酯農(nóng)藥的水解行為和電化學(xué)響應(yīng)機(jī)理進(jìn)行了研究，并且建立了5種氨基甲酸酯農(nóng)藥的毛細(xì)管電泳-安培檢測(cè)法分離測(cè)定體系，為分析食品中氨基甲酸酯類農(nóng)殘?zhí)峁┝艘环N快速、簡(jiǎn)單、高效、靈敏度高的新方法[17]。費(fèi)新平等采用高效毛細(xì)管電泳-安培檢測(cè)法對(duì)農(nóng)藥甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷、西維因和速滅威水解產(chǎn)物酚類進(jìn)行了測(cè)定研究，在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，標(biāo)準(zhǔn)樣品15min內(nèi)實(shí)現(xiàn)了基線分離，線性范圍為0.05～10mg/L，測(cè)定檢出限為：間-甲酚為0.04mg/L，α-萘酚為0.02 mg/L，對(duì)硝基苯酚為0.03mg/L；對(duì)硫磷、速滅威和西維因回收率分別為91%、94%和101%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為3.3%、2.5%和2.2%（n=6） [18]。王建華等人報(bào)道了用液相色譜法測(cè)定微量氨基甲酸酯農(nóng)藥的方法，氨基甲酸酯先在堿性條件下水解，生成的酚用液相色譜安培法測(cè)定，研究了最優(yōu)色譜條件。該法簡(jiǎn)單、快速、靈敏，已應(yīng)用于測(cè)定大米中克百威、西維因、異丙威和甲硫磷4種氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留量[19]。

1.6 免疫分析法 免疫分析法是一種利用抗原-抗體特異性識(shí)別與結(jié)合反應(yīng)對(duì)待測(cè)物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析的技術(shù)。免疫分析方法種類較多，按標(biāo)記技術(shù)的不同分為酶標(biāo)記免疫分析、熒光標(biāo)記免疫分析和化學(xué)發(fā)光免疫分析、生物發(fā)光免疫分析等，應(yīng)用比較多的是酶聯(lián)免疫分析法[20]。免疫分析技術(shù)具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便快速、測(cè)試費(fèi)用低等特點(diǎn)，近年來(lái)得到了迅速的發(fā)展。

1.7 其他檢測(cè)方法 鄭義華等人采用酶抑制方法研制了一種適合農(nóng)藥殘留現(xiàn)場(chǎng)速測(cè)的量熱檢測(cè)儀器，該儀器主要由流動(dòng)注射分析系統(tǒng)、半導(dǎo)體恒溫器、固定化酶反應(yīng)柱、量熱傳感器和數(shù)據(jù)采集模塊組成，制成的儀器中半導(dǎo)體恒溫器的控溫精度為±0.1K，量熱傳感器的靈敏度為2mV/K，檢測(cè)儀的空白響應(yīng)為10mV，在1mg/kg敵敵畏時(shí)，得到29%～36%的相對(duì)抑制率，而且樣品能夠在5min完成測(cè)試，快速方便使用，并且儀器可以自動(dòng)處理和存儲(chǔ)數(shù)據(jù)[21]。

許鶴利用熒光光譜技術(shù)的理論，設(shè)計(jì)了農(nóng)藥殘留檢測(cè)系統(tǒng)。該系統(tǒng)能夠抵抗來(lái)自環(huán)境的干擾，可保持自身穩(wěn)定性，能夠經(jīng)受振動(dòng)、噪聲、潮濕等影響，且儀器具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、體積小、價(jià)格低廉等優(yōu)點(diǎn)[22]。

劉暢等速檢測(cè)果蔬中的農(nóng)藥殘留，研制基于酶抑制法的農(nóng)藥殘留速測(cè)試紙。該試紙以鴨血漿膽堿酯酶為檢測(cè)用酶，2，6-二氯靛酚乙酸酯為底物。用該法檢測(cè)只需13min，對(duì)敵敵畏的敏感性最強(qiáng)，對(duì)甲胺磷的敏感性較差，對(duì)幾種常見(jiàn)的有機(jī)磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥的檢出限在0.001～6mg/kg[23]。

2 前景和展望

我國(guó)人口眾多，而且是糧食生產(chǎn)和消費(fèi)大國(guó)，在作物生長(zhǎng)過(guò)程中農(nóng)藥的使用非常廣泛，產(chǎn)品農(nóng)藥殘留問(wèn)題不容小視，今后應(yīng)該加強(qiáng)對(duì)農(nóng)藥污染源頭的治理，多研發(fā)低毒性、易分解的生物農(nóng)藥，減少高毒性、高殘留的化學(xué)農(nóng)藥的使用。我國(guó)農(nóng)藥殘留的分析技術(shù)雖然起步較晚且利用傳統(tǒng)分析方法較多，但是隨著時(shí)代的發(fā)展，我國(guó)的農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)有了很大的提高，氣相色譜法、液相色譜法、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法等檢測(cè)方法得到了快速的發(fā)展和廣泛的應(yīng)用。在農(nóng)殘檢測(cè)工作中減少人為誤差，提高檢測(cè)速度和精度，避免假陽(yáng)性的出現(xiàn)是今后農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法研究的重點(diǎn)。多發(fā)展快速、現(xiàn)場(chǎng)檢驗(yàn)技術(shù)，把農(nóng)藥殘留檢測(cè)提到食品生產(chǎn)的源頭，確保人民的身體健康和生命安全。此外，應(yīng)該多借鑒國(guó)內(nèi)外先進(jìn)的檢測(cè)方法和檢測(cè)技術(shù)，修改我國(guó)現(xiàn)有的農(nóng)藥檢測(cè)方法與標(biāo)準(zhǔn)，以利于在國(guó)際貿(mào)易中克服技術(shù)壁壘問(wèn)題。

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（責(zé)編：陶學(xué)軍）