劉冬霞　劉玉線　黃美瓊　祝少鳳

[摘要] 目的 了解近期本地區(qū)泌尿系統(tǒng)生殖道感染支原體的情況及對(duì)抗生素的耐藥性分析，更好地指導(dǎo)臨床合理用藥，提高治療效果。 方法 采用珠海浪峰生物有限公司生產(chǎn)的“支原體培養(yǎng)、鑒定藥敏試劑盒”，培養(yǎng)解尿支原體（Uu）和人型支原體（Mh），并作藥物敏感試驗(yàn)。 結(jié)果 支原體培養(yǎng)陽性檢出率為57%，其中Uu檢出率最高，為69.5%；Mh檢出率較低，為9.5%；Uu合并Mh感染檢出率為21%。藥敏結(jié)果顯示，支原體對(duì)環(huán)丙沙星（CPF）的耐藥率最高，達(dá)81%；其次左氧氟沙星（CRA），達(dá)63.1%。對(duì)美滿霉素（MIV）的耐藥率最低，為0.35%。加替沙星（GAT）、甲砜霉素（THI）、羅紅霉素（ROX）、紅霉素（ERY）、阿奇霉素（AZI）、環(huán)脂霉素（ECC）、克拉霉素（CLA）、強(qiáng)力霉素（DOX）、交沙霉素（JOS）的耐藥率分別為：57.9%、43.2%37.9%35.8%31.6%、22.1%、20%、4.2%、1.8%。 結(jié)論 泌尿生殖道分泌物支原體培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)對(duì)臨床診斷和治療起著重要的指導(dǎo)作用，臨床醫(yī)生應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果合理使用抗生素。

[關(guān)鍵詞] 泌尿生殖道；感染；解尿支原體；人型支原體；藥敏試驗(yàn)；耐藥性

[中圖分類號(hào)] R518.9 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 2095-0616（2013）09-128-02

支原體是已知可以自由生活的最小生物，也是最小的原核細(xì)胞型微生物，是引起女性非淋菌性宮頸炎、盆腔炎和輸卵管炎等疾病的重要病原體[1]，可引起不孕癥、流產(chǎn)和宮外孕。近年來隨著支原體感染引起的不孕不育和宮外孕發(fā)病率的不斷增加，同時(shí)由于廣譜抗生素的大量使用，導(dǎo)致耐藥菌株在不斷增加，因而越來越引起臨床的關(guān)注。本文通過對(duì)2012年1月～2012年6月到本院就診的990例疑為非淋菌性泌尿生殖道炎患者的分泌物標(biāo)本進(jìn)行支原體培養(yǎng)及藥敏檢測(cè)，從而更確切地了解本地區(qū)泌尿生殖道感染支原體的狀況和藥敏情況，更好地指導(dǎo)臨床治療支原體感染和合理選擇抗生素提供必要的實(shí)驗(yàn)室診斷依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源

2012年1～6月到本院婦科門診就診，疑為非淋菌性泌尿生殖道炎的患者標(biāo)本990例。

1.2 標(biāo)本采集

必須在治療前采集標(biāo)本，男性用男性尿道拭子取尿道內(nèi)口2～2.5 cm處柱狀上皮細(xì)胞；女性取宮頸管內(nèi)口1～2 cm處的單層柱狀上皮細(xì)胞，取樣拭子不可碰陰道壁，尿液不推薦。

1.3 儀器與試劑

儀器：電熱恒溫培養(yǎng)箱；試劑：采用珠海生物技術(shù)有限公司支原體培養(yǎng)、鑒定藥敏試劑盒（改良肉湯稀釋法），內(nèi)含Uu，Mh雙向支原體培養(yǎng)基、微量藥敏檢測(cè)板及無菌礦物油和吸嘴。檢測(cè)板上有28個(gè)微孔；鑒定區(qū)設(shè)有陰性對(duì)照孔，以及Uu、Mh的鑒定和半定量計(jì)數(shù)孔；藥敏區(qū)設(shè)有12種抗生素的藥敏測(cè)定孔，并分高低兩個(gè)濃度。

1.4 檢測(cè)方法標(biāo)本的處理

培養(yǎng)鑒定及藥敏試驗(yàn)均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。取出試劑復(fù)溫至室溫，編號(hào)，將沒接種標(biāo)本前的培養(yǎng)基取100 μL加入A孔為陰性對(duì)照；把棉拭子插入培養(yǎng)液中，充分浸洗并在瓶壁擠干。加入礦物油1滴覆蓋，蓋好蓋子，置37℃恒溫箱中培養(yǎng)，24 h和48 h分別觀并察結(jié)果。

1.5 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)

培養(yǎng)基不變色為陰性；培養(yǎng)基由橙黃色變成紅色且清亮為陽性，顯示有支原體生長，根據(jù)檢測(cè)板的指示判斷是Uu還是Mh陽性。藥敏區(qū)的判斷也一樣，若高低兩種濃度孔均不變色則為高度敏感；若高濃度孔仍為黃色，而低濃度孔均轉(zhuǎn)變?yōu)榧t色，即判斷為中度敏感；若高低兩種濃度孔均轉(zhuǎn)變?yōu)榧t色，即判斷為對(duì)此藥物耐藥。

2 結(jié)果

2.1 Uu和Mh的檢出率

2.2 藥敏結(jié)果分析

3 討論

支原體是一類缺乏細(xì)胞壁、形態(tài)上呈高度多形性，能通過濾菌器，在無生命培養(yǎng)基中能生長繁殖的最小原核細(xì)胞型微生物。Uu是人類泌尿生殖道最常見的寄生菌之一，在特定的環(huán)境下可以致病，最常見的疾病是非淋菌性尿道炎（NGU）可引起男性前列腺炎和尿道炎，導(dǎo)致不孕不育癥；引起女性陰道炎、宮頸炎，并導(dǎo)致不孕不育、宮外孕甚至流產(chǎn)等婦科疾病。從本研究顯示，2012年上半年本院990例標(biāo)本中，支原體培養(yǎng)的陽性標(biāo)本有570例，占陽性率為57.6%，Uu陽性標(biāo)本有396例，占陽性率飛69.5%，Mh54例，占陽性率的9.5%；Uu合并Mh感染120例，占陽性率的21%。這說明泌尿生殖系統(tǒng)感染的支原體以Uu為主，并以Uu單獨(dú)感染為主，Uu和Mh混合感染也占有一定的比例，Mh單獨(dú)感染較少，與國內(nèi)外報(bào)道的相關(guān)文獻(xiàn)一致[2]。

藥敏試驗(yàn)中，從分析表中發(fā)現(xiàn)，Uu和Mh對(duì)氟喹諾酮類藥物環(huán)丙沙星、氧氟沙星、加替沙星有著高度的耐藥性，此類抗生素主要作用機(jī)制為抑制原核細(xì)胞型微生物DNA旋轉(zhuǎn)酶，已不再適用于支原體感染的治療[3]。而大環(huán)內(nèi)酯類羅紅霉素、紅霉素、阿奇霉素和甲砜霉素的耐藥性也有上升的趨勢(shì)，也可能與該類藥物的不合理應(yīng)用及Uu23SrRNA位點(diǎn)突變有關(guān)[4]，故提醒臨床醫(yī)生對(duì)該類藥物的使用應(yīng)更為謹(jǐn)慎。從本研究中最值得注意的是對(duì)支原體較為敏感的藥物依次是美滿霉素、交沙霉素、強(qiáng)力霉素，這幾種藥物的耐藥率都在百分之十以下，是治療泌尿道支原體感染的首選藥物，與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道一致[5]。由于支原體的耐藥率在不同地區(qū)，或同一地區(qū)不同時(shí)間均可能有較大變化[6]，故對(duì)非淋菌性泌尿生殖道炎患者應(yīng)做支原體鑒定分型及藥物試驗(yàn)，以便確定治療的首選藥物，以防止支原體耐藥株的產(chǎn)生，結(jié)合患者的情況，更合理地使用抗生素。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Taylor-Robinson D，F(xiàn)urr PM.Updateonsexually tranmittedmycop-lasmas[J].Lancet，1998，351（Suppl 3）：1215.

[2] 陳鋒，汪訓(xùn)良.泌尿生殖道支原體感染及藥敏試驗(yàn)動(dòng)態(tài)觀察分析[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，31（4）：384-385.

[3] 劉厚明，詹能勇.2004～2008年泌尿生殖道支原體感染流行病學(xué)及耐藥性變異分析[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2008，30（4）：329-330.

[4] 孟冬婭，馬曉博，何利，等.解脲脲原體23SrRNA位點(diǎn)突變與大環(huán)內(nèi)酯類藥物耐藥的關(guān)系[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2008，31（6）：635-654.

[5] 杜廷義，周兵，劉海云，等.解脲支原體藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析[J].臨床檢驗(yàn)雜志，1998，16（6）：343.

[6] 鄭利雄，王竹.非淋菌性泌尿生殖道炎病原體學(xué)及支原體藥敏檢測(cè)結(jié)果分析[J].華南大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)報(bào)），2002，30（3）：243-244.

（收稿日期：2013-04-15）