楊燕　單萬(wàn)水　韓紅星　李小勇　羅莎莎

[摘要] 目的 為考核南京大淵生物技術(shù)工程有限責(zé)任公司生產(chǎn)的蛋白芯片法檢測(cè)幽門螺桿菌（Hp）抗體及其分型試劑的敏感性和特異性，從而判斷其在臨床診斷中的應(yīng)用價(jià)值。方法 臨床上采用經(jīng)SFDA注冊(cè)的深圳市伯勞特生物制品有限公司的幽門螺桿菌抗體分型檢測(cè)試劑盒（免疫印跡法）檢測(cè)幽門螺桿菌抗體及其分型（分為CagA、VacA和Urease），共檢測(cè)血清476份，檢測(cè)結(jié)果與對(duì)比試劑不同的標(biāo)本用第三方經(jīng)SFDA認(rèn)證的試劑進(jìn)行復(fù)核，對(duì)于Urease不符合的病例，采用北京康美天鴻生物科技有限公司的幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測(cè)試劑盒（膠體金法）進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)于CagA和VacA不一致的標(biāo)本，則采用上海研域生物科技有限公司提供的ELISA試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果 南京大淵生物技術(shù)工程有限責(zé)任公司生產(chǎn)的蛋白芯片法檢測(cè)幽門螺桿菌抗體及其分型試劑CagA陽(yáng)性符合率94.5%，陰性符合率96.5%，總符合率95.8%（P>0.05）；Urease陽(yáng)性符合率95.1%，陰性符合率92.7%，總符合率95.4%（P>0.05）；VacA陽(yáng)性符合率91.6%，陰性符合率97.1%，總符合率95.2%（P>0.05）；兩種方法結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 經(jīng)以上結(jié)果的分析，本次臨床試驗(yàn)的有效病例476例，大淵Hp分型檢測(cè)試劑盒（蛋白芯片法）與伯勞特幽門螺桿菌抗體分型檢測(cè)試劑盒（免疫印跡法）的一致率均在90%以上，產(chǎn)品質(zhì)量達(dá)到臨床使用要求。

[關(guān)鍵詞]幽門螺桿菌抗體；分型；蛋白芯片法；免疫印跡法

[中圖分類號(hào)] R446 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 2095-0616（2013）09-122-03

幽門螺旋桿菌（helicobacter pylori，Hp）是一種革蘭氏陰性桿菌，是能夠在人的胃中生存的唯一微生物種類。幽門螺旋桿菌外形為S形或弧形彎曲，細(xì)菌可以穿過(guò)胃黏膜而定居至胃上皮細(xì)胞，又能產(chǎn)生大量尿素酶，分解尿素在菌體周圍形成一股堿性的“氨云”，可以抵抗胃中的酸性環(huán)境，免受胃酸殺死。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

隨機(jī)選取2013年1月～2013年2月本院門診及住院患者476例。男256例，女220例；年齡1～79歲。平均年齡33.8歲。包括慢性乙型肝炎患者136例，健康體檢者108例，其他疾病患者146例（包括妊娠，結(jié)核，傷寒，甲狀腺功能低下，脂肪肝，高血壓等）以及胃炎胃潰瘍患者86例.

1.2 方法

分別用大淵生產(chǎn)的幽門螺旋桿菌分型檢測(cè)試劑盒（蛋白芯片法）與經(jīng)SFDA注冊(cè)的深圳市伯勞特生物制品有限公司的幽門螺桿菌抗體分型檢測(cè)試劑盒（免疫印跡法）對(duì)以上476例血清進(jìn)行檢測(cè)，并嚴(yán)格按照各自操作說(shuō)明書的要求進(jìn)行操作。對(duì)于Urease不符合的病例，采用北京康美天鴻生物科技有限公司的幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測(cè)試劑盒（膠體金法）進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)于CagA和VacA不一致的標(biāo)本，則采用上海研域生物科技有限公司提供的ELISA試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。

2 結(jié)果

2.1 兩種試劑盒檢測(cè)結(jié)果比較

南京大淵生物技術(shù)工程有限責(zé)任公司生產(chǎn)的幽門螺旋桿菌（Hp）分型檢測(cè)試劑盒（蛋白芯片法）與深圳市伯勞特生物制品有限公司的幽門螺桿菌抗體分型檢測(cè)試劑盒（免疫印跡法）相比較，所做臨床試驗(yàn)有效病例共476例，兩者結(jié)果對(duì)比如下。

2.2 不符樣本的復(fù)檢

經(jīng)以上結(jié)果的分析，本次臨床試驗(yàn)的有效病例476例，大淵Hp分型檢測(cè)試劑盒（蛋白芯片法）與伯勞特幽門螺桿菌抗體分型檢測(cè)試劑盒（免疫印跡法）的一致率在90%以上。CagA指標(biāo)出現(xiàn)的不符合病例、Urease指標(biāo)出現(xiàn)的不符合病例、VacA指標(biāo)出現(xiàn)的不符合病例分析見(jiàn)表2。

由表2可見(jiàn)，南京大淵生物技術(shù)工程有限責(zé)任公司所生產(chǎn)的幽門螺旋桿菌（Hp）分型檢測(cè)試劑盒（蛋白芯片法）與深圳市伯勞特生物制品有限公司的幽門螺桿菌抗體分型檢測(cè)試劑盒（免疫印跡法）進(jìn)行比較，總體來(lái)看二者檢驗(yàn)結(jié)果的一致率已達(dá)到要求，產(chǎn)品質(zhì)量達(dá)到臨床使用要求。

3 討論

近20多年的研究發(fā)現(xiàn)，幽門螺旋桿菌感染是慢性活動(dòng)性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關(guān)淋巴組織（MALT）淋巴瘤和胃癌的主要致病因素。1994年世界衛(wèi)生組織/國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)（WHO/IARC）將幽門螺旋桿菌定為Ⅰ類致癌原[1]。據(jù)文獻(xiàn)[2-3]報(bào)道，CagA蛋白是Ⅰ型HP致病性的標(biāo)志物，CagA蛋白能夠破壞頂端連接，降解基膜，干擾上皮細(xì)胞分化，使上皮細(xì)胞失去極性及細(xì)胞黏附性，伸出遷移偽足具有侵襲性，從而導(dǎo)致廣泛的組織炎癥，促使?jié)儾〉陌l(fā)生發(fā)展[4-5]。HP穿透黏液層在胃上皮細(xì)胞表面定居，對(duì)胃上皮細(xì)胞和胃粘膜屏障等造成破壞作用，刺激上皮細(xì)胞增殖，改變?cè)鲋撑c凋亡的關(guān)系[6-7]。VacA可使上皮細(xì)胞空泡樣變性、損傷、壞死及潰瘍，CagA本身無(wú)細(xì)胞毒性，但與VacA的轉(zhuǎn)錄等功能有關(guān)。另外，我國(guó)Hp成人感染率已達(dá)60%～80%，血清學(xué)檢查絕大部分均為陽(yáng)性，因此，Hp進(jìn)行分型檢測(cè)特別重要，能及時(shí)指導(dǎo)臨床治療。

免疫滲濾定性檢測(cè)作為檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)及前沿技術(shù)，具有特異性好及靈敏度高的特點(diǎn)，因此亦越來(lái)越被臨床檢驗(yàn)所重視。大淵生產(chǎn)的該試劑盒具有快速、簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，適于各級(jí)醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)，特別是社區(qū)基層醫(yī)院用作十二指腸潰瘍、胃潰瘍、淋巴增生性胃淋巴瘤、慢性萎縮性胃炎感染的輔助診斷。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Bjorkholm B，Befrits R Jaup B，et al.Rapid PCR detection of HP associated virulence and resistance genes directly.from gastric biopsy material[J].Clin Microbiol，1998，36：3689-3690.

[2] 王思平.幽門螺桿菌VacA基因致病機(jī)理及胃十二指腸疾病的關(guān)系[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)（消化系統(tǒng)疾病分冊(cè)），1997，17（3）：141.

[3] 張尤力.幽門螺桿菌VacA基因型和CagA基因及其表達(dá)產(chǎn)物[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)（消化系統(tǒng)疾病分冊(cè)），1997，17（3）：141.

[4] Lemke LB，Ge Z，Whary MT，et al.Concurrent Helicobacter bilisinfection in C57BL/6 mice attenuates proinflammatory H. pyloriinduced gastric pathology[J].Infect Immun，2009，77（5）：2147-2158.

[5] Manente L，Perna A，Buommino E，et al.The Helicobacter pyloris protein VacA has direct effects on the regulation of cell cycle and apoptosis in gastric epithelial cells[J].J Cell Physiol，2008，214（3）：582-587.

[6] Manente L，Perna A，Buommino E，et al.The Helicobacter pyloris protein VacA has direct effects on the regulation of cell cycle and apoptosis in gastric epithelial cells[J].J Cell Physiol，2008，214（3）：582-587.

[7] 鄭海玲，莫成錦.免疫印跡法檢測(cè)幽門螺桿菌抗體結(jié)果分析[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)，2008，8（7）：1148，1202.

（收稿日期：2013-04-16）