摘 要：建立了快速檢測水產(chǎn)品中23種全氟烷基化合物（Perfluorinated alkyl substances， PFASs）的超快速液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（UFLC-MS/MS）分析方法。樣品前處理采用QuEChERS方法，以酸化乙腈提取目標(biāo)物，C18填料和石墨化碳黑（GCB）分散固相萃取凈化，C18色譜柱分離，甲醇和5 mmol/L乙酸銨溶液梯度洗脫，多反應(yīng)監(jiān)測負(fù)離子模式掃描。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，采用同位素標(biāo)記的內(nèi)標(biāo)物進(jìn)行內(nèi)標(biāo)法定量，以提高方法的準(zhǔn)確度。23種目標(biāo)物在12 min內(nèi)實(shí)現(xiàn)良好分離，并在各自相應(yīng)濃度范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)不低于0.995，檢出限為0.002～0.02 μg/kg。加標(biāo)回收率在75.6%～118.2%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為2.7%～14.5%。本方法操作簡便，靈敏度高，適用于大批量樣品的快速分析。

關(guān)鍵詞：全氟烷基化合物； 水產(chǎn)品； QuEChERS方法； 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜

1 引 言

全氟烷基化合物（Perfluoroalkylated substances，PFASs）作為一類新型持久性有機(jī)污染物，其高富集特性和“三致”毒性引起國際社會的高度關(guān)注。2009年5月，在日內(nèi)瓦召開的公約締約方第四屆大會上，將全氟辛烷磺酸（鹽）及全氟辛基磺酰氟列入《斯德哥爾摩公約》優(yōu)控名單^[1]。2010年3月17日，歐盟委員會發(fā)布2010/161/EU號^[2]議案，提議開展食品中PFASs的監(jiān)控，特別是魚、肉等能夠反映消費(fèi)習(xí)慣的各類動物源性食品。歐盟針對2000～2009年食品中PFASs污染的調(diào)查結(jié)果表明，水產(chǎn)動物源性食品中PFASs殘留水平明顯高于其它陸源食品，因此提出水產(chǎn)品常態(tài)化監(jiān)控PFASs的建議^[3]。

比較而言，我國對水產(chǎn)品中PFASs污染狀況了解較少，主要原因是缺乏有效的檢測技術(shù)，不僅無法滿足歐盟針對PFASs種類要求^[3]，前處理技術(shù)也多采用堿消解、固相萃取或超聲萃取等方法^[4～6]，與基質(zhì)分散固相萃取、微萃取等^[7～10]高效、快速檢測方法相比， 差距顯著。本研究選取23種重要的PFASs作為目標(biāo)物，包括13種全氟羧酸（Perfluorocarboxylic acids， PFCAs）、5種全氟磺酸（Perfluorosulphonic acids， PFSAs）、3種全氟磺酰胺（Perfluorosulphonamides，F(xiàn)OSAs）和2種全氟磺酰胺乙醇（Perfluorosulphonamidoethanols，F(xiàn)OSEs），采用QuEChERS（Quick，Easy，Cheap，Effective，Rugged and Safe）前處理方法，結(jié)合超快速液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（UFLC-MS/MS）技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了水產(chǎn)品中PFASs的高靈敏、快速檢測。與現(xiàn)有PFASs檢測方法^[11～13]相比，本方法不僅進(jìn)一步擴(kuò)大了PFASs的檢測種類，而且簡化了操作步驟，縮短了檢測時間，提高了檢測靈敏度。利用本方法對市售的水產(chǎn)品進(jìn)行了分析，為進(jìn)一步開展我國水產(chǎn)動物源性食品中PFASs調(diào)查監(jiān)控，提供了工作基礎(chǔ)和技術(shù)支撐。2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 儀器、試劑與材料

3.2 樣品前處理方法的優(yōu)化

本研究將QuEChERS前處理技術(shù)應(yīng)用于水產(chǎn)品中PFASs的提取和凈化，克服了現(xiàn)有方法中的步驟繁瑣、成本較高等缺點(diǎn)^{[4～6，11，13，17，18]}，并采用高速均質(zhì)代替原QuEChERS方法中的振搖提取，確保樣品與試劑充分接觸，提高提取效率； 同時， 定容后高速離心， 以去除大分子雜質(zhì)。

考察了甲酸與分散固相萃取凈化填料用量的不同對目標(biāo)物回收率的影響。乙腈中甲酸的加入量分別為1%， 2%和3%時，23種目標(biāo)物的回收率均大于70%，平均回收率分別為91.8%， 92.9%和93.1%，但3%甲酸-乙腈共萃取的干擾物較多，影響目標(biāo)物的定量分析，故選擇2%甲酸-乙腈為提取劑。考察了C18用量（50～250 mg）對回收率和凈化結(jié)果的影響，C18用量為100或150 mg時，平均回收率均優(yōu)于其它用量（圖2），且凈化后的樣品溶液澄清，去脂效果較好，綜合考慮成本因素，C18用量選擇100 mg。在此基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn) 40 mg GCB即可有效去除色素，且未影響到目標(biāo)物的回收率（平均回收率≥90%）。因此，本方法最終采用100 mg C18+40 mg GCB對樣品提取液凈化，圖3為不同基質(zhì)樣品提取液凈化前后的效果對比，說明本凈化方法，在保證回收率的前提下，可有效去除樣品中的脂肪、色素等內(nèi)源性雜質(zhì)。

3.3 線性關(guān)系和靈敏度

取適量PFASs混合標(biāo)準(zhǔn)溶液和內(nèi)標(biāo)溶液，配制成系列濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在2.3節(jié)條件下依次測定，以各組分和內(nèi)標(biāo)物的面積比值為縱坐標(biāo)，各組分的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸分析。在空白樣品中添加一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，以信噪比（S/N≥3）確定各組分檢出限（LOD），結(jié)果見表2。結(jié)果表明，23種PFASs的線性良好，靈敏度較高，適用于PFASs的定量分析。

3.4 準(zhǔn)確度和精密度

選取鯉魚、對蝦和扇貝為測試基質(zhì)，分別添加相當(dāng)于0.1和0.5 μg/kg濃度的PFASs混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按本方法進(jìn)行測定，每個濃度做6個平行樣品。同時做空白實(shí)驗(yàn)，均扣除本底值后計(jì)算加標(biāo)回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。結(jié)果表明，PFASs在鯉魚中的加標(biāo)回收率在83.1%～113.7%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.7%～13.2%； PFASs在對蝦中的加標(biāo)回收率在75.6%～107.5%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.6%～14.5%；PFASs在扇貝中的加標(biāo)回收率在85.0%～118.2%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.0%～12.9%。本方法的準(zhǔn)確度與精密度能滿足水產(chǎn)品中污染物的分析要求。

3.5 實(shí)際樣品分析

應(yīng)用本方法測定了10個市售水產(chǎn)品（3個淡水魚、2個海水魚、2個貝類、2個甲殼類和1個海參樣品），結(jié)果發(fā)現(xiàn)，部分樣品存在PFASs污染，總量為0.246～1.843 μg/kg，其中長鏈PFASs的檢出率較高，在水產(chǎn)品中富集普遍。同時，采用堿消解結(jié)合固相萃取方法^[4]對實(shí)際陽性樣品進(jìn)行驗(yàn)證，由表3可見，本方法與采用堿消解結(jié)合固相萃取方法的測定結(jié)果較為一致。

本方法不僅豐富了PFASs的檢測種類，滿足歐盟最新政策要求，而且方法高效、經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確、靈敏，適用于水產(chǎn)品中PFASs的快速痕量分析。