短桿菌肽是由芽孢桿菌產(chǎn)生的一種常見和已被良好表征的跨膜肽物質(zhì)，被用作對抗革蘭氏陽性和某些革蘭氏陰性細(xì)菌的局部用抗生素。用反相液相色譜（RPLC）分析疏水性肽和蛋白質(zhì)難度很大。因?yàn)槿芤褐薪?jīng)常需要使用洗滌劑保持疏水性物質(zhì)的穩(wěn)定性，而這些洗滌劑容易發(fā)生聚集或沉淀，嚴(yán)重影響它們的回收，這些因素及其他原因使得難以用RPLC分離疏水性肽和蛋白質(zhì)。在ACQUITY UPC2 TM系統(tǒng)上使用沃特世（Waters？）超高效合相色譜技術(shù)分離典型跨膜肽-短桿菌肽的方法，可得到線性和可重復(fù)的結(jié)果，測定的OTC制劑濃度為標(biāo)示量的98.4%，是準(zhǔn)確、高精度分析短桿菌肽的方法。

沃特世解決方案：ACQUITY UPC2系統(tǒng)；ACQUITY？ SQD；ACQUITY UPC2 CSH氟苯基色譜柱；EmpowerTM 3軟件。

器：PDA、ACQUITY SQD PDA@280nm，分辨率為6nm（補(bǔ)償400～500nm）；色譜柱：ACQUITY UPC2 CSH氟苯基，3.0mmx100mm，1.7μm；柱溫：50°C；樣品溫度：15°C；UPC2 ABPR： 1885psi；進(jìn)樣量：1μL；流速：2.0mL/ min；流動相A：CO2；流動相B：含0.1%TFA的甲醇（除非另有標(biāo)示）；梯度：20%～30%B，1.5min。2.SQD條件

離子源：ES+；錐孔電壓：20V；毛細(xì)管電壓：3.7kV；源溫度：150°C；脫溶劑氣溫度：500°C；脫溶劑氣體流速：400L/hr；錐孔氣體流速：25L/hr；SIR： 922.6，930.3，941.9。

3.數(shù)據(jù)管理

Empower 3軟件。

4.樣品描述

用解硫胺素芽孢桿菌（短芽孢桿菌）制備的短桿菌肽從Sigma Aldrich公司購買，將樣品溶解在甲醇中制成0.5mg/mL濃度的溶液，如需要，可用甲醇稀釋。含有短桿菌肽的非處方軟膏是從當(dāng)?shù)厮幍曩徺I的。將0.2g軟膏溶解在10mL正己烷中，然后用5mL甲醇萃取短