劉建新，王金成，王瑞娟，賈海燕

（隴東學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 甘肅省高校隴東生物資源保護(hù)與利用省級重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅 慶陽745000）

土壤鹽漬化和干旱是影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)重要的逆境因子［1］。干旱和鹽害引起的滲透脅迫會導(dǎo)致植物氣孔關(guān)閉［2］，光合電子傳遞受抑［3］，光能利用率降低［4］，光合機(jī)構(gòu)破壞［5］。黑麥草（Loliumperenne）是目前我國栽培面積最大的禾本科優(yōu)質(zhì)牧草和草坪草，對保障家畜飼草供應(yīng)和維持生態(tài)平衡起著極其重要的作用。隨著全球氣候變暖，土壤鹽漬化和淡水短缺加劇，滲透脅迫已成為限制黑麥草生產(chǎn)的重要生態(tài)因子之一，探討提高其適應(yīng)滲透脅迫的有效途徑具有重要意義。

一氧化氮（nitric oxide，NO）是生物體中一種重要的信號分子，在植物響應(yīng)逆境脅迫的應(yīng)答中發(fā)揮著重要作用［6］。研究表明，干旱脅迫下，NO 參與調(diào)控小麥（Triticumaestivum）氣孔的關(guān)閉［7］，提高核桃（Juglansregia）的光能轉(zhuǎn)換效率［8］。鹽脅迫下，NO可緩解黃瓜（Cucumissativus）葉肉細(xì)胞光合活性的下降［9］，提高番茄（Lycopersiconesculentum）的光合速率［10］。缺鐵時，NO能促進(jìn)玉米（Zeamays）類囊體膜色素蛋白復(fù)合體的裝配，引起電子傳遞速率增加和光合活性增強(qiáng)［11］。外源NO對滲透脅迫下黃瓜［12］和小麥［13］種子的萌發(fā)具有顯著的促進(jìn)作用，并可緩解滲透脅迫對紅三葉（Trifolium）幼苗生長的抑制和氧化損傷［14］。然而，NO對滲透脅迫下黑麥草光合和生物發(fā)光特性影響的研究未見報道。本研究以牧草型多年生黑麥草為材料，分析NO供體硝普鈉（sodium nitroprusside，SNP）對滲透脅迫下光合色素含量、氣體交換和葉綠素?zé)晒鈪?shù)及生物發(fā)光的影響，以期為NO緩解牧草滲透脅迫傷害提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料培養(yǎng)

試驗(yàn)于2010年4－8月在甘肅省高校隴東生物資源保護(hù)與利用省級重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。將黑麥草品種‘Oupec’的種子（購自百綠集團(tuán)北京代理處）消毒、催芽后，選露白一致的播種在裝有珍珠巖的塑料缽（直徑20 cm，高22cm）中，每缽播約200粒，澆足水后置生物科技園日光溫室培養(yǎng)。出苗后每隔2d澆一次1/4Hoagland營養(yǎng)液，常規(guī)管理。幼苗三葉一心時，選一致壯苗用1/2Hoagland營養(yǎng)液培養(yǎng)，1周后換成完全營養(yǎng)液，每3d更換1次營養(yǎng)液，用電動氣泵24h通氣，當(dāng)植株具5～6片葉時進(jìn)行處理。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計

試驗(yàn)首先在10%，15%，20%和25%濃度的聚乙二醇6000（polyethylene glycol 6000，PEG6000）滲透脅迫下分別添加50或100μmol/L SNP［Na2Fe（CN）5NO］處理幼苗，以葉片質(zhì)膜相對透性為指標(biāo)，篩選出進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)的PEG6000濃度為15%，SNP濃度為100μmol/L。

由于SNP的分解產(chǎn)物除NO外，還有NO2－/NO3－和Fe（CN）52－陰離子［7］，所以在試驗(yàn)中加入一定濃度的NaNO3/NaNO2和Na3Fe（CN）6（后者也是SNP的相似物，但二者均不產(chǎn)生NO）作為相關(guān)對照。試驗(yàn)設(shè)6個處理：1）對照，Hoagland營養(yǎng)液；2）15%PEG6000；3）15%PEG6000＋100μmol/L SNP；4）15%PEG6000＋100 μmol/L NaNO2＋100μmol/L NaNO3（其中 NaNO2＋NaNO3以 NOx－表示）；5）15%PEG6000＋100μmol/L Na3Fe（CN）6；6）15%PEG6000＋100μmol/L SNP＋0.1%Hb（牛血紅蛋白 Hb，NO的清除劑），分別用CK、PEG、PEG＋SNP、PEG＋NOx－、PEG＋F、PEG＋SNP＋Hb表示，各處理液用Hoagland溶液配制。每個處理重復(fù)4次，隨機(jī)排列。處理液每天更換1次，用低濃度HCl或KOH調(diào)節(jié)pH至5.5±0.2。溫室內(nèi)平均光強(qiáng)620 μmol/（m2·s），晝/夜溫度（28±5）℃/（21±3）℃，濕度60%～75%，每天照光約12h，處理6d后取樣進(jìn)行分析測定。

1.3 測定指標(biāo)與方法

1.3.1 光合色素含量的測定 按李合生［15］的方法，稱取葉片鮮樣0.10g，加入10mL 80%丙酮研磨提取并定容至50mL。過濾，用分光光度計測定濾液A663、A646和A470值，計算葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素含量。

1.3.2 光合氣體交換參數(shù)的測定 采用CIRAS－2型光合測定系統(tǒng)（PP－systems，英國）在9：00－11：00（晴）測定幼苗倒數(shù)第2～3片功能葉的凈光合速率（net photosynthetic rate，Pn）、蒸騰速率（transpiration rate，Tr）、氣孔導(dǎo)度（stomatal conductance，Gs）和胞間 CO2濃度（intercellular CO2concentration，Ci）。氣孔限制值（stomatal limited value，Ls）由公式Ls＝1－Ci/Ca（Ca為大氣中CO2濃度）計算得出。測定時葉室內(nèi)源光強(qiáng)為600μmol/（m2·s），溫度25℃，O2含量21%，CO2濃度為360μmol/mol。

1.3.3 葉綠素?zé)晒鈪?shù)的測定 采用FMS－2型脈沖調(diào)制式熒光儀（Hansatech，英國）測定和計算暗適應(yīng)30min后幼苗倒數(shù)第2～3片功能葉的初始熒光（initial fluorescence，F(xiàn)o）、最大熒光（maximal fluorescence，F(xiàn)m）及光系統(tǒng)Ⅱ（photosystem Ⅱ，PSⅡ）最大光化學(xué)效率（maximal photochemical efficiency，F(xiàn)v/Fm）＝（Fm－Fo）/Fm，再測定光強(qiáng)為6 000μmol/（m2·s）下的穩(wěn)態(tài)熒光（steady－state fluorescence，F(xiàn)s）、最大熒光（Fm′）和最小熒光（minimum fluorescence，F(xiàn)o′），并計算光適應(yīng)下 PSⅡ?qū)嶋H光化學(xué)效率（actual photochemical efficiency of PSⅡ，ΦPSⅡ）＝（Fm′－Fs）/Fm′，光化學(xué)猝滅（photochemical quenching，qP）＝（Fm′－Fs）/（Fm′－Fo′）、非光化學(xué)猝滅（non－photochemical quenching，NPQ）＝Fm/Fm′－1［16］。用（1－qP）表示PSⅡ的激發(fā)壓，反映PSⅡ的關(guān)閉程度［17］。

1.3.4 超弱發(fā)光強(qiáng)度的測定 采用中國科學(xué)院生物物理研究所研制的超弱發(fā)光儀測定。取幼苗倒數(shù)第2～3片功能葉0.5g左右，在光強(qiáng)10μmol/（m2·s）白熾燈照射5min后立即放入測量杯中測量超弱發(fā)光（ultraweak luminescence，UWL）強(qiáng)度。測量參數(shù)：電壓800V，標(biāo)準(zhǔn)光源發(fā)光強(qiáng)度7 000counts/s。本底強(qiáng)度5counts/s，采樣時間200s，采樣間隔1s。樣品測定在暗室及恒溫（25±1）℃、恒濕（相對濕度75%±2%）條件下進(jìn)行。

1.3.5 葉片熒光強(qiáng)度的測定 采用日立F－4500熒光儀測定幼苗倒數(shù)第2～3片功能葉的熒光強(qiáng)度。測定條件為激發(fā)光（excitation light，EX）波長440nm，發(fā)射光（emitted light，EM）波長500～700nm，縫寬EX/EM 為10.0 nm/5.0nm，掃描速度12 000nm/min。

1.3.6 葉片磷光強(qiáng)度的測定 采用日立F－4500熒光儀測定幼苗倒數(shù)第2～3片功能葉的磷光強(qiáng)度。測定時EX波長為210nm，EM 波長為400～500nm，縫寬EX/EM 為10.0nm/5.0nm，掃描速度240nm/min。

1.4 統(tǒng)計分析

所有指標(biāo)測定至少重復(fù)3次，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，采用SPSS 16.0軟件方差分析，Duncan法多重比較（P＜0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 外源NO對滲透脅迫下黑麥草幼苗葉片光合色素含量的影響

與CK相比，PEG處理顯著提高了黑麥草葉片葉綠素a、葉綠素b含量和葉綠素a/b，降低了類胡蘿卜素含量（表1）；PEG＋SNP處理的葉綠素a、葉綠素b含量、葉綠素a/b和類胡蘿卜素含量分別比PEG處理提高了31.1%，19.8%，9.6%和40.9%；而增添 NO清除劑血紅蛋白處理（PEG＋SNP＋Hb）后，SNP的作用被消除。PEG＋NOx－和PEG＋F處理的葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素含量及葉綠素a/b與單獨(dú)PEG處理無顯著差異。

表1 外源NO對滲透脅迫下黑麥草幼苗葉片光合色素含量的影響Table 1 Effects of exogenous NO on content of photosynthetic pigment in leaves of ryegrass seedlings under osmotic stress

2.2 外源NO對滲透脅迫下黑麥草幼苗葉片光合參數(shù)的影響

引起Pn降低的因素有氣孔限制和非氣孔限制。Farquhar和Sharkey［18］認(rèn)為，當(dāng)Pn和Ci同時減小，且Ls增大時，Pn的下降主要是由Gs的降低引起的；否則，Pn的下降應(yīng)主要?dú)w因于非氣孔限制。與CK相比，PEG處理后黑麥草葉片的Pn、Gs、Tr和Ls顯著降低，Ci明顯升高（表2）；PEG＋SNP處理顯著降低了PEG處理下Pn、Gs、Tr、Ls下降和Ci提高的幅度；PEG＋SNP＋Hb處理逆轉(zhuǎn)了SNP對上述光合參數(shù)的調(diào)節(jié)效應(yīng)。與單獨(dú)PEG處理相比，PEG＋NOx－或PEG＋F處理對黑麥草幼苗各光合參數(shù)無顯著影響。由此表明，外源NO可緩解滲透脅迫下非氣孔限制引起的黑麥草Pn的降低。

表2 外源NO對滲透脅迫下黑麥草幼苗葉片光合氣體交換參數(shù)的影響Table 2 Effects of exogenous NO on photosynthetic gas exchange parameters in leaves of ryegrass seedlings under osmotic stress

2.3 外源NO對滲透脅迫下黑麥草幼苗葉片葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響

葉綠素?zé)晒鈪?shù)可反映環(huán)境因子對植物光合生理狀況的影響。Fv/Fm常用于度量PSⅡ原初光能轉(zhuǎn)換效率，反映PSⅡ利用光能的能力；ФPSⅡ反映了PSⅡ反應(yīng)中心在有部分關(guān)閉情況下實(shí)際原初光能捕獲效率［19］；激發(fā)壓（1－qP）反映的是PSⅡ的關(guān)閉程度，它與PSⅡ反應(yīng)中心電子受體，特別是QA的氧化還原狀態(tài)有關(guān)；NPQ反映的是PSⅡ天線色素吸收的光能不能用于光化學(xué)反應(yīng)而以熱的形式耗散的部分［18］。與CK相比，PEG滲透脅迫降低了黑麥草葉片的Fv/Fm和ΦPSⅡ，提高了（1－qP）和NPQ（表3）；PEG＋SNP處理顯著提高了滲透脅迫下的Fv/Fm和ΦPSⅡ，降低了（1－qP）和 NPQ；PEG＋SNP＋Hb處理消除了SNP對滲透脅迫下Fv/Fm、ΦPSⅡ提高及（1－qP）、NPQ降低的作用；PEG＋NOx－或PEG＋F處理的上述葉綠素?zé)晒鈪?shù)與單獨(dú)PEG處理無顯著差異。表明NO能夠提高滲透脅迫下黑麥草葉片PSⅡ的光能利用效率。

表3 外源NO對滲透脅迫下黑麥草幼苗葉片葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響Table 3 Effects of exogenous NO on chlorophyll fluorescence parameters in leaves of ryegrass seedlings under osmotic stress

2.4 外源NO對滲透脅迫下黑麥草幼苗葉片生物發(fā)光強(qiáng)度的影響

生物發(fā)光強(qiáng)度可反映植物體內(nèi)物質(zhì)代謝和能量轉(zhuǎn)化的活躍程度。當(dāng)體內(nèi)活性氧積累時，其中的羥基自由基與細(xì)胞膜上的多不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過氧化連鎖反應(yīng)，形成單線態(tài)氧（1O2），處于激發(fā)態(tài)的1O2退激回到基態(tài)時向外發(fā)射光子，形成UWL［20］。通常情況下，絕大多數(shù)的有機(jī)分子處于單線基態(tài)，當(dāng)分子被激發(fā)到較高能級并經(jīng)歷非輻射躍遷降落到第一電子激發(fā)單重態(tài)的最低振動能級后，部分分子會回到基態(tài)而產(chǎn)生熒光，另一部分分子則經(jīng)歷非輻射的系間竄越到達(dá)亞穩(wěn)的第一電子激發(fā)三重態(tài)，在三重態(tài)逗留后，再發(fā)生輻射躍遷下降到基態(tài)的各振動能級而發(fā)射磷光，組成蛋白質(zhì)的某些氨基酸分子可發(fā)生能級躍遷產(chǎn)生磷光［21］。黑麥草幼苗在PEG處理下葉片的UWL強(qiáng)度、熒光強(qiáng)度和磷光強(qiáng)度分別較CK提高了50.4%，26.1%和50.3%（圖1）；PEG＋SNP處理比PEG處理下的UWL強(qiáng)度、熒光強(qiáng)度和磷光強(qiáng)度分別降低了30.1%，15.6%和20.4%；增添NO清除劑處理（PEG＋SNP＋Hb）后SNP對3種生物發(fā)光的調(diào)節(jié)作用消失。PEG＋NOx－或PEG＋F處理與PEG處理相比，UWL強(qiáng)度和熒光強(qiáng)度無顯著差異，而磷光強(qiáng)度明顯增加。表明NO可能參與了滲透脅迫下黑麥草幼苗活性氧清除或防御蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞的調(diào)控。

3 討論

光合色素參與植物光能的吸收、傳遞和轉(zhuǎn)化，葉綠素a/b可反映類囊體的垛疊程度，類囊體的垛疊程度越高，光抑制越不容易發(fā)生，植株抵御逆境脅迫的能力就越強(qiáng)［22，23］。本試驗(yàn)表明，在15%PEG6000滲透脅迫下，施用100μmol/L SNP顯著提高了黑麥草幼苗葉片葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素含量及葉綠素a/b，而添加血紅蛋白Hb后SNP的效應(yīng)被消除；施用NOx－和Na3Fe（CN）6均未顯著改變滲透脅迫下光合色素的含量。SNP是NO常用的一種供體，0.5mmol/L SNP約能釋放2μmol/L的 NO［24］。NOx－是 NO的分解產(chǎn)物，Na3Fe（CN）6是SNP的相似物或分解產(chǎn)物，兩者均不能產(chǎn)生NO，Hb是NO的清除劑。因此，可以得出SNP釋放的NO提高了滲透脅迫下黑麥草葉片光合色素的含量和類囊體的垛疊程度，這與邵瑞鑫和上官周平［25］對受旱小麥的研究結(jié)果類似，其原因可能與NO能夠促進(jìn)葉綠體發(fā)育［11］有關(guān)。

光合作用的強(qiáng)弱可反映植株對逆境脅迫的抵抗能力［26］。干旱脅迫通過氣孔和非氣孔因素導(dǎo)致玉米光合速率下降［27］。本試驗(yàn)表明，外源NO可緩解滲透脅迫下黑麥草非氣孔限制引起的Pn的降低（表2）。進(jìn)一步的研究顯示，滲透脅迫下黑麥草葉片F(xiàn)v/Fm和ΦPSⅡ顯著降低，1－qP和NPQ明顯提高（表3），表明滲透脅迫造成了PSⅡ反應(yīng)中心的破壞，導(dǎo)致PSⅡ原初電子受體QA過度還原，激發(fā)能通過PSⅡ用于光化學(xué)過程的能量減少，光能利用率下降，光能過剩產(chǎn)生了光抑制［28］，為防止過剩光能對光合機(jī)構(gòu)造成進(jìn)一步傷害，加強(qiáng)熱耗散以保護(hù)PSⅡ的功能，這可能是黑麥草適應(yīng)滲透脅迫的一種保護(hù)機(jī)制［29］。諸多研究表明，NO在逆境脅迫下植物光合器官功能的維持中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。如外源NO提高了干旱脅迫下苜蓿（Medicagosativa）幼苗的原初光能轉(zhuǎn)換效率和PSⅡ的潛在活性［30］，增加了受旱小麥PSⅡ反應(yīng)中心開放的比例［25］，提高了強(qiáng)光脅迫下霍山石斛（Dendrobiumhuoshanense）PSⅡ過剩光能的非光化學(xué)耗散，緩解了光抑制破壞［31］。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，外源NO顯著緩解了滲透脅迫引起的黑麥草葉片F(xiàn)v/Fm和ΦPSⅡ下降及1－qP和NPQ提高的幅度（表3），表明NO不僅可以減輕滲透脅迫對PSⅡ反應(yīng)中心的損傷，維持PSⅡ的光化學(xué)活性，還可降低滲透脅迫下激發(fā)能的非光化學(xué)熱耗散。這可能也是NO緩解滲透脅迫對黑麥草葉片光合速率抑制的重要原因之一，但其作用機(jī)制有待進(jìn)一步揭示。

植物UWL是與植物能量代謝相聯(lián)系的低水平光子輻射［21］。研究表明，植物葉片的UWL主要來自于葉綠體［32］，而葉綠體UWL可能主要來自類囊體膜上的光合電子傳遞鏈［33］，但也受活性氧的影響［32］。本研究中，滲透脅迫誘導(dǎo)黑麥草葉片UWL強(qiáng)度顯著增加（圖1），這與UWL產(chǎn)生的活性氧機(jī)制［34］相符合。外源NO降低了滲透脅迫下黑麥草葉片UWL強(qiáng)度，表明NO可能緩解了滲透脅迫對光合鏈電子傳遞的抑制，或增強(qiáng)了滲透脅迫下體內(nèi)活性氧的清除能力，維持了類囊體膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性。滲透脅迫下黑麥草光能利用率的下降（表3），將產(chǎn)生過剩的激發(fā)能，多余的激發(fā)能會以光能或熱能的形式釋放，導(dǎo)致滲透脅迫下葉片熒光和磷光輻射的增強(qiáng)（圖1）及非光化學(xué)能量耗散的提高（表3）。外源NO顯著降低了滲透脅迫下黑麥草葉片熒光和磷光強(qiáng)度升高的幅度（圖1），減緩了滲透脅迫導(dǎo)致的非光化學(xué)能量耗散提高的幅度（表3）。表明NO可通過提高光能的利用效率，降低滲透脅迫誘導(dǎo)的過剩激發(fā)能對光合機(jī)構(gòu)的破壞，從而提高滲透脅迫下黑麥草葉片的光合速率。

綜上所述，滲透脅迫限制了黑麥草幼苗光合機(jī)構(gòu)功能的正常發(fā)揮，外源NO不僅能夠提高滲透脅迫下黑麥草葉片的光合色素含量，還可通過增加PSⅡ反應(yīng)中心的開放比例，降低非光化學(xué)能量耗散和生物發(fā)光強(qiáng)度，提高光能利用效率，從而緩解滲透脅迫下非氣孔因素引起的黑麥草葉片光合速率的下降，提高植株光合機(jī)構(gòu)對滲透脅迫的適應(yīng)能力。

［1］ 蔡建一，馬清，周向睿，等.Na＋在霸王適應(yīng)滲透脅迫中的生理作用［J］.草業(yè)學(xué)報，2011，20（1）：89－95.

［2］ Cornic G.Drought stress inhibits photosynthesis by decreasing stomatal aperture－not by affecting ATP synthesis［J］.Trends in Plant Science，2000，5：187－188.

［3］ Dodd I C，Critchley C，Woodall G S，etal.Photo inhibition in differently colored juvenile leaves ofSyzygiumspecies［J］.Journal of Experimental Botany，1998，49：1437－1445.

［4］ Morales F，AbadiáA，AbadiáJ.Photoinhibition and photoprotection under nutrient deficiencies，drought and salinity［A］.Advances in Photosynthesis and Respiration：Photoprotection，Photoinhibition，Gene Regulation，and Environment［M］.Netherlands：Springer Press，2006：65－85.

［5］ Gonzalez－Rodriguez A M，Martin－Olivera A，Morales D，etal.Physiological responses of tagasaste to a progressive drought in its native environment on the Canary Islands［J］.Environmental and Experimental Botany，2005，53：195－204.

［6］ Besson－Bard A，Pugin A，Wendehenne D.New insights into nitric oxide signaling in plants［J］.Annual Review of Plant Biology，2008，59：21－39.

［7］ Mata C G，Lamattina L.Nitric oxide induces stomatal closure and enhances the adaptive plant responses against drought stress［J］.Plant Physiology，2001，126：1196－1204.

［8］ 相昆，李憲利，王曉芳，等.水分脅迫下外源NO對核桃葉綠素?zé)晒獾挠绊懀跩］.果樹學(xué)報，2006，23（4）：616－619.

［9］ 樊懷福，郭世榮，焦彥生，等.外源一氧化氮對NaCl脅迫下黃瓜幼苗生長、活性氧代謝和光合特性的影響［J］.生態(tài)學(xué)報，2007，27（2）：546－553.

［10］ 吳雪霞，朱為民，朱月林，等.外源一氧化氮對NaCl脅迫下番茄幼苗光合特性的影響［J］.植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報，2007，13（6）：1105－1109.

［11］ 敬巖，孫寶騰，符建榮.一氧化氮改善鐵脅迫玉米光合組織結(jié)構(gòu)及其活性［J］.植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報，2007，13（5）：809－815.

［12］ 湯紹虎，周啟貴，孫敏，等.外源NO對滲透脅迫下黃瓜種子萌發(fā)、幼苗生長和生理特性的影響［J］.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，40（2）：419－425.

［13］ 張華，孫永剛，張帆，等.外源一氧化氮供體對滲透脅迫下小麥種子萌發(fā)和水解酶活性的影響［J］.植物生理與分子生物學(xué)學(xué)報，2005，31（3）：241－246.

［14］ 高景慧，席雪麗，劉記，等.外源NO對滲透脅迫下紅三葉幼苗生長抑制及氧化損傷的緩解效應(yīng)［J］.種子，2009，28（8）：24－28.

［15］ 李合生.植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)［M］.北京：高等教育出版社，2000：134－137.

［16］ 蘇秀榮，王秀峰，楊鳳娟，等.硝酸根脅迫對黃瓜幼苗葉片光合速率，PSⅡ光化學(xué)效率及光能分配的影響［J］.應(yīng)用生態(tài)學(xué)報，2007，18（7）：1441－1446.

［17］ Ono K，Nishi Y，Watannabe A，etal.Possible mechanisms of adaptive leaf senescence［J］.Plant Biology，2001，3：234－243.

［18］ Farquhar G D，Sharkey T D.Stomatal conductance and photosynthesis［J］.Annual Review of Plant Physiology，1982，33：317－345.

［19］ Carrasco R M，Rodriguez J S，Perez P.Changes in chlorophyll fluorescence during the course of photoperiod and in response to drought inCasuarinaequisetifoliaForst.and Forst［J］.Photosynthetica，2002，40（3）：363－368.

［20］ Foyer C H，Lopez－Delgado H，Dat J F，etal.Hydrogen peroxide－and glutathione－associated mechanisms of acclimatory stress tolerance and signalling［J］.Physiologia Plantarum，1997，100：241－254.

［21］ 魏玉霞，董川.磷光分析法在生命科學(xué)中的應(yīng)用新進(jìn)展［J］.生命的化學(xué)，2003，23（4）：320－322.

［22］ 高奔，宋杰，劉金萍，等.鹽脅迫對不同生境鹽地堿蓬光合及離子積累的影響［J］.植物生態(tài)學(xué)報，2010，34（6）：671－677.

［23］ 黃增榮，隆小華，劉兆普，等.KNO3對NaCl脅迫下兩菊芋品種幼苗生長及光合能力的影響［J］.草業(yè)學(xué)報，2011，20（1）：82－88.

［24］ Delledonne M，Xai Y J，Dixon R A，etal.Nitric oxide functions as a signal in plant disease resistance［J］.Nature，1998，394：585－588.

［25］ 邵瑞鑫，上官周平.外源一氧化氮供體SNP對受旱小麥光合色素含量和PSⅡ光能利用能力的影響［J］.作物學(xué)報，2008，34（5）：818－822.

［26］ 陳良，隆小華，鄭曉濤，等.鎘脅迫下兩種菊芋幼苗的光合作用特征及鎘吸收轉(zhuǎn)運(yùn)差異的研究［J］.草業(yè)學(xué)報，2011，20（6）：60－67.

［27］ 張仁和，薛吉全，浦軍，等.干旱脅迫對玉米苗期植株生長和光合特性的影響［J］.作物學(xué)報，2011，37（3）：521－528.

［28］ Santos C V.Regulation of chlorophyll biosynthesis and degradation by salt stress in sunflower leaves［J］.Scientia Horticulturae，2004，103（1）：93－99.

［29］ Bilger W，Bjorkman O.Role of the xanthophylls cycle，fluorescence and photosynthesis inHederacanariensis［J］.Photosynthesis Research，1990，25（5）：173－185.

［30］ 姜義寶，楊玉榮，鄭秋紅.外源一氧化氮對干旱脅迫下苜蓿幼苗抗氧化酶活性和葉綠素?zé)晒馓匦缘挠绊懀跩］.干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究，2008，26（2）：65－68.

［31］ 樊洪泓，李廷春，李正鵬，等.強(qiáng)光脅迫下外源NO對霍山石斛葉綠素?zé)晒夂涂寡趸到y(tǒng)的影響［J］.園藝學(xué)報，2008，35（8）：1215－1220.

［32］ 譚石慈，邢達(dá)，唐永紅，等.植物葉片超微弱發(fā)光光譜研究［J］.光子學(xué)報，2000，29（11）：961－965.

［33］ 李德紅，唐永紅，何永紅，等.白菜葉綠體的超弱發(fā)光機(jī)理初探［J］.激光生物學(xué)報，2002，11（1）：64.

［34］ Boveris A，Cadenas E，Chance B.Ultraweak chemiluminescence：a sensitive assay for oxidative radical reactions［J］.Federation Proceedings，1981，40：125－128.