晏燕 王萍
[摘要]目的探討血漿中IL-6、Aβ1-40、M-CSF、IL-1β、TNF-α對阿爾茨海默?。ˋD)的臨床診斷意義。方法選擇AD患者組74例,另選取100名健康老年者作為對照組。應用ELISA方法檢測血漿Aβ1-40、IL-6、M-CSF、IL-1β、TNF-α水平。結(jié)果(1)AD患者血漿Aβ1-40濃度[(108.4±6.5)pg/mL]與對照組[(103.5±7.1)pg/mL]比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。IL-6、M-CSF、IL-1β、TNF-α濃度分別為(180.9±50.6)pg/mL、(524.6±68.1)pg/mL、(40.45±6.14)pg/mL、(60.52±5.64)pg/mL,與正常對照組[(75.2±45.1)pg/mL、(320.5±80.8)pg/mL、(30.46±7.50)pg/mL、(36.64±15.32)pg/mL]比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。結(jié)論檢測AD患者血漿中Aβ1-40濃度對診斷無意義,而IL-6、M-CSF、IL-1β、TNF-α水平的檢測可以成為臨床輔助診斷AD的生物學指標。
[關(guān)鍵詞]阿爾茨海默??;IL-6;Aβ1-40;M-CSF;IL-1β;TNF-α
[中圖分類號]R749.1+6 [文獻標識碼]A [文章編號]1674-4721(2012)12(a)-0017-03
阿爾茨海默?。ˋlzheimer'sdisease,AD)是一種發(fā)生于老年和老年前期最常見的以進行性癡呆為特征的原發(fā)性大腦退行性疾病,其主要臨床表現(xiàn)為進行性記憶減退、認知障礙、個性改變及皮層分離癥,自制力和理解力喪失,晚期則為記憶力完全喪失,語言與行為能力喪失。病程一般為10年左右,最后呈嚴重癡呆以至植物人狀態(tài),不僅嚴重影響患者的生活質(zhì)量,而且給家庭和社會帶來沉重負擔,隨著社會老齡化現(xiàn)象的日益嚴重,AD已成為引起死亡的主要疾病之一[1]。目前AD的臨床診斷只是可能AD,最終確診仍需靠腦組織病檢,發(fā)現(xiàn)一定數(shù)量的神經(jīng)炎斑(neuriticplagues)和神經(jīng)元纖維纏結(jié)(neurofibrillarytangles)作為確診AD的生物學依據(jù)外,AD患者生前仍無其他可靠的生物學診斷指標。由于缺乏生物學標志,AD的臨床診斷主要基于各種以排除為主的診斷標準,它們提高了AD臨床診斷的準確率,但對早期AD與血管性癡呆(vasculardementia,VD)及正常衰老的鑒別卻較困難,這對AD的早期干預十分不利。雖然腦組織活檢可為其生前診斷提供重要的確診依據(jù),但還很難用于臨床常規(guī)開展。因此,尋找AD生(化)物標記物已成為當前國內(nèi)外有關(guān)學者極力關(guān)注的熱點課題。本研究通過聯(lián)合觀察幾種指標如血清中IL-6、Aβ1-40、M-CSF、IL-1β、TNF-α水平的變化,企圖尋找AD患者早期診斷的生物學指標,延緩發(fā)病過程,提高患者生活質(zhì)量,減少對家庭和社會造成的經(jīng)濟負擔[2-3]。
1資料與方法
1.1一般資料
選自2009年1月~2011年1月本院門診和住院部患者采用簡易智能狀態(tài)量表(MMSE)進行癡呆篩選,MMSE在相應教育程度分值以下為癡呆(文盲≤17分,小學文化≤20分,初中以上文化≤24分)。AD患者組74例,其中,男41例,女33例;年齡60~72歲,平均(65.8±5.8)歲。均符合美國國立神經(jīng)病語言障礙卒中研究所(NINCDS)和Alzheimer病及相關(guān)疾病協(xié)會(ADRDA)的臨床診斷標準。選取100名健康老年者作為對照組,其中,男58例,女42例;年齡58~75歲,平均(64.2±6.7)歲。兩組間年齡、性別構(gòu)成比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。均排除其他神經(jīng)系統(tǒng)及其他系統(tǒng)和物質(zhì)原因所致的癡呆。
1.2實驗方法
1.2.1標本采集 取靜脈血5mL,置聚丙烯EDTA抗凝管中,于4℃低溫以1000r/min離心3min,取上清于-70℃冰箱內(nèi)保存。
1.2.2實驗方法 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),操作嚴格按試劑盒說明書要求進行,IL-6、Aβ1-40、M-CSF、IL-1β、TNF-α試劑盒由晶美生物工程有限公司提供。
1.3統(tǒng)計學方法
計量資料以均數(shù)加減標準差表示,對兩組性別構(gòu)成進行卡方一致性檢驗,對兩組年齡、兩兩組間比較采用方差分析。統(tǒng)計軟件采用SPSS13.0,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義,P<0.01為差異有高度統(tǒng)計學意義。
2結(jié)果
AD患者血漿Aβ1-40濃度[(108.4±6.5)pg/mL]與對照組[(103.5±7.1)pg/mL]比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。AD患者血漿IL-6、M-CSF、IL-1β、TNF-α水平分別為(180.9±50.6)pg/mL、(524.6±68.1)pg/mL、(40.45±6.14)pg/mL、(60.52±5.64)pg/mL,與正常對照組[(75.2±45.1)pg/mL、(320.5±80.8)pg/mL、(30.46±7.50)pg/mL、(36.64±15.32)pg/mL]比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表1。
3討論
阿爾茨海默?。ˋD)是最常見的成人癡呆病,雖然國內(nèi)外許多學者進行了大量的研究工作,AD的病因及發(fā)病機制仍然不十分清楚[4]。AD的診斷目前主要仍采取排除法,依靠詳細的病史、認知功能檢查、體格檢查及有關(guān)實驗室檢查包括腦CT、PET、腦電地形圖等,以排除其他原因引起的癡呆。雖然很多學者都在試圖尋找AD的特異性標志,以便對AD做出早期和確切的診斷,但目前缺乏確切可靠的資料,尚無公認的單一生物學指標可以確診,最終確診需進行腦病理組織學檢查,依據(jù)發(fā)現(xiàn)一定數(shù)量的神經(jīng)炎斑和神經(jīng)元纖維纏結(jié)。雖然腦組織活檢可為其生前診斷提供重要的依據(jù),但還很難用于臨床常規(guī)開展,因此,找到大腦中樞神經(jīng)組織以外的能夠早期發(fā)現(xiàn)和確診AD的生物學指標是至關(guān)重要的[5-6]。
大量尸檢資料證實,AD腦內(nèi)存在炎癥病理改變,而近年來的體外研究和動物體內(nèi)誘發(fā)實驗表明,異常沉積的Aβ可能是炎癥反應的激發(fā)因子,它持續(xù)地激活炎癥修復機制,并將正常情況下的急性反應轉(zhuǎn)變?yōu)槁匝装Y損傷。神經(jīng)膠質(zhì)細胞及其產(chǎn)生的多種炎性產(chǎn)物介導了這一病理損傷過程。在Aβ刺激下,小膠質(zhì)細胞產(chǎn)生IL-1是始動環(huán)節(jié),IL-1除上調(diào)小膠質(zhì)細胞或星形膠質(zhì)細胞表達其他細胞因子外,尚誘導補體、急性期蛋白、氧自由基、前列腺素、一氧化氮、β-淀粉樣前體蛋白(β-APP)等生成增加。這些分子各自通過作用于膠質(zhì)細胞或神經(jīng)元,促進其他炎性分子的產(chǎn)生,這種交互作用促成了慢性炎癥反應的形成和炎性產(chǎn)物水平持續(xù)升高,對神經(jīng)生長與神經(jīng)可塑性、損傷與變性及各種死亡機制產(chǎn)生廣泛的影響[7-9]。
Aβ淀粉樣蛋白源于一種大的跨膜蛋白、由淀粉樣前體蛋白(APP)水解而成,由39~42個氨基酸組成,而APP具有神經(jīng)營養(yǎng)和神經(jīng)保護作用。APP可被α-、β-和γ-分泌酶裂解。關(guān)鍵的第一步是由β-分泌酶(BASE)或者α-分泌酶[ADAM10或ADAN7(TACE)]消化,成為無毒的較小的產(chǎn)物[10]。第二步是γ-分泌酶再對經(jīng)β-分泌酶分解的產(chǎn)物進行裂解,成為有毒的Aβ1-42肽和Aβ1-40肽。Aβ1-42含有42個氨基酸,在老年斑的形成中可能起著重要作用;Aβ1-40在C端少兩個氨基酸,存在于AD患者和正常人群中,它可能是細胞代謝的非病理性產(chǎn)物[4]。本研究證明,AD患者血漿Aβ1-40濃度與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義,提示檢測Aβ1-40濃度對診斷AD無意義。
隨著神經(jīng)免疫研究的進展,已有不少報道指出AD與免疫因子密切相關(guān)。有學者發(fā)現(xiàn)AD患者血清中白細胞介素-1(IL-1)、白細胞介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平升高,亦有文獻報道,在AD患者血清中巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)水平明顯升高[11-12]。而M-CSF是一種免疫調(diào)節(jié)細胞因子,通常在免疫應答的早期階段上調(diào),誘導效應細胞產(chǎn)生前炎癥細胞因子如IL-1β、IL-6、TNF-α等,啟動炎癥反應。因此,在AD的早期階段M-CSF明顯上調(diào),表明其在AD的病理發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要的作用。
基于上述發(fā)現(xiàn)和理論分析,本研究通過聯(lián)合觀察幾種指標如血清中IL-6、M-CSF、IL-1β、TNF-α等水平的變化,找出各指標與AD的相關(guān)性,以期尋找AD患者早期診斷的生物學指標,鑒別癡呆類型,并且為監(jiān)視癡呆患者的病情變化提供實驗基礎(chǔ);通過觀察以上血清學指標,企圖達到早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早預防、早治療,進而延緩AD的病程,改善預后,提高生活質(zhì)量;從以上多個指標入手,以期進一步深入研究導致AD發(fā)病的幾種不同的病理生理機制。
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(收稿日期:2012-10-15 本文編輯:陳 ?。?/p>