胡曉，馮立民，王佳麗

(1、浙江大學醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院檢驗科，浙江杭州310003；2、蕭山醫(yī)院檢驗科，浙江杭州311201)

肝硬化患者血漿凝血因子Ⅷ及常規(guī)凝血指標檢測結(jié)果分析

胡曉1，馮立民1，王佳麗2

(1、浙江大學醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院檢驗科，浙江杭州310003；2、蕭山醫(yī)院檢驗科，浙江杭州311201)

目的摘 要探討肝硬化患者血漿FⅧ及常規(guī)凝血指標的變化及臨床意義。方法對131例肝硬化患者和63例健康體檢者進行了血漿FⅧ及常規(guī)凝血四項的檢測和對比分析，并觀察上述指標與Child-Pugh肝功能分級和肝功能代償能力的關(guān)系。結(jié)果肝硬化患者與健康對照組相比，血漿FⅧ、PT、APTT和TT顯著升高，F(xiàn)bg顯著降低(P＜0.01)，且隨著肝臟損害程度的增加，肝功能分級級數(shù)的上升，血漿FⅧ、PT、APTT和TT逐漸升高，F(xiàn)bg依次降低(P＜0.05)。血漿FⅧ水平與肝臟的代償能力密切相關(guān)，失代償?shù)母斡不颊哐獫{FⅧ水平顯著高于代償性肝硬化患者(P＜0.01)。結(jié)論血漿FⅧ與常規(guī)凝血四項指標的檢測對了解肝硬化患者肝臟的損害程度、出凝血功能狀況、出血傾向,血栓形成傾向等有著重要的意義，有利于臨床指導治療和判斷預后。

肝硬化；凝血因子Ⅷ；Child-Pugh肝功能分級

肝硬化患者因肝細胞纖維化，肝功能受損而常發(fā)生出凝血系統(tǒng)、纖溶系統(tǒng)功能的紊亂。為了探討血漿凝血因子Ⅷ(factorⅧ,FⅧ)與常規(guī)凝血指標(PT、APTT、TT、Fbg)的檢測在肝硬化患者中的作用，我們對131例肝硬化患者和63例健康者進行了血漿FⅧ及常規(guī)凝血四項檢測，并觀察了這些指標與肝功能分級及一些臨床指征的關(guān)系。結(jié)果報告如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象131例肝硬化患者均來自浙大附屬一院，年齡23～83歲，平均54.4歲，男101例，女30例，其中伴有乙肝后硬化者100例，混合性肝硬化15例，酒精性肝硬化者10例，丙肝后硬化者3例，血吸蟲性硬化者3例。所有患者均符合2000年9月西安第十次全國病毒性肝炎及肝病學術(shù)會議制定的診斷及分型標準,并按Child-Pugh肝功能分級標準分級，相應分為Child A、Child B、Child C三級。納入研究的患者均未使用影響凝血機制的藥物及未合并血栓癥。正常對照組為63例體檢健康成人，男41例，女22例，年齡22～79歲，平均51.0歲，排除肝腎系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、凝血系統(tǒng)疾病。年齡和性別均無顯著性差異。

1.2 標本采集符合入選標準的患者入院次日清晨空腹平臥采集靜脈血2.7ml，用0.109 mol/L枸櫞酸鈉以9：1比例混合，經(jīng)3 000 r/min離心10min后，取血漿用于檢測。

1.3 儀器與試劑項目檢測采用Sysmex-CA7000全自動血凝分析儀及原裝配套的DADE凝血試劑，并有相應的質(zhì)量控制措施。嚴格按照說明書操

作。PT、APTT、TT、FⅧ采用凝固法，F(xiàn)bg采用Clauss法。

1.4 統(tǒng)計學處理采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學分析。實驗數(shù)據(jù)以x±s表示；兩組間比較采用U檢驗(Mann-Whitney U test),多組間數(shù)據(jù)比較用H檢驗(Kruskal-Wallis H test)，率的比較用卡方檢驗。以P＜0.05為有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 肝硬化患者血漿FⅧ、PT、APTT、TT和Fbg水平與健康對照組結(jié)果比較見表1。肝硬化患者PT、 APTT、TT、FⅧ:C均顯著高于對照組(P＜0.05)，F(xiàn)bg顯著低于對照組(P＜0.05)。

2.2 肝硬化患者按Child-Pugh肝功能分級，各組血漿FⅧ、PT、APTT、TT和Fbg結(jié)果比較見表2。三組之間血漿各項凝血指標差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)

2.3 代償性肝硬化患者和失代償性肝硬化患者血漿FⅧ、PT、APTT、TT和Fbg結(jié)果比較見表3。失代償性肝硬化患者的PT、APTT、TT和FⅧ顯著高于代償性肝硬化患者(P＜0.05)，F(xiàn)bg顯著低于代償性肝硬化患者(P＜0.05)。

表1 肝硬化患者與健康對照組血漿FⅧ、PT、APTT、TT和Fbg

表1 肝硬化患者與健康對照組血漿FⅧ、PT、APTT、TT和Fbg

注：*P＜0.05。

組別nPT(s)APTT(s)TT(s)Fbg(g/L)FⅧ:C(%)肝硬化組健康對照組131 63 16.1±5.5*10.9±0.5 43.3±15.5*29.4±3.2 21.6±4.8*17.2±1.4 2.0±0.9*2.9±0.8 156.3±86.5*102.4±26.5

表2 按Child-Pugh肝功能分級各組血漿FⅧ、PT、APTT、TT和Fbg

表2 按Child-Pugh肝功能分級各組血漿FⅧ、PT、APTT、TT和Fbg

注：*P＜0.05。

組別nPT(s)APTT(s)TT(s)Fbg(g/L)FⅧ:C(%) Child-A級Child-B級Child-C級χ2 37 65 29 12.5±1.1 14.8±2.1 23.5±7.1 81.24*32.1±5.7 41.0±9.4 63.8±17.1 62.23*19.4±1.4 21.2±4.1 25.5±6.8 38.70*2.4±0.8 2.0±1.0 1.3±0.6 34.46*123.3±35.7 155.3±82.8 200.6±118.0 9.50*

表3 代償性肝硬化患者和失代償性患者血漿FⅧ、PT、APTT、TT和Fbg

表3 代償性肝硬化患者和失代償性患者血漿FⅧ、PT、APTT、TT和Fbg

注：*P＜0.05。

組別nPT(s)APTT(s)TT(s)Fbg(g/L)FⅧ:C(%)代償組失代償組37 94 13.4±1.9*17.1±6.1 36.6±10.8*45.9±16.4 20.7±5.3*22.0±4.6 2.3±0.8*1.8±0.9 120.8±38.3*170.2±95.8

3 討論

肝臟不僅是機體內(nèi)多種凝血、抗凝組分和纖溶因子的合成場所，同時也是滅活各種活化的凝血因子和纖溶激活物的主要器官，其對維持機體的出凝血系統(tǒng)和纖溶系統(tǒng)的動態(tài)平衡起到重要的作用。肝硬化時，肝臟會呈進行性、彌漫性、纖維性病變，表現(xiàn)為肝細胞彌漫性變性壞死，繼而出現(xiàn)纖維組織增生和肝細胞結(jié)節(jié)狀再生而引起肝功能嚴重受損，導致出凝血系統(tǒng)和纖溶系統(tǒng)的失衡，可出現(xiàn)多種凝血指標的異常。本研究通過觀察肝硬化患者的血漿FⅧ與常規(guī)凝血指標的變化,為臨床評價患者的病情及判斷預后提供客觀的實驗室依據(jù)。

FⅧ是存在于血漿中的一種球蛋白，分子量為330 000，由2332個氨基酸殘基組成。FⅧ不僅由肝細胞合成產(chǎn)生，而且竇內(nèi)皮細胞與庫普弗細胞也可合成產(chǎn)生，其它組織如腎臟也有少量FⅧ生成。本研究顯示：肝硬化患者的血漿FⅧ水平顯著升高，F(xiàn)Ⅷ水平還與患者的肝功能代償能力有關(guān)，失代償患者的血漿FⅧ水平顯著高于肝臟有代償功能的患者。Kerr R[1]的研究結(jié)果也表明了肝硬化患者的血漿FⅧ水平較健康對照顯著升高，并在急性肝衰竭時有非常顯著地升高。肝硬化患者由于其肝功能的損傷，肝臟合成FⅧ的量是減少的，但肝硬化患者的血漿FⅧ水平反而升高，這說明肝硬化患者血漿FⅧ的升高不是因為肝臟合成FⅧ增加，而可能是由于肝外細胞合成FⅧ增加，肝臟清除FⅧ的能力減弱而引起的。肝臟清除FⅧ途徑主要是通過低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白(low density lipoprotein receptor-related protein,LPR)進行的。肝硬化時，LPR合成會隨著肝臟損害程度的增加而進行性減少[2]，LPR合成的減少又引起肝臟清除血漿FⅧ的能力減弱。Bugnicourt JM及Martinelli I等的研究也表明血漿FⅧ水平的升高會顯著地增加靜脈血栓的風險，是血栓形成的重要的危險因素之一[3，4]。這表明肝硬化患者隨著肝細胞受損程度

的增加，肝臟代償能力的下降，維持機體出凝血系統(tǒng)、纖溶系統(tǒng)平衡能力下降，發(fā)生靜脈血栓性疾病的風險也顯著增加。

PT是反映外源凝血系統(tǒng)最常用的篩選試驗，其凝固時間取決于凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ和纖維蛋白原的水平。肝功能輕度受損，PT仍可正常，它僅在肝細胞受損嚴重時才會明顯延長。APTT是反映內(nèi)源凝血系統(tǒng)較敏感和常用的篩選試驗。TT是反映血漿纖維蛋白原的水平及肝素樣物質(zhì)的多少的指標，TT延長表示纖溶活動增強，纖維蛋白降解產(chǎn)物和血液中類肝素抗凝物質(zhì)增多。纖維蛋白原(Fbg)是一種由肝臟合成的具有凝血功能的蛋白質(zhì)，是纖維蛋白的前體，它不僅是一種急性時相蛋白,同時也是參與凝血過程的重要因子。本研究顯示：肝硬化患者相對于健康對照組，其PT、APTT、TT出現(xiàn)明顯的升高，F(xiàn)bg明顯降低，并和Child-Pugh肝功能分級密切相關(guān)。PT、APTT、TT、Fbg和肝臟的代償能力有一定的關(guān)系。

肝功能的損傷常常伴有出凝血功能障礙。其原因可能是凝血因子生成減少或消耗增加；維生素K的吸收、利用發(fā)生障礙，維生素K依賴性凝血因子的前體不能轉(zhuǎn)變成有活性的凝血因子；清除組織凝血活酶和被激活的纖溶因子的能力下降；肝素酶合成降低，肝素滅活能力下降，血漿中肝素和類肝素抗凝物質(zhì)增多等多種因素。當出凝血系統(tǒng)、纖溶系統(tǒng)的平衡一旦被破壞，可出現(xiàn)低凝或高凝狀態(tài)。因此，肝功能嚴重受損的肝硬化患者可出現(xiàn)出血，也可出現(xiàn)血栓[5]。這種矛盾現(xiàn)象反映了機體的出凝血系統(tǒng)、纖溶系統(tǒng)發(fā)生了紊亂。檢測血漿FⅧ是常規(guī)凝血指標的有益補充，血漿FⅧ能反映機體有無血栓形成傾向，常規(guī)凝血指標能反映肝臟的損傷程度，從而進一步的指導臨床分析病情，判斷預后。

[1]Kerr R.New insights into haemostasis in liver failure[J].Blood Coagul Fibrinolysis,2003，14(1):S43-S45.

[2]Saenko EL,Yakhyaev AV,Mikhailenko I,et al.Role of the low density lipoprotein-related protein receptor in mediation of factor VIII catabolism[J].J Biol Chem,1999，274(53):37685-37692.

[3]Bugnicourt JM,Roussel B,Tramier B,et al.Cerebral venous thrombosis and plasma concentrations of factor VIII and von Willebrand factor:a case control study[J].J Neurol Neurosurg Psychiatry, 2007，78(7):699-701.

[4]Martinelli I,Primignani M,Aghemo A,et al.High levels of factor VIII and risk of extra-hepatic portal vein obstruction[J].J Hepatol, 2009,50(5):916-922.

[5]林莎,祁曉婷,毛衛(wèi)林,等.血漿D-二聚體及凝血指標在肝硬化、肝癌患者中的應用價值[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2011,29(3):279-280.

Analysis of test results of factorⅧand conventional coagulation indexes in patients with liver cirrhosis

HU Xiao,FENG Limin,WANG Jiali.Department of Clinical laboratory,the First Affiliated Hospital,College of Medicine,Zhejiang University, Hangzhou 310003,China

ObjectiveTo explore the clinical significance of detecting factorⅧ(FⅧ),prothrombin time(PT),activated partial thromboplatin time(APTT)，fibrinogen(Fbg)and thrombin time(TT)in the patients with liver cirrhosis.Methods Plasma coagulation factors were detected in 131 cases of liver cirrhosis patients and 63 healthy persons and the relationship between these coagulation index and Child-Pugh classification of liver function was assessed．Results The plasma levels of FⅧ,PT,APTT and TT were higher and the concentration of Fbg was lower in patients with liver cirrhosis than those in healthy persons(P＜0.01).There were significant differences among three groups of Child-Pugh classification.The plasma levels of FⅧin patients with decompensated cirrhosis were significantly higher than those in patients with compensated cirrhosis(P＜0.01).Conclusion The detection of FⅧ,PT,APTT,Fbg and TT has important significance in assessing the severity of liver cirhosis and understanding blood coagulation status,bleeding tendency and thrombophilia in patients with liver cirrhosis.It will help clinicians adopt effective treatment measures to save the patient's life．

Liver cirrhosis;FactorⅧ;Child-Pugh classification of liver function

R446.11+1,R657.3+1

A

1674-1129(2013)01-0024-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.01.009

胡曉，本科，技師，主攻生物化學與凝血功能診斷。